Цитологическое исследование меланомы кожи

ХАРАКТЕРИСТИКА ОСНОВНЫХ КЛЕТОЧНЫХ ТИПОВ ПЕРВИЧНОЙ МЕЛАНОМЫ КОЖИ

  • Диагностику проводят специалисты высочайшей квалификации, с большим опытом клинической работы.
  • Тестирование проводится оперативно, в течение 1–3 суток.
  • При гистологической оценке материала применяются дополнительные критерии, которые не используются в лечебных учреждениях стран СНГ.
  • Возможно дистанционное исследование образцов материала.
  • Патологоанатомические лаборатории Израиля располагают необходимыми сертификатами для проведения любых тканевых исследований, в т.ч. генетических.

Меланома легко излечима в начальных стадиях и реально излечима даже на стадии микрометастазирования – решающее значение имеет вовремя и правильно поставленный диагноз.

Источники

  • Диагностика меланомы на первом этапе заключается в визуальном осмотре. Для этой цели используют увеличительное стекло.
  • Затем может быть проведено радиоизотопное исследование с применением фосфора.  Если в опухоли выявляется повышенное содержание фосфора, значит, опухоль перешла в злокачественную форму.
  • Биопсию стараются не использовать. Существует мнение, что она может негативно сказаться на меланоме и развитие пойдет более быстрыми темпами. Целесообразнее применять метод отпечатка поверхности образования. Его отправляют на цитологическое исследование.
  • Новейшая диагностика меланомы – это дерматоскопия. Суть заключается в том, что при помощи аппаратуры оценивается толщина, структура и цвет опухоли. Применяется отраженный свет. Метод дает полную информацию о меланоме и абсолютно безболезнен. Сначала опухоль обрабатывают специальным гелем. Потом направляют на нее галогеновую лампу. В итоге опухоль можно рассмотреть при увеличении в несколько десятков раз.
  • Цитологическая диагностика кожи отличается тем, что для анализа берут отпечаток изъязвления. Иногда может быть взят соскоб с применением деревянного шпателя. К сухим корочкам прикладывают тампоны, смоченные в физрастворе. Затем берут мазок, слегка прикасаясь к опухоли. Представленный анализ кожи дает возможность узнать, что за разновидность раковых клеток перед вами. Вы также можете узнать, как осуществляется диагностика меланомы с помощью онкомаркеров.

Существуют следующие типы меланомы кожи:

  • Смешанно-клеточная,
  • Эпителиоподобная,
  • Веретеноклеточная,
  • Невусоподобная.

У всех них есть свои особенности. Скорость деления раковых клеток тоже различная. В ряде случаев деление идет неявно. Распознать опухоль кожи в данном случае можно, осуществляя забор материала из лимфатических узлов.

Визуальный осмотр кожи – действенный метод выявления меланомы, находящейся уже в стадии развития

Цитологическая диагностика первичной меланомы кожи

мазки-отпечатки и соскобы с изъязвленной, мокнущей поверхности меланомы; пункция опухоли тонкой иглой (пункционная биопсия) с последующим нанесением (разбрызгиванием) пунктата тонким слоем на предметное стекло.

Очевидно, что в подавляющем большинстве наблюдений пункционная биопсия становится необходимой только при отсутствии изъязвления эпидермиса над опухолью.

Однако простое прикладывание предметного стекла к изъязвленной поверхности меланомы не всегда позволяет получить достаточно информативный материал. Лучшие результаты дает легкий соскоб изъязвленной поверхности опухоли деревянным шпателем или острым краем хирургического инструмента с последующим нанесением материала тонким слоем на стекло.

При наличии гнойного воспаления в опухоли и окружающих ее тканях целесообразно перед исследованием снять гнойный налет с поверхности опухоли с помощью марлевого тампона, смоченного физиологическим раствором.

Крайне нежелательно травмировать поверхность опухоли перед забором цитологического материала, так как при появлении кровоточивости неизбежно попадающие в мазок клетки крови значительно затрудняют микроскопический анализ цитограмм.

