Расшифровка результатов пцр на впч
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу. 
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) долгое время способен существовать в организме, проявляя себя только при ослаблении иммунной защиты. Чтобы выявить инфекцию, применяются различные виды анализов, позволяющие определять болезнь на ранней стадии и проводить эффективное лечение.
Разновидности анализов и техника проведения
Направления на сдачу анализов при подозрении на ВПЧ выдаются врачами дерматологами, гинекологами или урологами. Современной медицине под силу не только выявить присутствие вируса в организме человека, но и определить его принадлежность к определенному виду штамма (опасного или безвредного).
С этими целями специалисты прибегают к следующим методам:
- Количественному анализу.
- ПЦР (полимерной цепной реакции).
- Цитологии.
- ИФА (иммуноферментному анализу).
- Гистологии.
Digene тест
Количественный анализ, или Дайджен-тест (Digene-тест), строится на принципе гибридного захвата ДНК. Для проведения анализа проводится забор биологического материала с пораженного участка (методом соскоба или мазка). Техника позволяет определять стадию развития патологии и тип штамма. Результаты предоставляются в течение 7-10 дней.
ПЦР исследование
ПЦР – широко применяемый вид анализов для определения папилломавируса и других распространенных инфекций. Этот вид исследования подразумевает работу с жидкими средами – мочой, кровью, слюной, околоплодной жидкостью, выделениями из половых путей. Данный тест относится к высокоточным и дорогостоящим. Определяет присутствие ВПЧ по наличию ДНК вируса в организме уже в течение суток.
О том, как проводят ПЦР анализ у мужчин смотрите в нашем видео:
Иммуноферментный анализ
Иммуноферментный анализ позволяет выявить количественное и качественное содержание антител в биоматериале. Традиционно для проведения ИФА назначается сдача венозной крови. Исследоваться также могут другие среды организма:
- спинномозговая жидкость;
- уретральные выделения;
- цервикальная слизь.
Ответ с результатами обследования готовится и выдается пациенту в течение 3-х дней.
Цитологическое исследование
Цитология, также именуемая пап тестом или мазком Папаниколау –изучение клеток тела с применением микроскопа. В качестве материала для проведения анализа используются уретральные выделения у мужчин и содержимое урогенитального канала у женщин. Для получения высокоточных результатов материал должен быть взят одновременно из нескольких участков ткани.
Как проводят ПАП тест у женщин:
Метод позволяет определить наличие доброкачественных и злокачественных штаммов вируса папилломы. Достоверность результатов составляет 95 %. Получить их можно через 1-2 дня, в срочных ситуациях – в течение одного часа.
Результаты гистологического исследования
Гистология – взятие соскоба с места образования папилломы для дальнейшего микроскопического исследования. Этот информативный метод диагностики позволяет выявлять наличие раковых клеток с достоверностью 100 % и предотвращать развитие онкологии. Анализ рекомендуется пациентам при наличии папиллом, изменивших форму, цвет, размер.
Для проведения гистологического исследования проводят биопсию – забор тканей, которые в дальнейшем обрабатываются медицинскими растворами и изучаются под микроскопом. Ответ выдается по истечении 1-2 недель со дня взятия биоматериала.
Как подготовиться к процедуре
Чтобы получить максимально точные результаты анализов на ВПЧ, от пациентов потребуется соблюдение определенных правил. И женщинам, и мужчинам рекомендуется:
- Минимум за 2 недели до проведения анализа не принимать антибиотики и антибактериальные препараты.
- Накануне сдачи биоматериала не пользоваться антисептическими средствами личной гигиены.
- За 2 суток до исследования воздержаться от половых контактов.
- В течение 3-х суток до сдачи биосред не употреблять алкогольные напитки.
- За 3 часа до процедуры не мочиться.
Женщины не должны проходить обследование за 5 дней до и в течение такого же периода после месячных. Накануне проведения обследования не рекомендуются спринцевания. Сдача крови должна проводиться утром натощак.
Расшифровка – что означают результаты
Расшифровка анализов на ВПЧ традиционно проводится специалистом, владеющим необходимыми медицинскими знаниями. Упрощенно их можно трактовать следующим образом:
| Результаты количественного анализа | Менее 3 единиц вируса на 10⁵ клеток – безопасная концентрация (норма). |
| 3-5 единиц на 10⁵ клеток – значимая концентрация (существует вероятность появления новообразований). | |
| Более 5 единиц на 10⁵ клеток — высокая концентрация (повышенный риск развития злокачественного процесса). | |
| Результаты проведения ПЦР | ДНК не обнаружено – папилломавирус в крови пациента отсутствует. |
| Lg менее 3-х – незначительное присутствие (в пределах нормы). | |
| Lg 3-5 – значимое количество. | |
| Lg 5 и больше – показатель высокой концентрации вируса в крови. | |
| Цитология | Цифры от 1 до 2 – допустимая норма. |
| Цифра 3 – требуется проведение дополнительных анализов. | |
| От 4 до 5 – присутствие злокачественных клеток. |
После обследования на вирус папилломы человека методом ИФА могут быть получены следующие результаты:
- IgA – наличие свежего заражения;
- IgM – недавнее инфицирование;
- IgG – длительное нахождение возбудителя в организме.
