Впч на пцр подготовка

впч на пцр подготовка

Автор статьи

Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.

Общие сведения

анализ пцр на впч Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.

Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:

наличие ВПЧ;
штаммы, которыми инфицирован больной;
количественное содержание вируса в организме.

Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.

Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака. штаммы вируса папилломы человека

Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.

Показания для анализа

Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. папилломы у мужчин и женщин ВПЧ распространяется следующими путями:

при незащищенных половых контактах;
при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
во время тесного контакта с кожей больного.

Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу. фото: впч высокого онкогенного риска у женщин

Преимущества метода

ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:

Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.

Недостатки метода

Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.

Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.

Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:

собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
реагенты были непригодными.

Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.

Как сдавать анализ

Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.

Как сдают анализ мужчины

взятие мазка у мужчин Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.

Как сдают анализ женщины

взятие мазка у женщины

Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.

Забор биоматериала

Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.

Расшифровка анализа ПЦР

фото: данные пцр исследования

В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.

Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:

Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.

В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.

Источник

Анализ, для которого берется мазок на ВПЧ, проводится и мужчинам, и женщинам. Он необходим для исследования взятого у пациента биологического материала с целью определения вирусного заболевания. С его помощью выявляется патоген, его тип и степень онкогенного риска. На основе этих данных врач может прогнозировать дальнейшее течение заболевания. Также информация, полученная благодаря изучению мазка, помогает определиться со схемой лечения.

Показания к проведению исследования

На текущий момент вирус папилломы человека относится к числу наиболее распространенных инфекционных заболеваний. ДНК патогена пагубно влияет на эпителиальные клетки и слизистые оболочки, из-за чего на них спустя некоторое время после заражения начинают образовываться наросты. Обычно они не представляют угрозу для жизни. Но иногда папилломы перерождаются в раковые опухоли. Если их не лечить, то это может привести к летальному исходу.

Чтобы правильно диагностировать заболевание, требуется проведение специальных исследований в лабораторных условиях. К ним относится мазок на вирус папилломы. Анализ проводят при наличии следующих показаний:

Жалобы мужчины или женщины на появление характерных для вирусной инфекции новообразований на поверхности тела и лица. Это могут быть не только папилломы, но также бородавки и кондиломы остроконечного типа;
Нарушенное мочеиспускание;
Ощущение сильного жжения и зуда в области расположения половых органов;
Обнаружение предракового состояния;
Появление сильных воспалительных процессов в интимной зоне;
Урогенитальные инфекции, которые передаются во время полового акта;
Появление наростов в гортани и ротовой полости;
Жалобы на боли в суставах и мышцах.

Это не единственные показания, при которых проводятся подобные исследования на ВПЧ. Анализ также не помешает пройти в таких случаях:

Необходимость обследования состояния здоровья в профилактических целях. Медики рекомендуют сдавать мазок всем людям, особенно женщинам после 30 лет;
Наличие незащищенных половых актов с малознакомыми партнерами через время после проведения последнего исследования;
Во время планирования беременности. Анализ нужно сдавать и будущей матери, и будущему отцу. Нужно помнить о том, что результаты исследования обоих партнеров могут сильно отличаться ввиду разных особенностей иммунной системы;
Если в ходе гинекологического осмотра в половых органах были найдены новообразования, которые могут указывать на папилломавирус.

Читайте также: Впч 6 11 тип

Обычно подобные исследования проводятся в клиниках частного типа и в медицинских лабораториях, предоставляющих платные услуги.

Даже относительно безобидные типы ВПЧ нельзя оставлять без внимания

Как подготовиться

Каждый пациент, который намерен сделать мазок, чтобы провериться на вирус папилломы человека, должен правильно подготовиться к процедуре. Это важный момент, от которого зависит достоверность полученных результатов диагностики. Подготовка требует выполнения нескольких простых правил, которые не должны стать проблемой для мужчины или женщины.

Чтобы мужчине быть готовым к забору биологического материала, достаточно просто воздерживаться в течение 2 часов от мочеиспускания. Для этого желательно в день взятия мазка до момента окончания процедуры ограничивать себя в потреблении больших объемов жидкости.

Подготовка женщины к анализу является более сложной. Ей следует выполнить такие требования:

Отказаться от приема антибиотиков за месяц до даты проведения анализа;
Нельзя подмываться в течение суток перед процедурой;
Необходимо выбрать дату забора материала до начала менструации. Также допускается вариант сдачи анализа не раньше 3 дня после ее завершения;
Отказаться от половых контактов на 3 дня до процедуры;
Нельзя использовать противозачаточные препараты и вагинальные свечи.

Женщинам стоит более ответственно подходить к вопросам подготовки к сдаче мазка, чтобы анализ точно дал понять, насколько опасен для их жизни обнаруженный в организме патоген.