Поэтому, если поверхность опухоли покрыта сухими корочками, не отделяющимися при легком прикосновении, допустимо на несколько часов приложить к ней повязку с какой-либо индифферентной мазью и только после этого произвести забор цитологического материала.

В настоящее время следует считать окончательно установленным тот факт, что пункционная биопсия первичной меланомы кожи не ухудшает прогноза заболевания и может быть использована для морфологической верификации диагноза в случае отсутствия изъязвления эпидермиса над опухолью.

Кроме того, объектом цитологического исследования у больных меланомой кожи могут быть пункты увеличенных периферических лимфатических узлов при подозрении на их метастатическое поражение, особенно в тех случаях, когда первичную опухоль клинически выявить не удается.

В НИИ онкологии им. проф. Н. Н. Петрова диагностическая пункция опухоли с последующим забором цитологического материала используется в течение последних 30 лет.

Ни у одного из наблюдаемых нами пациентов не было отмечено прогрессирования опухолевого процесса или ухудшения прогноза заболевания вследствие этой процедуры.

Согласно методике, используемой в Институте, пункционная биопсия должна производиться в «чистой» перевязочной, стерильной тонкой иглой со шприцем. Игла при этом должна быть введена в поверхностные слои опухоли на глубину 1—2 мм, после чего производится 3—4-кратная аспирация клеточного материала в иглу.

В зависимости от преобладания в мазках опухолевых клеток с теми или иными цитоморфологическими особенностями выделяют 4 основных типа первичной меланомы кожи: энителиоподобный, веретеноклеточный, невусоподобный и смешанно-клеточный.

Эти же 4 основных клеточных типа опухоли определяются и при гистологическом исследовании. Идентификация клеточного типа первичной меланомы кожи посредством цитологического исследования имеет определенное клиническое значение, так как позволяет судить о прогнозе заболевания и планировать адекватную тактику лечения пациента.

В настоящее время определилась тенденция к более подробной цитологической характеристике меланомы кожи с выделением, кроме вышеописанных основных клеточных типов, различных их вариантов (подтипов).

Читайте также:  Меланома с метастазами в печени

Очевидно, что такая подробная характеристика меланомы играет свою роль при проведении дифференциальной диагностики, однако клиническое и прогностическое значение этил подтипов пока не определено.

Эпителиоподобный или эпителиоидноклеточный тип первичной меланомы кожи характеризуется преобладанием в мазках опухолевых, клеток округлой, неправильно округленной или овальной формы, расположенных разрозненно или в виде рыхлых скоплений, имеющих сходство с эпителиальными клетками (рис.

1—9). В ряде случаев опухолевые клетки довольно однородные, но чаще отмечается значительный их полиморфизм.

Они отличаются друг от друга по величине и форме, интенсивности окраски, количеству ядер и ядрышек, структуре хроматина. Встречаются отдельные опухолевые клетки с очень крупными интенсивно окрашенными ядрами, двуядерные и многоядерные клетки.

Ядра многих клеток — лопастные, бобовидные, имеют неровные контуры; иногда отмечаются почкование ядер и их фрагментация, встречаются фигуры митотического деления.

Структура хроматина ядер относительно равномерная, мелкозернистая или петлистая; во многих клетках в ядрах имеется по 1—2, а иногда и более гипертрофированных, неправильной формы ядрышек.

Цитоплазма клеток — то более, то менее обильная, с ровными или фестончатыми контурами. В одних случаях она окрашивается резко базофильно, в других — слабее, а иногда — прозрачная и почти сливается — с фоном препарата.

В связи с разнообразием цитологических картин при эпителиоподобной меланоме некоторые авторы выделяют следующие варианты: 1) крупноклеточный вариант с большим содержанием меланина;

2) крупноклеточный вариант с незначительным содержанием меланина; 3) крупноклеточный вариант с наличием гигантских клеток; 4) особый вариант с ортохромной цитоплазмой.

