Впч метод реал тайм
Диагностическое направление
Онкоскрининги
Общая характеристика
Метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) Real-Time позволяет осуществлять количественную оценку содержания ДНК в исследуемом материале, что является наиболее актуальным для микроорганизмов, которые в норме могут присутствовать в небольших количествах и в некоторых случаях, их обнаружение, без количественной оценки, может не иметь диагностического значения.
Точное определение их количества в некоторых случаях позволяет избежать неверной постановки диагноза и неоправданного лечения.
Диагностика ВПЧ основывается на клинических проявлениях, но следует помнить, что появление кондилом вызывают типы низкого онкогенного риска и существуют типы высокого онкогенного риска (ВПЧ 16, 18, 31 и 45), которые увеличивают риск предраковых заболеваний и рака половых органов (рак шейки матки).
Количественная ПЦР определяет количество вируса на момент обследования и помогает врачу выбрать правильную тактику ведения пациентки.
Высокая вирусная нагрузка рассматривается как один из факторов, снижающих спонтанную элиминацию вируса и увеличивающих риск развития неоплазии, поэтому широкое распространение получили количественные тесты по определению клинически значимых типов ВПЧ.
Показания для назначения
1. В комплексе с цитологическим исследованием (PAP-тест) в целях диагностики предраковых и раковых изменений шейки матки.
2. Скрининговые обследования женщин старше 30 лет (при отрицательном результате повторяют с интервалом в 3 года).
3. Контроль эффективности проведенной терапии.
Маркер
Маркер наличия возбудителя ВПЧ в в исследуемом биоматериале.
Клиническая значимость
Скрининговый тест для диагностики предраковых состояний и рака шейки матки.
Состав показателей:
Группа ВПЧ А5/А6 (51,56)
Диапазон измерений:
5*103
Единица измерения:
lg геномных эквивалентов/образец
Группа ВПЧ А7 (18,39,45,59)
Диапазон измерений:
5*103
Единица измерения:
lg геномных эквивалентов/образец
Группа ВПЧ А9 (16,31,33,35,52,58)
Диапазон измерений:
5*103
Единица измерения:
lg геномных эквивалентов/образец
Контроль забора материала
Диапазон измерений:
1000
Единица измерения:
Клеток
Выполнение возможно на биоматериалах:
Биологический материал
Условия доставки
Контейнер
Объем
Соскоб из ЦК, шейки матки, зоны поражения
Условия доставки:
48 Час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия
Контейнер:
Эппендорф с транспортной средой
Ворсинки хориона (биоптат плаценты)
Условия доставки:
Не хранится
Контейнер:
Стерильный контейнер с крышкой
Правила подготовки пациента
Забор биоматериала только у женщин
Стандартные условия: В течение рабочего дня МЛ “ДІЛА”.
Важно:
• На протяжении 2-х суток перед забором материала не применять препаратов местного значения (свечи, спринцевания и др.), воздержаться от половых контактов
• Сдавать до лечения или не раньше, чем через 21 день после окончания курса антибактериальной, антимикотической терапии (если другое не определено лечащим врачом).
Возможно: Возможны отклонения от стандартных условий по согласованию с врачом.
Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице
Интерференция:
- Не обнаружена.
- Не обнаружена.
Интерпретация:
- Положительно: присутствие вируса папилломы соответствующей группы генотипов в образцах эпителия. Требуется консультация специалиста для решения вопроса о дальнейшем обследовании или лечении.
- Отрицательно: ДНК вируса папилломы, связанного с риском развития рака шейки матки, не выявлено.
Источник
Молекулярно-генетическое исследование, в ходе которого выявляется ДНК вируса папилломы человека и количественно определяется вирусная нагрузка в материале.
Определяется количество только ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы) – без указания типа.
Синонимы русские
Вирус папилломы человека (ВПЧ), папиллома-вирус человека.
Синонимы английские
Human Papillomavirus, DNA, Quantitative; HPV, Viral Load.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), ректальный мазок.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Женщинам рекомендуется сдавать урогенитальный мазок или мочу до менструации или через 2 дня после её окончания.
- Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до сдачи урогенитального мазка или мочи.
Общая информация об исследовании
Вирус папилломы человека – ДНК-содержащий вирус из семейства паповавирусов, ассоциированный с развитием кондилом, бородавок, предраковых изменений аногенитальной области, рака шейки матки. Существует более 100 типов ВПЧ, более 30 из них могут инфицировать половые пути, и около 14 генотипов связаны с развитием рака шейки матки, прямой кишки, полового члена и новообразований некоторых других локализаций (например, орофарингеальной карциномы).
