Теста на днк впч

Скрининговый тест, использующийся в целях диагностики предраковых состояний и рака шейки матки.

Существует более 100 генотипов вируса папилломы человека. Инфицирование этим вирусом – достаточно распространённое явление. Передаётся инфекция обычно половым путём, в редких случаях возможна вертикальная передача вируса от матери к ребёнку во время родов.

Инфицирование вирусом папилломы может не иметь клинических проявлений, часто наблюдается естественное очищение организма от вируса, особенно в молодом возрасте. Но персистенция вируса в эпителии шейки матки в течение длительного времени может вызывать его патологические изменения.

Рак шейки матки – один из немногих видов злокачественных новообразований, для которых установлена основная причина возникновения заболевания. Многочисленными исследованиями показано, что ДНК вируса папилломы человека обнаруживается практически при всех случаях предраковых состояний и при раке шейки матки. Инфицирование вирусом папилломы предшествует последующей сквамозной (чешуйчатой) интраэпителиальной дисплазии шейки матки. Третья стадия интраэпителиального новообразования шейки матки возникает только при наличии персистирующей инфекции генотипами папилломавируса высокого онкогенного риска. Доказано, что длительная персистенция (5 – 10 лет) папилломавируса генотипов высокого онкогенного риска у женщин старше 30 лет связана со значительным ростом риска развития злокачественных изменений шейки матки. Инфицирование вирусом папилломы генотипов низкого онкогенного риска может клинически проявляться в виде появления остроконечных кондилом.

Digene HPV тест – защищённая международным патентным законодательством молекулярная технология фирмы Digene, направленная на выявление специфических фрагментов ДНК вируса папилломы человека (метод «гибридного захвата»).

Digene HPV тест дает возможность дифференцировать между 2 группами генотипов вируса – высокого и низкого онкориска. В тесте № 394 выявляется наличие ДНК HPV группы генотипов высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68). В тесте № 395 выявляется наличие ДНК HPV группы генотипов низкого риска (6/11/42/43/44).

Digene HPV тест получил широкое распространение благодаря своей надежности и простоте применения. Чувствительность теста в комбинации с цитологическим исследованием (PAP-тест, в лаборатории ИНВИТРО тест № 517) в обнаружении предраковых изменений шейки матки и рака шейки матки намного выше, чем проведение только цитологического исследования. Считается целесообразным проведение Digene HPV теста при неопределённых результатах PAP-теста. В настоящее время комбинация Digene HPV теста и цитологического PAP-теста становится «золотым стандартом» в этой области диагностики и предлагается для скринингового обследования женщин старше 30 лет. Метод стандартизован. Это единственный тест выявления HPV высокого онкогенного риска, одобренный FDA (Федеральное Управление США по контролю за пищевыми продуктами и лекарствами). Тест получил одобрение ФСНСЗСР (Федеральная служба РФ по надзору в сфере здравоохранения и социального развития).

Digene-тест выявляет клинически значимый уровень инфицирования вирусом папилломы человека, приводящий к развитию неоплазии шейки матки (в отличие от обычных ПЦР-методов, направленных на максимальную чувствительность выявления вирусной ДНК, что не всегда имеет прямые клинические корреляции). Положительный Digene HPV тест у женщин моложе 30 лет служит показанием к повторному тестированию через 9 месяцев, поскольку у молодых женщин инфекция ВПЧ может носить транзиторный характер.

Положительный Digene HPV тест у женщин старше 30 лет может свидетельствовать о персистенции вируса. При соответствующем результате цитологического исследования это означает, что женщина имеет высокий риск развития онкопатологии шейки матки и ей требуется специальная профилактика или лечение. Современные методы лечения позволяют в случае раннего выявления резко снизить заболеваемость раком шейки матки и особенно его инкурабельных случаев. Тестирование на присутствие вируса после проведённого лечения позволяет убедиться в его эффективности.

Вирус папилломы человека: вопросы и ответы

Что такое папилломавирусная инфекция?

Папилломавирусная инфекция – группа вирусных инфекционных заболеваний, характеризующихся развитием папилломатозных (бородавчатых) образований на коже и слизистых оболочках, хроническим рецидивирующим течением, широким распространением, высокой контагиозностью, т.е. способностью легко передаваться от человека к человеку.