Врач расскажет, как подготовиться к сдаче мазка, чтобы не исказить результат

Особенности проведения

Лабораторное исследование имеет ряд особенностей, которые характерны непосредственно для него. Взятие мазка проводят людям при помощи специального шпателя. Анализ на ВПЧ у женщин или же пациентов мужского пола требует перенесения взятого биологического материала на стерильное стекло. После этого образец отправляется в лабораторию для дальнейшего изучения. Там специалисты будут заниматься выявлением патогена на клеточном уровне путем высушивания и окрашивания материала.

Чтобы диагностировать заболевание у женщины, необходимо взять мазок сразу в нескольких зонах. Обычно требуется соскоб со слизистой оболочки шейки матки и ее канала. Также во внимание берется образец, взятый с внешней поверхности органа.

У мужчины мазок делается только из мочеиспускательного канала. Он даст достаточно информации о текущем состоянии пациента.

У мужчин

Если мужчина мог заразиться инфекцией, которую называют папилломавирус, то ему стоит согласиться на проведения мазка на ВПЧ. При подозрениях на заражение патогеном потребуется прохождение нескольких диагностических процедур:

Анализ на биопсию;
ПЦР;
Осмотр кожи на теле и лице.

Если диагностировать болезнь до того момента, пока на коже начнут проявляться папилломы, то можно избежать большинства осложнений, к которым приводит патология. Цитологический анализ является наиболее информативным методом исследования. Он дает исчерпывающие сведения об активации вирусного патогена, даже если на теле отсутствуют его видимые симптомы в виде высыпаний.

Цитологический мониторинг с точностью в 55%-85% дает информацию о присутствии в организме папилломавируса. Для получения столь точного результата рекомендуется регулярно сдавать мазок на анализ. Достаточно 2 посещений лаборатории в год.

У женщин

Женщины проходят анализ в кабинете гинеколога. Им следует удобно расположиться на кресле, и при этом предоставить специалисту максимальный обзор на половые органы. Инструмент перед процедурой вводится во влагалище. Шейка матки должна быть хорошо расширена, чтобы гинеколог мог полноценно изучить ее поверхность.

Забор биологического материала проводится в переходной зоне, в которой эпителий плоского типа превращается в железистый. Именно в этом месте вирус обычно себя проявляет. Дополнительно делается мазок в области наружного зева и шейки матки. Перед этим специалист при помощи тампона убирает лишнюю слизь, которая может мешать забору.

Мазок берется в нескольких местах

Забор тканей у беременных

Медики рекомендуют женщинам сдать мазок на проверку ВПЧ на этапе планирования беременности. Если вирус будет обнаружен, им предложат пройти лечение. Лишь после этого можно спокойно приступать к зачатию, не опасаясь за здоровье будущего малыша. Если же женщина уже забеременела, ей следует немедленно сдать анализ на ВПЧ.

Мазок у беременных берут на любом сроке. В этом нет особых ограничений. Забор проводят на гинекологическом кресле или кушетке. Сдают образец биоматериала 2 раза за весь период вынашивания ребенка. Первый обычно назначается при постановке на учет. Второй требуется примерно на 28 неделе беременности. В последнее время врачи стали настаивать на повторной сдаче анализа на 36 неделе.

Взятие образца с поверхности шейки матки не опасно для малыша. Так что будущие мамы могут спокойно соглашаться на такую процедуру. При своевременном обнаружении вируса женщине удастся успешно пройти лечения, и тем самым обезопасить от возможного заражения своего ребенка в момент его прохождения через родовые пути.

Виды исследований мазка

Исследование мазка на ВПЧ у мужчин или женщин проводят при помощи разных анализов. Это необходимо для получения максимально полной картины, которая дает понять, как именно протекает болезнь и какими особенностями она обладает.

Полимеразная реакция

Необходимость анализа полимеразно-цепной реакции (ПЦП) на ВПЧ возникает с целью изучения наличия возбудителя инфекционного заболевания в ДНК. Материал для исследования у мужчины берут из мочеиспускательного канала. У женщин мазок требуется из зоны цервикального канала и шейки матки. Иногда допускается вероятность взятия в качестве образца спермы или первичной мочи. Для этого потребуется распределение жидкости в 3 стакана. Для исследования подходит первый из них.

Digene тест

Исследование предназначено для изучения мазка на предмет канцерогенного ВПЧ высокого онкогенного риска. Это молекулярная технология, которая может выявлять специфические молекулы в структуре ДНК. Благодаря тесту проводится анализ 2 групп вирусной инфекции:

С низкими онкомаркерами;
С высокими онкомаркерами.

Тест такого вида предназначен для проведения исключительно в лабораторных условиях. Он отличается высоким уровнем точности. К тому же применение анализа является легким. Исследование считается более правдоподобным, чем цитологический анализ. Поэтому его рекомендуют использовать при наличии неопределенных расшифровок Пап-тестирования.