Выделяют и другие варианты эпителиоподобной меланомы, однако общей особенностью всех этих разновидностей является сходство опухолевых клеток с эпителиальными клетками.

При веретеноклеточной меланоме опухолевые клетки имеют вытянутую веретенообразную форму и располагаются разрозненно, скоплениями, переплетаясь отростками цитоплазмы, а также в виде пучков и тяжей (рис. 10—15).

Ядра — округлые и овальные, в некоторых клетках удлиненной вытянутой формы. Цитоплазма окрашивается базофильно, имеет отростки разной длины, иногда простирающиеся на значительные расстояния.

Пылевидные гранулы меланина наиболее сконцентрированы в отростках цитоплазмы, что придает им зернистый вид. Наличие пигмента в клетках позволяет дифференцировать веретеноклеточный тип меланомы от других соединительнотканных опухолей.

Цитограмма невусоподобной (невоидной, невусоклеточной) меланомы характеризуется наличием изолированно расположенных опухолевых клеток, средних и даже мелких, имеющих разнообразную форму (овальную, булавовидную, мелкоотростчатую, полигональную) и напоминающих элементы пигментного невуса (рис. 16—19).

Встречаются единичные крупные клетки, а также двуядерные клетки средней величины. Ядра клеток полиморфны, часто содержат увеличенные ядрышки. Цитоплазма клеток базофильная, иногда вакуолизированная.

Содержание меланина различно. В зависимости от формы опухолевых клеток выделяют полиморфно-клеточный и круглоклеточный варианты невусоподобной меланомы.

При смешанно-клеточной меланоме в мазках имеются опухолевые клетки разнообразной величины и формы, и трудно выделить какой-либо преобладающий тип клеток.

Определение клеточного типа меланом при цитологическом исследовании возможно лишь при наличии в мазках достаточного количества информативного материала.

Нередко отмечается несовпадение клеточных типов меланом, определенных при цитологическом и гистологическом исследовании. Это может быть связано с субъективностью суждения о преобладании в цитологическом или гистологическом препарате опухолевых клеток той или иной формы, а также с тем, что опухоль в разных участках может иметь неоднородное строение.

Мазок, полученный с ее небольшой поверхности, не отражает клеточный состав опухоли в целом. Провидение гистоцитологических сопоставлений с параллельным изучением гистологических и цитологических препаратов — наиболее реальный путь повышения точности цитологического исследования в определении клеточного типа меланомы.

Гистология удаленной родинки

Микроскопическая диагностика пигментных поражений кожи основана на выявлении и определении свойств малигнизированных меланоцитов. Агрегация (скопление) атипичных пигментных клеток может наблюдаться в нетипичных диспластических невусах.

Иногда их трудно отличить от поверхностного распространения злокачественной меланомы. Такие редкие формы, как десмопластическая меланома, морфологически схожа с доброкачественными изменениями кожи, что может стать причиной диагностических ошибок.

При проведении гистологии злокачественной меланомы кожи врачу-патологоанатому приходится оценивать много факторов:

  1. тип меланомы;
  2. толщина опухоли;
  3. наличие изъязвления;
  4. инфильтрация;
  5. степень сосудистой инвазии;
  6. поля оперативной резекции (края опухоли);
  7. митотическая скорость или уровни по Кларку.

Помимо этого, врач комментирует возможную инвазию лимфоцитов, наличие некроза, регрессию клеток и уровень нейротропности (рост опухоли относительно нервов).

По результатам гистологии рака кожи определяется тип опухоли, в соответствии с особенностями клеточной морфологии.

Толщина опухоли является наиболее важным фактором гистологической оценки. Измеряется она в микрометрах (мкм) и представляет собой самый длинный диаметр от верхней части опухоли до самой нижней (глубокой) эпидермальной опухолевой клетки.

