Впч с генотипированием лечение
Вирус папилломы человека считается одним из наиболее распространённых заболеваний, включающих в себя более 100 различных типов. Большинство из них малоопасны для человека и при хорошем состоянии организма могут быть нейтрализованы работой иммунной системы. Однако существуют штаммы ВПЧ, вызывающие серьезные кожные поражения и отличающиеся высоким уровнем онкогенности:
Для выявления типов вируса существует процедура генотипирования, позволяющая не только диагностировать наличие инфекции, но и дать прогноз относительно развития заболевания. Благодаря этой процедуре лечащий врач может подобрать тактику лечения, подходящую для конкретного типа.
Что это такое
Под «генотипированием» понимается не конкретная процедура, а ряд диагностических мер, нацеленных на определение типа ВПЧ, концентрации вируса в организме. Тесты могут определить сразу несколько штаммов, что характерно для подобной инфекции. В таком случае обычно говорят о более сложном течении болезни.
Обычно диагностика не ограничивается только генотипированием: лечащим врачом также проводится внешний осмотр, при необходимости сдаётся кровь, у женщин выполняется кольпоскопия и т.д. Однако именно генотипирование является основным способом определить наличие ВПЧ. Такой метод очень чувствителен к минимальным изменениям в концентрации вируса, поэтому легко позволяет выявить отклонения.
Определение типа ВПЧ
Процедура диагностики проводится в несколько этапов. После консультации врачу необходимо подтвердить наличие вируса, и только после этого проводится типирование. Перед самим тестом пациенту предстоит пройти несколько процедур:
После подтверждения присутствия ВПЧ в организме врачом может быть назначен мазок или соскоб, необходимый для теста ПЦР.
В случае если инфекция уже проявила себя в виде новообразований, дополнительные методы диагностики обычно не применяются. В зависимости от обнаруженных вирусных штаммов назначается специфическое лечение, обычно включающее в себя удаление имеющихся наростов.
Особенности типов вируса
Все типы папилломавируса делятся на несколько больших групп, исходя из степени онкогенности, т.е. риска развития злокачественных новообразований. Чем более высокая степень, тем большему риску подвергается больной с уже имеющимися доброкачественными папилломами. Выделяют следующие классификации HPV (обозначение ВПЧ в анализах):
- Высокоонкогенные. Риск развития злокачественной опухоли в пораженной области очень высок. К таким типам HPV относятся 16, 18, 31, 33, 45, 50 штаммы. Они обычно проявляются остроконечными кондиломами, образующимися в области половых органов больного.
- Среднеонкогенные. Развитие злокачественной опухоли происходит примерно в половине случаев среди всех инфицированных. В эту группу входят 26, 30, 35, 65 штаммы.
- Низкоонкогенные. Эти типы ВПЧ обычно проявляются в форме бородавок, что считается довольно безвредным, хоть и неприятным косметическим дефектом. К ним относятся 6, 11, 13, 32, 40 штаммы. Развитие раковых заболеваний с такими формами вируса практически невозможно.
Среди всех типов HPV больше всего выделяются 16 и 18 штаммы. Они представляют наибольшую опасности для женщин: в 80% случаев у больных раком шейки матки был диагностирован один из этих типов ВПЧ. Такие формы вируса считаются наиболее агрессивными, поэтому при диагностировании требуют незамедлительного лечения.
Способы диагностики
Для проведения диагностики пациент может обратиться к гинекологу, урологу, проктологу, дерматологу или даже к терапевту, если не уверен в природе появления своих наростов. Врач может дать первичное заключение, исходя из внешних признаков проявления вируса, однако для прояснения деталей назначаются разные типы исследований. К ним относятся:
- Кольпоскопия. Благодаря кольпоскопу гинеколог способен многократно увеличивать изображение, показывающее слизистую оболочку половых органов изнутри. Процедура позволяет детально рассмотреть влагалище и шейку матки, благодаря чему врач может заметить появление даже мелких новообразований. Особенности протекания ВПЧ таковы, что наросты могут образовываться даже на внутренних половых органах, поэтому исследование кольпоскопом является обязательным этапом диагностики.
- Цитология. Этот метод исследования основан на взятии мазка с пораженной оболочки места воздействия вируса. После забора мазок исследуется под микроскопом и проверяется на наличие злокачественных клеток. Результаты цитологии расшифровываются следующим образом: 1-2 группа говорит об отсутствии патологии, 3 показывает необходимость других исследований, так как диагноз под сомнением, 4-5 группа свидетельствует о наличии злокачественных изменений.