Дополнительные тесты

Иногда лабораторных анализов бывает недостаточно. В таких ситуациях врачи назначают пациентам прохождение кольпоскопии. Это исследование проводят только женщинам, так как оно имеет гинекологическую направленность. С его помощью определяется наличие во влагалище злокачественных структур. Потребность в подобном анализе возникает при выявлении специфических симптомов, которые могут указывать на развитие рака в области половых органов. К ним относятся нестандартные выделения из влагалища, необоснованные кровотечения и боли в интимной зоне. При таких признаках требуется срочная медицинская помощь.

Мазок может использоваться для нескольких типов анализа

Получение и расшифровка результатов

Сдав мазок на дальнейшее изучение в лабораторных условиях, многим пациентам не терпится узнать результаты анализа. Они могут быть:

Нормальными;
Ненормальными;
Положительными;
Отрицательными.

Нормальные и отрицательные показатели указывают на то, что в половых органах не произошло никаких патологических изменений. В этой зоне все находится в пределах нормы.

Положительный и ненормальный показатель предупреждает о наличии клеток с аномалиями. Однако он не всегда является подтверждением протекания злокачественного процесса. Аномальные и раковые клетки отличаются друг от друга. Для получения большего количества информации потребуется дополнительное обследование.

Многие пациенты получают положительный результат после сдачи мазка на анализ из-за развития в организме различных инфекций. Виновниками могут быть трихомониаз, хламидиоз и гонорея. Если их вылечить, то после повторной сдачи биоматериала будет получен отрицательный показатель.

Папилломавирус также объясняет получение положительного результата анализа. В этом случае в интимной зоне у мужчины или женщины будут обнаружены характерные для болезни высыпания.

Наибольшее внимание уделяется расшифровке полученных в ходе исследования результатов. С этой задачей может справиться только квалифицированный специалист. Оценивание обычно имеет несколько степеней:

Отсутствие в клетках аномалии, которое указывает на нормальное состояние здоровья пациента;
Незначительное видоизменение в клетках, которое обусловлено развитием инфекции. В данном случае потребуется еще одно исследование;
Появление аномальных изменений в область ядра клеток в небольшом количестве. Тоже требуется повторное изучение биоматериала для определения папилломавируса или другой причины нарушения;
Выявление злокачественных клеток. Рак еще не может быть подтвержден. Врачи лишь предполагают его наличие;
Появление раковых клеток в большом количестве.

В зависимости от того, что покажет результат анализа мазка на ВПЧ, будут определены дальнейшие действия пациента. Более подробную информацию о расшифровке показателя может найти в таблице, представленной ниже.

Обозначение	Расшифровка
NILM	Говорит о нормальном состоянии эпителиальных клеток.
ASCUS	Предупреждает о наличии измененных клеток, которые могут говорить об инфекционном поражении половой системы и развитии дисплазии. Требуется повторное проведение анализа через 1 год.
ASC-H	Выявлены патологические нарушения в структуре клеточного эпителия, которые могут появиться на ранней стадии развития злокачественного процесса. Рак подтверждается у 1% женщин с таким результатом.
LSIL	Указывает на наличие незначительного количества атипичных эпителиальных клеток. Они предупреждают о развитии дисплазии или папилломавирусной инфекции. При подтверждении догадок врача дается направление на кольпоскопию.
HSIL	Предупреждает о значительных нарушениях в структуре эпителия, которые могут указывать на онкологический процесс. При отсутствии адекватного лечения рак развивается у 7% пациентов. Для подтверждения диагноза требуются дополнительные исследования при помощи эксцизии и кольпоскопии.
AGC	Говорит об атипичном железистом эпителии. Такой результат предупреждает об онкологии или дисплазии. Для получения более подробной информации назначаются кольпоскопия, ВПЧ-тест и забор биоматериала из цервикального канала.
AIS	В большинстве случаев указывает на начальную стадию развития онкологического заболевания.
High-grade SIL	Указывает на развитие плоскоклеточной онкологии.

Необходимо понимать, что полученный в ходе тестирования результат может оказаться ложным. Вот почему врачи дополнительно назначают повторную диагностику для подтверждения диагноза. Также пациентам нередко приходится проходить полноценное обследование в условиях клиники.

Сколько готовится анализ

Сложно однозначно сказать, сколько точно по времени будет готовиться анализ на ВПЧ. Все зависит от вида исследования и места сдачи биоматериала. Обычно результаты мазка или ПЦР получают через 2 суток. Показатель изученного Digene теста предоставляют примерно через 7 дней. Но иногда сроки затягиваются до 2 недель.

На скорость получения результатов анализа мазка влияет цена процедуры. В дорогостоящих клиниках их получают значительно быстрее. Но нужно понимать, что высокая стоимость и быстрая отдача результата не является гарантией его достоверности. Поэтому пациент сам в праве решать, соглашаться ли ему на услуги такой клиники или же доверить исследование более бюджетному учреждению, который предоставляет готовые показатели теста в течение от нескольких дней до пары недель.