Врач-патологоанатом, изучая удаленную патологическую ткань, должен убедиться, вся ли опухоль резецирована и отправлена на экспертизу, определить тип и стадию роста меланомы.

Любое подозрение на рак кожи необходимо сопровождать проведением гистологии.Гистологическая информация важна для выбора лечения и дальнейшей оценки состояния пациентов с меланомой.

Читайте также:  кто лечил меланому в германии

Сателлиты, присутствующие в дерме, также должны быть включены в препарат. Оценка толщины опухоли может оказаться неопределенной или невозможной, если имели место регрессивные изменения в опухоли.

В патоморфологический отчет о малигнизированной ткани должны быть включены следующие факторы:

  • гистологический тип (инвазивный или in-situ);
  • толщина опухоли при прорастании (Breslow) в десятых долях мм;
  • изъязвление (имеется или нет);
  • другие факторы (инфильтрация сосудов, инфильтрация лимфоцитов);
  • краевые поля резекции.

Для резецированных лимфатических узлов определяющими для диагностики и лечения, являются такие данные:

  • число метастатических узлов;
  • общее количество резецированных узлов;
  • периузловой рост опухоли;
  • свойства опухоли в области резецированного участка.

При гистологическом исследовании злокачественных меланом слизистых оболочек наблюдается переменная микроскопическая картина. Инфильтрация лимфоцитов менее выражена по сравнению с поражениями кожи.

Около 1/3 меланом в носу и полости рта амеланотичны. Этот тип опухолей трудно дифференцировать от других видов рака слизистых оболочек. В этом отношении полезной оказывается иммуногистохимия меланомы.

Процесс малигнизации способен затронуть родинки небольших размеров, и при проведении цифровой дерматоскопии внешние изменения невуса могут отсутствовать.

В связи с этим может быть предпринята ошибочная тактика лечения по радикальному удалению родинки с применением лазера, криодеструкции или электрокоагуляции.

В этом случае сдать родинку на гистологию невозможно, поскольку ткань невуса во время процедуры выжигается. В данном случае тактическая ошибка (выполнение операции без гистологии) может иметь очень серьезные последствия.

Гистология родинки после её удаления является непременным условием современной онкологии. По результатам гистологии невуса можно судить об эффективности и радикальности выбранного метода.

Источник

Одним из ведущих методов в адекватной диагностике первичной меланомы кожи является цитологическое исследование. Поскольку еще совсем недавно ножевая биопсия первичной опухоли считалась строго противопоказанной, длительное время цитодиагностика являлась единственным морфологическим методом верификации диагноза до начала лечения больного. К настоящему времени специалистами всего мира накоплен большой опыт получения цитологического материала из опухоли, проведения цитологического исследования и оценки его результатов.

Для клинициста-онколога наиболее важно представлять себе способы получения (забора) цитологического материала для последующего исследования и адекватно оценивать эффективность цитологического метода в диагностике первичной меланомы кожи. Описание различных окрасок мазков, особенности гистохимических реакций, методика цитологического исследования и цитоморфологическая характеристика меланомы кожи изложены в соответствующих руководствах по цитологической диагностике опухолей человека, методических рекомендациях и научных работах (Агамова и др., 1972; Агамова, Никитина, 1976; Агамова, Гладунова, 1985; Кирюшкина, 1985; Новик, 1987).

Различают следующие способы забора цитологического материала из первичной опухоли:

  1. мазки-отпечатки и соскобы с изъязвленной, мокнущей поверхности меланомы;
  2. пункция опухоли тонкой иглой (пункционная биопсия) с последующим нанесением (разбрызгиванием) пунктата тонким слоем на предметное стекло.

Очевидно, что в подавляющем большинстве наблюдений пункционная биопсия становится необходимой только при отсутствии изъязвления эпидермиса над опухолью.