Проявления папилломавирусной инфекции (ПВИ, ВПЧ) медикам известны давно. Они описаны еще врачами Древней Греции под названием «кондиломы». Гиппократ называл их также «половыми бородавками».

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – это достаточно распространенный вирус, который может вызвать серьезные заболевания вплоть до возникновения онкологических заболеваний.

По эпидемиологическим оценкам в мире инфицировано 10-13% населения или приблизительно 630 млн. человек. При проведении массовых скрининговых исследований ВПЧ обнаруживается у 40-50% сексуально активных мужчин и женщин, но у большинства из них, особенно в молодом возрасте, может исчезнуть без какого- либо лечения.

Как можно заразиться вирусом папилломы человека?

ВПЧ поражает всех – мужчин и женщин – и передается при половых контактах, а также при любых прямых контактах с кожей заражённого человека, однако очень редко метастазирует в отдельные органы и ткани человека.

Не случайно вирус папилломы человека – наиболее сексуально трансмиссивная инфекция. По данным некоторых исследователей, вероятность заражения ВПЧ при половом контакте составляет до 60-70%, частота инфицирования вирусом прямо пропорциональна числу половых партнёров: при наличии одного партнера ВПЧ выявляется у 17-20% женщин, при наличии 5 и более партнёров – у 70-80%.

Клинические формы папилломавирусной инфекции обнаруживают у 40-60% мужчин, являющихся половыми партнёрами инфицированных женщин. Поражения у них вызываются теми же типами ВПЧ, что и у женщин, а примерно в 2/3 случаев возникают характерные высыпания на коже и слизистых оболочках половых органов.

Несмотря на то, что вирус папилломы человека обнаружен в амниотической жидкости, риск заражения плода от матери оценивается как низкий и составляет – до 3%.

К каким заболеваниям может привести наличие у человека вируса папилломы?

На сегодняшний день известно более 300 различных типов вируса папилломы человека. Среди них различают типы ВПЧ высокого, среднего и низкого онкогенного риска. При этом человек может быть инфицирован как одним, так и несколькими типами вируса одновременно.

Различные типы ВПЧ вызывают или принимают участие в развитии:

цервикальной, вульвальной, влагалищной дисплазии шейки матки;
преинвазивного и инвазивного рака шейки матки, рака влагалища и перианальной области;
остроконечных кондилом половых органов, мочевых путей;
генитальных кондилом.

Согласно данным эпидемиологических исследований, частота ПВИ гениталий значительно варьирует в различных этнических и географических регионах. Распространённость вируса папилломы обусловлена многочисленными факторами, а также во многом определяется социально-экономическими, поведенческими и медико-гигиеническими условиями. Так, например, минимальная частота инфицирования ВПЧ (5%) наблюдается в Испании. Эта страна принадлежит к странам с «низким» риском заболевания раком шейки матки. Традиционно «высоким» риском инфицирования ВПЧ считаются страны – Аргентина, Мексика, Бразилия, Марокко. С другой стороны, в США и Канаде, несмотря на высокий социально- экономический уровень, частота выявления ВПЧ составляет от 22 до 26%.

Несмотря на очевидную медико-социальную значимость проблемы, системные исследования по оценке распространенности ПВИ в Российской Федерации практически не проводились. В настоящее время выполняются отдельные, нескоординированные исследования, согласно которым невозможно объективно оценить состояние проблемы в целом и осуществить даже приближённое прогнозирование эпидемиологической ситуации распространенности ВПЧ среди населения.

Как развивается и проявляется папилломавирусная инфекция?

Вирус папилломы человека обитает в коже и слизистых оболочках половых органов. Как показывают медицинские и лабораторные исследования, количество вируса зависит от состояния иммунитета кожи и слизистых – чем выше активность иммунной системы, тем меньшее количество вируса содержится в них. Для того, чтобы вирус мог проявить себя какими-либо симптомами, должно накопиться определенное его количество. А это возможно только при условии снижения иммунитета: после перенесённых инфекций, во время (после) приёма антибиотиков, при беременности, во время сильных стрессов и т. д. Накопившись в достаточной мере на участке кожи или слизистой, вирус папилломы изменяет функцию эпителиальных клеток. В результате они начинают бесконтрольно делиться, что приводит к разрастанию участка кожи и появлению разного рода образований – папиллом и кондилом.