Онкогенные папиллома-вирусы имеют в составе ДНК белки Е6/Е7, которые способны подавлять процессы апоптоза (запрограммированной гибели) в клетках с измененным генетическим материалом. Генотипы 1, 2, 3, 5 считаются неонкогенными, а генотипы 6, 11, 42, 43, 44 относятся к папиллома-вирусам низкого онкогенного риска. К ВПЧ высокого онкогенного риска относятся генотипы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68.
Основной путь распространения инфекции – половой, включая орально-генитальные и анальные контакты, также возможна вертикальная (от матери ребенку) и контактно-бытовая передача инфекции. В организм человека может попасть несколько типов ВПЧ одновременно. Заражение обычно происходит после начала половой жизни в возрасте 16-25 лет. При инфицировании онкогенными генотипами вируса между 25 и 35 годами вероятны интраэпителиальные поражения и, как следствие, через несколько лет рак. В 70 % случаев в течение первого года и в 90 % случаев через 2 года после инфицирования возможно самоизлечение.
Рак шейки матки (РШМ) по распространенности занимает 3-е место среди всех злокачественных опухолей у женщин (после рака молочной железы и рака толстой кишки). Частота инвазивного рака шейки матки в мире составляет 15-25 на 100 000 женщин. Новообразования шейки матки возникают в основном у женщин среднего возраста (35-55 лет), редко диагностируются у женщин моложе 20 лет и в 20 % случаев выявляются в возрасте старше 65 лет. 5-летняя выживаемость при локализованном (местном, in situ) раке шейки матки равна 88 %, в то время как выживаемость при распространенном раке не превышает 13 %. Кроме инфицирования онкогенными генотипами ВПЧ, риск развития рака шейки матки повышают курение, хламидийная или герпетическая инфекция, хронические воспалительные гинекологические заболевания, длительное применение противозачаточных препаратов, множественные роды, случаи рака шейки матки в семье, раннее начало половой жизни, частая смена половых партнеров, недостаточное поступление с пищей витаминов А и С, иммунодефициты и ВИЧ-инфекция. Несмотря на то что вирус папилломы человека не всегда приводит к новообразованиям, более 93 % случаев рака шейки матки ассоциированы с ним.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с высокой чувствительностью и специфичностью выявляет ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) в более чем 90 % случаев рака и 75-85 % интраэпителиальной неоплазии с выраженной дисплазией. По данным исследований, количественное содержание вируса в материале коррелирует со степенью неоплазии: чем выше вирусная нагрузка, тем выраженнее цитологические изменения в эпителии. При обследовании необходимо учитывать генотип вируса, наличие и степень цитологических и гистологических изменений в тканях, увеличение или снижение вирусной нагрузки через несколько месяцев (6 месяцев и более) после предыдущего обследования.
Для чего используется исследование?
- Чтобы оценить риск развития новообразований, ассоциированных с ВПЧ (рак шейки матки, рак прямой кишки, рак аногенитальной области и других локализаций).
- Для контроля за эффективностью лечения предраковых заболеваний, ассоциированных с ВПЧ.
- Для мониторинга папиллома-вирусной инфекции и прогнозирования её течения.
Когда назначается исследование?
- При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, в мазке по Папаниколау, в гистологическом препарате.
- При кондиломах и других морфологических изменениях половых путей.
- При скрининге рака шейки матки у женщин старше 25-30 лет (в качестве дополнительного исследования).
- При наблюдении за инфицированными ВПЧ.
- При лечении рака и предраковых состояний, ассоциированных с ВПЧ.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Уровень вирусной нагрузки интерпретируется с учетом результатов цитологического исследования мазков, гистологических изменений в биоптате и генотипа вируса, изменении его количества с течением времени.
- Количество ДНК ВПЧ не определяется при отсутствии вируса в исследуемом образце или его минимальном количестве (ниже детектируемого уровня) – риск развития патологического процесса, связанного с ВПЧ, минимальный.
- Клинически малозначимая концентрация вируса (менее 103 копий ДНК ВПЧ на 105 клеток) – минимальный риск развития дисплазии, транзиторное течение вирусного процесса.
- Клинически значимая концентрация вируса (более 103 копий ДНК ВПЧ на 105 клеток) – хроническая инфекция с высоким риском развития дисплазии и РШМ.
- Более 105 копий ДНК ВПЧ на 105 клеток при установленном факте персистентного течения инфекции (ВПЧ выявляется более 1 года) – усиленная вирусная нагрузка, ассоциированная с повышенным риском тяжелой дисплазии, часто встречается при РШМ.