- Гистология. Для процедуры также берут частичку биоматериала с определенного участка тела, после чего данные исследуются под микроскопом. Отличие этого метода от предыдущего в том, что анализу подвергается не мазок, а небольшой кусочек нароста. Так можно более наглядно увидеть, происходят ли онкологические изменения на конкретном участке.
- ПЦР-диагностика. Один из наиболее распространенных анализов, основанный на взятии мазка из влагалища или уретры. Метод считается довольно чувствительным и позволяет выявить не только наличие вируса, но и определить конкретные штаммы. Также ПЦР тест используют для отслеживания концентрации вируса, что помогает увидеть, насколько эффективным было лечение.
- Digene test. Предназначен преимущественно для скрининговых обследований женщин, так как эффективно выявляет предраковое состояние. Материал для забора – мазок, взятый из влагалища. Также тест может использоваться в качестве дополнительного исследования, уточняющего результаты других тестов.
Каждый тест необходимо выполнять только под наблюдением специалиста. При несоблюдении правил проведения диагностики существует вероятность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата, причем последний встречается чаще.
Видео от нашего практикующего дерматовенеролога:
Особенности обследования у мужчин и женщин
Принцип действия каждого теста генотипирования одинаков и основан на заборе небольшого количества клеток с пораженного места. Различается только способ забора материала. Женщины обычно сдают на анализ соскоб, берущийся из шейки матки. Такой материал считается самым информативным, в отличие от соскоба из влагалища. Для этого врач берет небольшую щетку, щетинки которой предназначены специально для забора материала из цервикального канала.
После этого материал отправляется на изучение в лабораторию. Такая манипуляция не должна причинять женщине неудобства. Единственным противопоказанием для неё является наличие менструации.
Материал для изучения у мужчин берется из уретры. С помощью небольшого зонда врач берет соскоб эпителия, который после извлечения остается на специальном стекле. В таком виде анализ отправляется на исследование. При диагностике ВПЧ мужчинам обычно назначают тест ПЦР.
Принцип лечения
Полное излечение пациента от папилломавируса невозможно даже при грамотном, своевременно назначенном лечении. ВПЧ всегда будет присутствовать в организме в скрытой форме и сможет проявить себя в виде рецидива на фоне сильного стресса или ослабленного иммунитета. Поэтому принципы терапии основаны не на полном излечении инфекции, а на минимизировании последствий инфицирования. В рамках терапии для этого используется:
- удаление всех новообразований (конкретный способ пациенты должны обговаривать с лечащим врачом, так как разные типы наростов требуют разных подходов);
- применение иммуностимулирующих средств;
- назначение противовирусных препаратов.
В совокупности все эти методы помогают держать под контролем концентрацию вируса в организме, а регулярное генотипирование отслеживает вирусную нагрузку.
Лечение важно проводить исключительно под контролем врача, так как необходимо смотреть на реакцию организма, которому могут не подойти назначаемые лекарства. Домашнее самолечение в виде прижигания папиллом, использование чистотела и т.д. может оказаться очень опасным. Больной может не знать, что его новообразование переродилось в злокачественное, а самостоятельная попытка удалить раковые клетки может привести к летальному исходу.
Цена на анализы
Стоимость процедур зависит от места проживания и может существенно разниться от региона к региону. Усредненные цены на диагностику вируса выглядят следующим образом:
- количественный ПЦР тест с определением 12 генотипов вируса – 600-800 рублей;
- идентификация отдельно взятых штаммов ВПЧ – 250-350 рублей;
- кольпоскопия – 900-1400 рублей;
- цитология – 700-1200 рублей;
- Digene-тест на определение высокоонкогенных штаммов вируса – 5000-6000 рублей;
- гистологическое исследование – 2000-3000 рублей.
Подбирать способ диагностики больному следует совместно с лечащим врачом, так как каждая ситуация требует индивидуального рассмотрения. Кроме того, необходимо через некоторое время повторно провести диагностику для анализа качества проведенного лечения.
Источник
ВПЧ – группа распространенных и генетически разнообразных вирусов, инфицирующих и поражающих эпителий кожных покровов (кожные типы ВПЧ) и слизистых оболочек ротовой полости и аногенитальной области (генитальные типы ВПЧ). Генитальные типы ВПЧ передаются преимущественно половым путем и через родовые пути от матери ребенку. Основными клиническими формами папилломавирусной инфекции гениталий являются остроконечные кондиломы, а также злокачественные формы изменения эпителиальных клеток, приводящие к раку шейки матки.