В зависимости от проявлений ПВИ на гениталиях выделяют клиническую, субклиническую и латентную формы.

Клиническая форма инфекции – это в основном генитальные бородавки в виде остроконечных (экзофитных) образований. В редких случаях кондиломы наружных половых органов быстро разрастаются, превращаясь в полузлокачественное гигантское образование – опухоль Бушке – Левеншштейна, с экзо- и эндофитным ростом и способностью к проникновению в соседние ткани.

Субклиническая форма ПВИ проявляется в виде плоских кондилом. Они чаще локализуются на шейке матки, реже во влагалище, и в большинстве случаев не заметны при осмотре.

Латентная форма ПВИ не сопровождается морфологическими изменениями в инфицированной ткани, а ДНК вируса часто определяют, где нет заметных клинических признаков инфекции.

Как диагностировать наличие вируса папилломы человека?

Доказательством наличия вируса папилломы служат:

проявления инфекции ВПЧ;
результаты цитологического исследования (изучения характера клеток под микроскопом), свидетельствующего о дисплазии шейки матки;
выявление ВПЧ методом ПЦР;
выявление в крови антител к ВПЧ (используется только в научных целях).

В лабораторной практике для диагностики ВПЧ используются две методики: ПЦР и гибридизационный анализ (Дайджин – тест). В Независимой лаборатории ИНВИТРО для диагностики вируса папилломы человека используют оба метода.

Наиболее распространенным, доступным и достаточно чувствительным является метод ПЦР. Он позволяет диагностировать субклиническую и латентную формы инфекции и обнаружить от 10 до 100 копий генома ВПЧ и идентифицировать, по крайней мере, 43 различных типа.

Несмотря на высокую чувствительность ПЦР, при бессимптомной инфекции ВПЧ выявить вирус удается далеко не всегда. Это связано с особенностями этой инфекции:

инфекция ВПЧ может неопределенное время находиться в латентном (спящем) состоянии. При этом вирус находится в глубине кожи и слизистых, но на поверхность не выделяется. В таком состоянии его сложно выявить методом ПЦР.
инфекция ВПЧ в большинстве случаев поражает обширные участки кожи. При отсутствии симптомов не совсем ясно, исследование какого участка кожи будет более достоверным.

Дайджин – тест – позволяет выявлять не только 13 типов вируса высокоонкогенного риска и 5 типов низкого онкогенного риска ВПЧ, но и определять клинически значимую концентрацию вируса в ткани. Это помогает выработать дальнейшую тактику врача при ведении пациента. Чувствительность теста в сочетании с цитологическим исследованием в обнаружении дисплазий и рака шейки матки намного выше, чем проведение только цитологического анализа.

При цитологическом исследовании, которое также можно провести в Независимой лаборатории ИНВИТРО, часто используется окрашивание мазков по Папаниколау (PAP – тест).

В настоящее время комбинация Дайджин – теста и PAP –теста является «золотым стандартом» в области диагностики патологии шейки матки и предлагается для скринингового обследования женщин старше 30 лет. Положительный тест у женщин моложе 30 лет служит показанием к повторному тестированию через 9 месяцев, поскольку у молодых инфекция может носить транзиторный характер.

Положительный Дайджин – тест у женщин, старше 30 лет может свидетельствовать о персистенции вируса. При соответствующем результате цитологического исследования это означает, что имеется высокий риск развития онкопатологии шейки матки и это требует специальной профилактики и лечения.

Следует помнить, что диагностика ВПЧ инфекции – является одним из важных методов профилактики рака шейки матки и играет значительную роль в успешном лечении данного заболевания.

Однако выявление папилломавирусных инфекций требует современной технологической базы и высококачественных исследований. Именно это может предложить своим клиентам Независимая лаборатория ИНВИТРО.

Источник

Некоторые типы ВПЧ (всего их более 100) несут в себе канцерогенные свойства, то есть при определенных условиях способны провоцировать рост злокачественных опухолей. Вирус папилломы после проникновения в организм проявляется не сразу, он годами может нести скрытую угрозу здоровью человека. Вовремя выявить и предупредить развитие онкологических процессов поможет ВПЧ тестирование.

Что такое, и каким бывает тест на ВПЧ

Тест на ВПЧ – это исследование биоматериала взятого из цервикального канала, шейки матки (у женщин) или уретры (у мужчин). Проведенный анализ опровергает или подтверждает присутствие возбудителя, позволяет определить его тип, а также количество (вирусную нагрузку) в исследуемом материале.