Однако простое прикладывание предметного стекла к изъязвленной поверхности меланомы не всегда позволяет получить достаточно информативный материал. Лучшие результаты дает легкий соскоб изъязвленной поверхности опухоли деревянным шпателем или острым краем хирургического инструмента с последующим нанесением материала тонким слоем на стекло. При наличии гнойного воспаления в опухоли и окружающих ее тканях целесообразно перед исследованием снять гнойный налет с поверхности опухоли с помощью марлевого тампона, смоченного физиологическим раствором. Крайне нежелательно травмировать поверхность опухоли перед забором цитологического материала, так как при появлении кровоточивости неизбежно попадающие в мазок клетки крови значительно затрудняют микроскопический анализ цитограмм. Поэтому, если поверхность опухоли покрыта сухими корочками, не отделяющимися при легком прикосновении, допустимо на несколько часов приложить к поверхности опухоли повязку с какой-либо индифферентной мазью и только после этого произвести забор цитологического материала.

В настоящее время следует считать окончательно установленным, что пункционная биопсия первичных меланом кожи не ухудшает прогноза заболевания и может быть использована для морфологической верификации диагноза в случае отсутствия изъязвления эпидермиса над опухолью (Паплиян и др., 1972; Агамова и др., 1972; Бирбраер, Бражникова, 1990). В доступной нам литературе встретилось только одно сообщение (Титинер, Караева, 1972) 23-летней давности о прогрессировании опухолевого процесса у 3 больных меланомой кожи после пункционной биопсии опухоли. Очевидно, в данном случае имело место временное совпадение пункционной биопсии и метастазирования меланом. Таким образом, необходимость и важность использования цитологического метода исследования в диагностике первичных меланом кожи сегодня несомненны, что подтверждается работами многочисленных авторов (Селюжицкий, 1993; Dascalopoulou et al., 1993; Volkenandt et al., 1994).

В НИИ онкологии им. проф. Н. Н. Петрова диагностическая пункция опухоли с последующим забором цитологического материала используется в течение последних 30 лет. Ни у одного из наблюдаемых нами пациентов не было отмечено прогрессирования опухолевого процесса или ухудшения прогноза заболевания вследствие пункционной биопсии. Согласно методике, используемой в Институте, пункционная биопсия должна производиться в „чистой” перевязочной стерильной тонкой иглой со шприцем. Игла при этой процедуре должна быть введена в поверхностные слои опухоли на глубину 1-2 мм после чего производится 3-4-кратная аспирация клеточного материала в иглу. При этом нужно стараться избежать движения введенной в опухоль иглы в горизонтальной плоскости.

Читайте также:  Самочувствие человека при меланоме

По данным К. А. Агамовой с соавт. (1972), различают 4 типа цитограмм меланом кожи:

  1. эпителиоидноклеточный
  2. веретеноклеточный
  3. невусоподобный
  4. смешанный

В свое время придавалось большое значение точной идентификации клеточного типа меланомы, так как предпринимались попытки определить зависимость прогноза заболевания и тактику предстоящего лечения от цитологического строения первичной опухоли (Раков, Хачатурян, 1971, 1972; Липова, Хачатурян, 1975). Однако сегодня установлено, что течение заболевания лишь в незначительной степени зависит от клеточного строения меланомы. Кроме того, тип той или иной цитограммы не всегда бывает объективен, т. е. не во всех случаях отражает действительное морфологическое строение опухоли. Это объясняется, во-первых, субъективностью методики забора цитологического материала и, во-вторых, биологическими особенностями меланомы кожи. Так, по мнению В. А. Липовой и Л. М. Хачатуряна (1975), веретенообразные клетки меланом имеют более прочное сцепление друг с другом, чем клетки других типов опухоли, и в силу этого попадают в мазок в меньшем количестве. Кроме того, опухоль в различных ее участках может иметь неоднородное строение и мазок, полученный с небольшой ее поверхности, может не отражать клеточный состав меланомы в целом.