Исход инфекции зависит от типа вируса. Типы ВПЧ низкого канцерогенного риска (НКР, низкоонкогенные) связаны с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени. Типы ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР, высокоонкогенные) – 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 – наряду с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени, также индуцируют злокачественную трансформацию эпителия, приводящую к инвазивному раку.
Дифференциальная диагностика. Поражения шейки матки, влагалища, вульвы, пениса, заднего прохода непапилломавирусной этиологии; в случае остроконечных кондилом – с проявлениями, связанными с вирусом простого герпеса, а также с истинными папилломами.
Лабораторная диагностика папилломавирусной инфекции включает выявление и количественное определение ДНК ВПЧ ВКР, генотипирование ВПЧ ВКР, выявление ДНК ВПЧ НКР.
Материал для исследования
- Соскобы эпителия цервикального канала, влагалища, вульвы, заднего прохода – для выявления, количественного определения и генотипирования ВПЧ;
- мазки из ротовой полости и гортани – выявления ВПЧ НКР у детей.
Выявление и определение концентрации вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска
Показания к обследованию
- Определение группы риска по развитию рака шейки матки и рака заднего прохода;
- скрининговые программы с цитологическим исследованием одновременно или на первом этапе скрининга (до цитологического исследования) для женщин старше 30 лет;
- разрешение неопределенных и сомнительных результатов цитологических исследований (наличие ASCUS – атипичные плоские клетки неясного значения);
- контроль эффективности терапии тяжелой дисплазии (CIN2+) через 6 месяцев после удаления пораженного эпителия;
- проведение дифференциальной диагностики с заболеваниями непапилломарусной этиологии.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления ДНК ВПЧ ВКР используют МАНК (ПЦР, NASBA, TMA и др.) и методы амплификации сигнала (гибридный захват). Культивировать вирус не удается.
Гибридный захват является первым и наиболее охарактеризованным методом выявления ДНК ВПЧ. Применение метода позволяет определять концентрацию вируса в условных единицах оптической плотности, линейный диапазон небольшой (3–4 порядка). Образцы, в которых присутствует вирус в концентрации ниже порога клинической значимости, учитываются как отрицательные. Граница клинической значимости определяется путем тестирования эталонного образца (концентрация ДНК ВПЧ 1 пг/мл). Все сигналы, значения которых ниже эталонного, считаются отрицательными. Более современными, быстрыми и удобными для использования являются методы на основе АНК. МАНК, работающие в неколичественном формате, выявляют либо ДНК вируса (ПЦР, HDA и др.), либо мРНК транскрипты онкогенов E6 и E7 ВПЧ (NASBA, TMA). Для выявления только клинически значимых концентраций (по разным методикам учета – более 1 пг/мл или 1000 копий ДНК вируса на 100000 клеток человека) используют методики с чувствительностью, при которой образцы с низкой концентрацией учитываются как отрицательные. Наиболее целесообразно использовать ПЦР в реальном времени, которая позволяет точно определить концентрацию ДНК вируса. На основе полученных данных проводится не только оценка концентрации вируса, но, что важно, проводится градация результата по клинической значимости полученной концентрации на:
- положительный – выше порога клинической значимости;
- положительный – малозначимый (ниже порога значимости);
- отрицательный.
Различные наборы реагентов могут отличаться спектром выявляемых генотипов. К группе ВПЧ ВКР относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 генотипы. Наиболее канцерогенными считаются 16 и 18 типы, наименее – 51, 56, 68. Для РФ и стран СНГ клинический смысл исследования сохраняется только при определении как минимум 10 генотипов из перечисленных выше. Выявление в смеси генотипов низкого или неустановленного риска существенно снижает специфичность выделения группы риска онкологической патологии и не может быть оправдано.