Однократно проводить тестирования на ДНК ВПЧ рекомендуют всем без исключения лицам до 30 лет. Если результат анализа положительный (выявлено наличие возбудителя), врач назначает дополнительные диагностические мероприятия. Если же папилломавирус не обнаружен, профилактические обследования проводят каждые 3 года.

На сегодняшний день ВПЧ тест можно провести несколькими способами:

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – расширенный тест, выявляет наличие возбудителя, его тип и вирусную нагрузку;
Дайджен-тест – иное название «метод гибридного захвата». Эта дифференциальная диагностика вирусов с высоким онкогенным риском (определяется тип и концентрация возбудителя);
ПАП-тестирование – по сути это обычный цитологический анализ мазка по Папаниколау позволяющий определить наличие нетипичных клеток шейки матки (на сегодняшний день его удалось расширить и сделать более информативным);
ВПЧ ПАП тест расширенный – совокупность двух исследований (ВПЧ-тест + цитологический анализ Папаниколау). Выявляет тип и количество вируса, а также наличие клеточных аномалий;
ВПЧ ПАП-тест жидкостный – это два исследования объеденные в одно. Здесь также выполняют тест на ВПЧ и делают цитологический забор, однако биоматериал помещают в специфическую жидкую среду, это позволяет провести более глубокое тестирование.

Важно! Важным этапом при диагностике является правильный забор биоматериала – недостаточное присутствие геномной ДНК пациента в исследуемой жидкости может дать ложный результат. Поэтому для достоверности тестирования был внедрен специальный параметр КВМ – контроль взятия материала.

ПЦР-тестирование

Для проведения ПЦР-диагностирования подходит любая биологическая жидкость пациента – влагалищные или уретральные выделения, сперма, моча. Стоимость исследования варьирует от 700 до 1500 рублей (наиболее затратным является определение сразу нескольких высоко онкогенных типов ВПЧ). Результаты, как правило, готовы на 3 – 5 день после забора биоматериала.

Для получения достоверных результатов ПЦР-анализ проводят в середине менструального цикла (не раньше чем через 5 дней после и не позднее, чем за 5 дней до начала месячных). Забор биоматериала не проводят:

В период менструации;
В течение 2 суток после полового акта;
В течение 2 суток после применения вагинальных препаратов с содержанием жира, а также уксусных растворов, тампонов;
После спринцевания;
После кольпоскопии или вагинального УЗИ органов малого таза.

Также мазок не берется на протяжении 2 недель после применения местных антибактериальных и антисептических препаратов (после приема системных антибиотиков должно пройти не меньше 1 месяца). Мочеиспускание проводят не позднее, чем за 2 часа до взятия мазка из уретрального канала (это касается в основном мужчин).

Для выявления папилломавируса существует 4 методики ПЦР:

Качественный формат – показывает факт наличия вируса в организме;
Генотипирование – выполняют для определения типа ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР);
Количественный формат – определение вирусной нагрузки (концентрация возбудителя в изучаемом материале);
Комбинированный метод – это качественный формат + генотипирование.

Читайте также: Впч это страшно или нет

Результат анализов приходит через несколько дней, их расшифровка это прерогатива врача. Однако в качестве ознакомительной информации мы расскажем, как интерпретировать обозначения:

Lg<3,0 – отсутствие инфекции;
Lg 3,0-5,0 – пограничный уровень концентрации ВПЧ (превышение нормы);
Lg>5,0 – высокая вирусная нагрузка.

На основании полученных данных врач назначает максимально эффективную терапию.

Digene-тест

Дайджен или как его еще называют Дайджест-тест разработала компания Digene Diagnostics (отсюда название). В качестве исследуемого материала для анализа на ВПЧ берут соскоб из влагалища, цервикального канала, уретры. При исследовании определяют ДНК-фрагменты вируса, его тип и количественное соотношение.

Это наиболее чувствительный и точный тест (ошибки практически исключены), как правило, его применяют для выявления одного или нескольких канцерогенных типов ВПЧ способных привести к дисплазии и раку шейки матки.