Основные и наиболее постоянные цитоморфологические особенности первичной меланомы кожи заключаются в следующем: слабые межклеточные связи и полиморфизм, вакуолизация цитоплазмы, эксцентричность ядер, двухъядерность, внутриядерные включения и неровность ядерной мембраны (Новик, 1987; Layfied, Ostrzega, 1989; Turbat-Herrera et al., 1993).

Опубликованные в литературе результаты цитологической диагностики еще раз подтверждают надежность этого метода для морфологической верификации диагноза первичной меланомы кожи. Так, по данным В. А. Липовой и Л. М. Хачатуряна (1972), точность цитодиагностики составила 70 %, по сообщению Н. П. Паплияна с соавт. (1972), достоверность была равна 85.5 %, а В. М. Бирбраер и Е. И. Бражникова (1990) приводят данные о том, что она соответствует 91.3 %. На материале этих специалистов ложноположительных заключений не наблюдалось, а частота ложноотрицательных заключений составила 8.7 %. Согласно наблюдениям И. В. Селюжицкого (1993), информативность метода достигает 90 %. Наконец, на материале Хавстрём с соавт. (Hafstrom et al., 1980) ложноотрииательные результаты цитологической диагностики первичных меланом кожи имели место только в 6 % наблюдений.

С целью определения эффективности цитологической диагностики первичной меланомы кожи сотрудником нашего Института д. м. н. В. И. Новиком был проанализирован материал цитологической лабора тории НИИ онкологии им. проф. Н. Н. Петрова за 10 лет (с 1976 по 1985 гг.) Из 287 цитологических наблюдений меланомы кожи, впоследствии верифицированных гистологически, в 24 (8.4 %) случаях цитологические мазки были очень скудные и неинформативные. Из остальных 263 случаев, в которых удалось получить информативный клеточный материал, при цитологическом исследовании злокачественная природа поражения была правильно определена в 250 (95 %) наблюдениях. У остальных 13 (5 %) из 263 больных при цитологическом исследовании ошибочно были диагностированы пролиферирующий невус (10 наблюдений), ангиофиброма (2) и фиброксантома (1 наблюдение). Частота ложноотрицательных цитологических заключений составила только 5 %. Ложноположительных результатов на нашем материале не наблюдалось.

Из всех 263 цитологических наблюдений меланома кожи была диагностирована у 243 больных (92.4 %). Таким образом, на материале НИИ онкологии чувствительность цитологического метода исследования составила 95, а его точность – 92.4 %. Основные клеточные типы меланом кожи приведены на рисунках, любезно предоставленных нам д. м. н. В. И. Новиком (рис. 43-46).

Исследователями предпринимаются попытки улучшить (оптимизировать) методику и результаты цитологической диагностики первичных меланом кожи. Моришима с соавт. (Morishima et al., 1986) сообщил о возможности быстрой диагностики меланомы с помощью контрольно-флюоресцентного метода непосредственно во время операции. Авторами разработана специальная аппаратура для флюоресцентно-микроскопической цитодиагностики меланом, основанная на контактном выявлении опухолевых клеток. Методика апробирована на 9 больных первичной меланомой кожи, 3 больных метастатической беспигментной меланомой и, в качестве контроля, – у 26 пациентов с пигментированными немеланомными опухолями кожи. Флюоресцирующие клетки выявлены у всех больных меланомой. У пациентов контрольной группы флюоресцирующие клетки были обнаружены только при пигментированной базалиоме. Авторы считают целесообразным использовать этот метод для рутинной цитодиагностики меланом кожи во время операции. Это говорит о том, что для повышения эффективности цитологического метода диагностики необходимы дальнейшие поиски.

Таким образом, цитологическое исследование является одним из наиболее эффективных методов диагностики первичных меланом кожи. Однако даже среди опытных цитоморфологов ведущих онкологических учреждений страны частота ложноотрицательных результатов составляет 5-9 %. Поэтому клиницистам следует помнить о том, что отрицательное заключение цитоморфолога о цитограмме опухоли еще не позволяет со стопроцентной вероятностью исключить диагноз меланомы кожи.

Источник