Показания к применению различных лабораторных исследований. Для проведения скринингового обследования на наличие предрака и рака шейки матки предпочтительным является использование мазков/соскобов эпителия цервикального канала и зоны трансформации, выполненных цервикальными цитологическими щеточками. Допускается использование для этих целей мазков из влагалища. Для скрининга рака шейки матки все тесты, вне зависимости от выбранной технологии, должны иметь сбалансированные аналитические и диагностические характеристики, удовлетворяющие следующим условиям – не менее 98% чувствительность по отношению к CIN2+ и не менее 90% специфичность относительно широко валидированного в скрининге теста (например, Hybrid Capture II). Для достижения оптимума аналитической чувствительности избирают подход отсечения образцов с концентрацией ДНК ВПЧ ниже порога клинической значимости. Для этого либо проводят искусственное снижение аналитической чувствительности, либо выбирают в качестве референтного контрольный образец с требуемой пороговой концентрацией. Предпочтительным является измерение концентрации ДНК ВПЧ методом ПЦР в реальном времени.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение ДНК ВПЧ в любой концентрации свидетельствует о наличии возбудителя, однако при интерпретации результатов тестирования следует учитывать, что более 80% инфицированных спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Опасность представляет персистентная форма инфекции (сохраняющаяся более 12–24 мес.). Однократный положительный результат надежно указывает на принадлежность к группе риска развития рака шейки матки в случае, если исследование проводится в группе женщин старше 30 лет или вступивших в половую жизнь более 6–7 лет назад. Особая настороженность должна быть проявлена в отношении пациенток, у которых подтверждается персистенция вируса при повторном тестировании через 1 год. При скрининге с использованием количественных тестов принимают во внимание только клинически значимый результат. Для дифференциальной диагностики и наблюдения пациентов после проведения лечения дополнительная ценность одиночного количественного определения не показана. Перспективным в прогнозе риска рецидива CIN2+ является оценка динамики вирусной нагрузки после лечения (снижение или увеличение концентрации вируса).
Генотипирование вирусов папилломы человека. Цель генотипирования ВПЧ – отличие персистирующей инфекции от случая повторного инфицирования (сохранение генотипа в повторных тестах); уточнение тактики ведения больных в зависимости от онкогенности выявленных типов вируса.
Показания к обследованию. Пациенты с выявленной папилломавирусной инфекцией ВКР
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для генотипирования ВПЧ используют МАНК. Распространение получили методики с детекцией продуктов амплификации методом электрофореза (генотипирование по величине амплифицируемого фрагмента), гибридизации на плашках и стрип-полосках, ПЦР в реальном времени.
Классические методики, использующие принцип гибридизации со специфическими зондами позволяют определять наиболее широкий спектр генотипов (20–40). Однако использование для амплификации универсальных праймеров приводит к существенным различиям в аналитической чувствительности выявления различных генотипов ВПЧ, приводя к заметным искажениям результатов. Кроме того, широкий спектр определяемых генотипов необходим только для научных исследований. В клинической практике достаточным может считаться генотипирование ВПЧ ВКР (10–13 типов). Методики, основанные на применении типоспецифических олигонуклеотидов, позволяют проводить типирование спектра клинически значимых генотипов и в заметной степени лишены проблемы различий аналитической чувствительности по отношению к разным генотипам ВПЧ. Предпочтение должно отдаваться мультиплекс-методикам с использованием ПЦР в реальном времени как наиболее быстрым, контаминационно безопасным, предполагающим возможность автоматизации. Может проводиться сокращенное генотипирование с выявлением только наиболее онкогенных типов ВПЧ 16 и 18.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для установления персистенции вируса применяют подход повторного генотипирования через 12 месяцев. Персистенция подтверждается при сохранении генотипа/ генотипов при повторном исследовании, полная смена спектра генотипов указывает на излечение и повторное инфицирование альтернативными ВПЧ. Выявление наиболее онкогенных типов ВПЧ (16 и 18) может указывать на потребность в более агрессивной тактике ведения больных (более частые повторные визиты, более тщательное обследование для выявления предраковых изменений и др.).
Выявление вирусов папилломы человека низкого канцерогенного риска
Показания к обследованию
- Определение группы риска развития папилломатоза гортани у ребенка (беременные и новорожденные);
- дифференциальная диагностика с заболеваниями непапилломавирусной этиологии.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления ДНК ВПЧ НКР используют МАНК (ПЦР, NASBA, TMA и др.) и методы амплификации сигнала (гибридный захват). Предпочтение должно отдаваться быстрым и контаминационно-безопасным методикам, таким как ПЦР в реальном времени.
Клинически оправданным является определение двух генотипов 6 и 11 (более 90% случаев папилломатоза гортани у детей). Некоторую дополнительную ценность имеет выявление 42, 43 и 44 генотипов. Количественное определение не оправдано.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Выявление 6 и/или 11 генотипов указывает на возможный риск развития папилломатоза гортани у ребенка (риск повышается, если вирус обнаружен в гортани). При планировании беременности может быть рекомендована выжидательная тактика. При сопутствующем наличии остроконечных кондилом – их лечение методом химической и/или физической деструкции. При наличии беременности ее прерывание или родоразрешение методом кесарева сечения не оправданы, так как риск развития папилломатоза гортани ниже риска возможных осложнений указанных операций.
Источник