- Снижение вирусной нагрузки в 10 раз за 6 месяцев – транзиторная инфекция.
- Рост вирусной нагрузки через 6 и более месяцев после лечения указывает на возможность рецидива.
Что может влиять на результат?
Недостоверный результат может быть получен при:
- неправильном взятии и хранении материала;
- загрязнении исследуемого материала.
Важные замечания
- Инфицирование ВПЧ не всегда приводит к раку шейки матки.
- Возможно одновременное заражение несколькими генотипами ВПЧ.
- Результат анализа должен интерпретироваться с учетом заключений цитологического и гистологического исследований.
Также рекомендуется
- Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus 6/11 (HPV 6/11), ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК без определения типа [ПЦР]
- Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала – окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
- Антиген плоскоклеточной карциномы (SCCA)
Кто назначает исследование?
Гинеколог, онколог.
Литература
- Arbyn M. et al. (2010). «European Guidelines for Quality Assurance in Cervical Cancer Screening. Second Edition–Summary Document». Annals of Oncology 21 (3): 448–458.
- Hsiu-Ting Tsai, Ching-Hu Wu, Hsiao-Ling Lai, et al. Association between Quantitative High-Risk Human Papillomavirus DNA Load and Cervical Intraepithelial Neoplasm Risk Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2005;14:2544-2549.
- Saslow D, Solomon D, Lawson HW, et al. American Cancer Society, American Society for Colposcopy and Cervical Pathology, and American Society for Clinical Pathology Screening Guidelines for the Prevention and Early Detection of Cervical Cancer. Am J Clin Pathol. 2012;137:516-542.
- «Genital HPV Infection – CDC Fact Sheet». Centers for Disease Control and Prevention (CDC). April 10, 2008. Retrieved 13 November 2009.
- Материалы и рекомендации Противоракового Общества России. Режим доступа: /%d0%b0%d1%83%d1%82%d0%be%d1%81%d0%be%d0%bc%d1%8b
Источник
Общая характеристика
Метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) Real-Time позволяет осуществлять количественную оценку содержания ДНК в исследуемом материале, что является наиболее актуальным для микроорганизмов, которые в норме могут присутствовать в небольших количествах и в некоторых случаях, их обнаружение, без количественной оценки, может не иметь диагностического значения. Точное определение их количества в некоторых случаях позволяет избежать неверной постановки диагноза и неоправданного лечения.Диагностика ВПЧ основывается на клинических проявлениях, но следует помнить, что появление кондилом вызывают типы низкого онкогенного риска и существуют типы высокого онкогенного риска (ВПЧ 16, 18, 31 и 45), которые увеличивают риск предраковых заболеваний и рака половых органов (рак шейки матки).Количественная ПЦР определяет количество вируса на момент обследования и помогает врачу выбрать правильную тактику ведения пациентки. Высокая вирусная нагрузка рассматривается как один из факторов, снижающих спонтанную элиминацию вируса и увеличивающих риск развития неоплазии, поэтому широкое распространение получили количественные тесты по определению клинически значимых типов ВПЧ.
Тип биоматериала и способы взятия:
| Тип БМ | ||||
|---|---|---|---|---|
| Урогенитальный мазок (женский) | ||||
| Биоптат плаценты (хорион) |
Правила подготовки пациента
Забор биоматериала только у женщин Стандартные условия: В течение рабочего дня МЛ “ДІЛА”. Важно: • На протяжении 2-х суток перед забором материала не применять препаратов местного значения (свечи, спринцевания и др.), воздержаться от половых контактов • Сдавать до лечения или не раньше, чем через 21 день после окончания курса антибактериальной, антимикотической терапии (если другое не определено лечащим врачом).Возможно: Возможны отклонения от стандартных условий по согласованию с врачом.
В лабораторном справочнике можно ознакомиться с подробным описанием исследования
Цена и сроки исследования:
ВПЧ – количественным методом Real Time ПЦР
Цена (грн.)
425
Срок
4 дн.
Источник
Информация об исследовании
ВЫСОКИЙ РИСК РАЗВИТИЯ РАКА (вызывает опухоли области головы и шеи, РАК шейки матки, прямой кишки, полового члена, легких). Выдается ИНДИВИДУАЛЬНЫЙ КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ РЕЗУЛЬТАТ по КАЖДОМУ ТИПУ.