Несмотря на то, что Digene-тест достаточно информативный его следует дополнять другими скрининговыми исследованиями – цитологией, кольпоскопией, ПЦР-диагностикой, ПАП-тестированием. Золотым стандартом медицины считается Дайджен-тест + цитологическое исследование. Комплексное обследование позволяет получить развернутый результат, на основе которого врач уже будет назначать лечение.

Какой-либо специфической подготовки перед проведением тестирования не требуется, достаточно выполнить обыкновенную гигиеническую процедуру (спринцевания исключены). Время проведения дайджен-теста от 7 до 14 дней.

ВПЧ ПАП-тест

ПАП-тест проводят при каждом гинекологическом осмотре – берется мазок из влагалища, внешней поверхности и канала шейки матки. Цитологический анализ по Папаниколау показывает наличие нетипичных клеток с высоким риском перерождения в онкологические опухоли. Однако этого не достаточно, ведь для адекватного лечения необходимо знать также генотип возбудителя и его количественное отношение.

Поэтому сегодня проводят расширенные тесты, включающие в себя несколько исследований.

ВПЧ ПАП-тест – совокупность расширенного исследования на ДНК ВПЧ и цитологию. В ходе анализа определяют серотип вируса, степень его канцерогенности и количественную нагрузку. Также проводят изучение цервикального соскоба на наличие онкопатологий шейки матки по Папаниколау – взятый мазок переносят на стекло, окрашивают специальным красящим веществом и изучают под микроскопом. Цена исследования от 2100 рублей;
ВПЧ ПАП-тест жидкостный (расширенный) – эта также объединенная методика включающая определение генотипа, вирусную нагрузку и степень онкогенности. В ходе анализа выполняют цитологическое исследование по Папаниколау для выявления онкопатологий, только забранный биоматериал помещают в специальную жидкостную среду. Это новая технология позволяющая снизить количество неадекватных соскобов и более точно выявить эпителиальные изменения, определить неоплазию, дисплазию или онкологию шейки матки. Стоимость анализа от 2000 рублей.

Такой инновационный подход позволяет провести сразу несколько исследований, взяв при этом один соскоб. Результаты анализов пациент получает спустя 3-7 дней после забора биоматериала.

Интерпретируют жидкостный ПАП-тест следующим образом (по системе Бетезда):

NILM – отклонений нет, мазок нормальный;
ASCUS – выявлено присутствие нетипичных клеток;
ASC-H – обнаружен плоскоклеточный эпителий (свидетельствует о начальной степени рака);
LSIL – нетипичные клетки в малой концентрации (возможна начальная стадия дисплазии, ВПЧ);
HSIL – высокая концентрация атипичных клеток указывающая на развитие онкопатологии;
AGS – изменение железистого эпителия (указывает на дисплазию или онкопатологии);
AIS – начальная стадия онкологического процесса;
High-grade SIL – выявлен плоскоклеточный рак.

Важно! ПАП-тест проводят всем без исключения женщинам после начала половой жизни. Метод безболезненный, несложный однако достаточно информативный для того чтобы на ранней стадии выявить эпителиальные изменения шейки матки и предотвратить онкологические процессы.

Анализ в домашних условиях

Женщинам, которые по разным причинам не могут посетить врача, но желают сделать анализ на ВПЧ могут провести экспресс-тест самостоятельно просто в домашних условиях.

Чтобы провести исследование достаточно купить в аптеке специальный набор, но при этом нужно соблюдать некоторые правила по забору биоматериала:

Не проводить тест во время менструации (для взятия мазка подойдет середина цикла);
Перед забором нельзя спринцеваться;
За 2-3 дня до анализа не использовать никакие вагинальные медикаменты.

Экспресс-тест проведенный самостоятельно не является методом диагностики, это профилактический анализ, который побуждает женщину в случае положительного результата обратиться к врачу и предотвратить возможное развитие онкологии.

Не следует проводить тестирование в домашних условиях на поздних сроках беременности (особенно если имеются осложнения или угроза прерывания). Отказаться от самостоятельного ВПЧ-анализа следует девушкам, не вступавшим в сексуальные отношения, а также лицам в недавнем времени прошедшим антибиотикотерапию.

Любые анализы лучше проводить в специализированном учреждении – для цитологического исследования достаточно посетить гинеколога, а вот расширенные ВПЧ тесты выполняют в медицинских или лабораторных центрах.

Видео в тему