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) – широко распространенная и наиболее вариабельная группа вирусов, инфицирующих человека. Это маленькие безоболочечные ДНК-вирусы, являющиеся представителями семейства Papillomaviridae. В настоящее время идентифицировано более 100 типов ВПЧ, 80 из которых хорошо описаны. Количественное определение высокоонкогенных типов ВПЧ (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59) рекомендовано рядом международных организаций (ASCCP, ESIDOG, EUROGIМ, ECOG, WHO) и российской группой экспертов («Профилактика рака шейки матки», руководство для врачей).
Вирус папилломы человека относится к семейству Papillomaviridae. Вирионы не имеют оболочки и содержат ДНК. Более 30 типов ВПЧ могут инфицировать эпителиальный слой урогенитального тракта. В зависимости от онкогенного потенциала выделяют вирусы высокого (типы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59) и низкого (типы 6, 11, 42, 43, 44) онкогенного риска. Основной путь передачи возбудителя — половой (генитально-генитальный, мануально-генитальный, орально-генитальный), однако возможна передача и при непосредственном соприкосновении (кожный контакт). Риск передачи даже при однократном половом контакте равен 80%, особенно у девушек, не достигших половой зрелости. В период полового созревания у девушек естественным состоянием шейки матки является биологическая трансформация эктопированного на влагалищную порцию шейки матки цилиндрического эпителия, что облегчает проникновение вирусных частиц в клетки. ВПЧ обладает тропностью к эпителиальным тканям (кожа, слизистые оболочки) вне зависимости от их локализации и проникает в клетку через микроскопические порезы и потертости (дефекты). Несмотря на то, что большинство людей на протяжении жизни инфицируются этим возбудителем, чаще всего инфицирование заканчивается самопроизвольной элиминацией вируса из организма. Тем не менее у 5–10% пациентов ВПЧ персистирует, что в конечном итоге может приводить к появлению доброкачественных или злокачественных изменений кожи и слизистых оболочек. Вирус папилломы человека — единственный вирус, который не проникает в кровь, вследствие чего инфекционный процесс протекает без развития воспалительной реакции. Перенесенная ПВИ не защищает от повторного инфицирования. Средняя продолжительность времени между первичным инфицированием ВПЧ и развитием РШМ составляет 20 лет. В целом персистирующая ПВИ заканчивается раком лишь в 1,5% случаев. Лучшей профилактикой рака шейки матки является организованный скрининг – систематическое тестирование у бессимптомных женщин, так как эффективных лекарственных препаратов от вируса папилломы, вызывающего заболевание, нет.
Факторы риска ВПЧ-инфекции:
- Сексуальное поведение (раннее начало половой жизни, большое количество половых партнеров);
- Другие ИППП (хламидиоз, гонорея, трихомониаз, сифилис, инфицированность вирусом простого герпеса, вирусом иммунодефицита человека, цитомегаловирусная инфекция и др.);
- Изменения иммунного статуса;
- Терапия сопутствующей патологии цитостатиками (онкологических заболеваний, состояний после трансплантации органов).
Анализ ВПЧ (типы 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59) колич. позволяет:
- контролировать адекватность забора материала по наличию в образце достаточного количества эпителиальных клеток, что обеспечивает высокую чувствительность и специфичность теста;
- определять суммарное количество всех типов;
- динамически наблюдать за вирусной инфекцией и более точно прогнозировать ее развитие.
Исследование для выявления возбудителя папиллома-вирусной инфекции проводится с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (Real-Time) определяется генетический материал (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце, полученном из урогенитального тракта.
Показания к назначению исследования
Определение группы риска по развитию рака шейки матки
женщинам от 21 года, находящимся в группе риска по заражению ВПЧ
Скрининговые программы с цитологическим исследованием для женщин старше 30 лет
Обследование при неопределенных и сомнительных результатах цитологических исследований
Контроль эффективности терапии тяжелой дисплазии шейки матки (CIN II ) через 6 месяцев после удаления пораженного эпителия
Проведение дифференциальной диагностики с заболеваниями не папилломавирусной этиологии
Подготовка к исследованию
За 2 недели исключить прием противовирусной терапии
За 3 дня влагалищные формы лекарственных средств, интравагинального УЗИ и кольпоскопии
За сутки исключить половой контакт
Не должно быть менструальных выделений (рекомендовано либо за 5 дней до начала менструации, либо через 5 дней после окончания)
Беременным до 22 недель берет медицинская сестра если нет угрозы, с 22-30 недели -если нет угрозы, берет гинеколог по записи, с 30 недели только принесенный материал.
Соскоб из урогенитального тракта (у мужчин – уретра) рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания.
Источник