Результаты исследования на гистологию предоставляются в виде письменного заключения. В бланке можно обнаружить пояснение – имеются или отсутствуют отклонения в клетках и тканях. Информация о результатах проведенного обследования предоставляется на латинском языке с использованием специальной медицинской терминологии.
Важно помнить о возможности получения ошибочных результатов анализов. Причинами могут стать использование грязных пробирок, неграмотное взятие биоматериала, неправильная подготовка пациента к процедуре.
Отрицательный ответ после сдачи анализов не становится гарантией полного отсутствия вируса. Такой результат может быть получен при малой концентрации возбудителя, с которой организму удается справляться собственными силами.
При получении некорректных данных в большинстве случаев специалисты назначают повторное прохождение обследования.
Источник
Заболевание вирусом папилломы человека требует точной диагностики и эффективного лечения. Расшифровка анализов на ВПЧ-инфекцию – важный этап в обследовании и последующей терапии.
Изучение норм и отклонений показателей диагностики, а также понимание результатов анализов – поможет не только подготовиться к походу, к врачу, но и приблизительно распланировать свои последующие действия.
Таблицы расшифровки результатов: нормы и отклонения
Чтобы поставить диагноз ВПЧ и назначить необходимое лечение, нужно сдать биологический материал на анализ.
Существует больше количество методов обследования вируса папилломы человека. Результаты самых основных способов диагностики будут подробно рассмотрены в этой статье.
Результаты ПЦР
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) помогает выявить ДНК и РНК возбудителей инфекционных болезней в любых фрагментах и клетках тканей человеческого организма.
В таблице можно ознакомиться с общими сведениями о возможных результатах на основе ПЦР анализа.
| Вирусная нагрузка ВПЧ | Предварительный результат | Расшифровка |
|---|---|---|
| 0-3 Lg | Отрицательно | Норма. Вирус в организме отсутствует. |
| 3-5 Lg | Не определено | Концентрация инфекции находится на границе с нормальным значением. Требуется провести дополнительное исследование. Присутствует риск развития дисплазии. |
| Больше 5 Lg | Положительно | Превышена концентрация инфекции. Высока вероятность присутствия дисплазии. |
Количественного исследования
Количественный анализ (другое название — Digene-тест) позволяет захватить вирусную ДНК специальным зондом РНК. После чего подсчитать генетический материал.
Нормальные значения результатов анализа можно увидеть в таблице.
| Группы ВПЧ | Типы ВПЧ | Предполагаемые результаты |
|---|---|---|
| Низкий онкогенный риск | 6, 11, 42, 43, 44 | Более 1 относительной единицы – положительный результат (концентрация вирусов клинически значимая). Если меньше 1 – «Не обнаружен» — результат отрицательный. |
| Высокий онкогенный риск | 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 | Более 1 относительной единицы – положительный результат (концентрация вирусов клинически значимая). Если меньше 1 – «Не обнаружен» — результат отрицательный. |
Иммуноферментного
Иммуноферментный анализ выявляет качественное и количественное содержание трех классов антител в биологическом материале:
- IgM.
- IgA.
- IgG.
Эти антитела вырабатываются на разных стадиях заболевания.
Например:
- IgM – вырабатывается в самом начале болезни. У здорового человека в организме этих антител быть не должно.
- Наличие IgG свидетельствует о том, что человек либо является носителем инфекции, либо уже ей переболел.
- Если в крови обнаружены антитела класса IgA – человеку требуется интенсивная терапия. Инфекционное заболевание носит хронический характер. Отсутствие IgA говорит о том, что инфекцию удалось уничтожить.
Традиционно для проведения этого анализа сдается венозная кровь.
Важно!
Выявить штамм вируса или его тип при помощи этого метода – невозможно.
Для более удобной расшифровки результатов, в таблице отражены комбинации отсутствия или наличия в организме этих трех классов антител.
| IgM | IgG | IgG | Результат |
|---|---|---|---|
| нет | нет | нет | У человека отсутствует иммунитет к инфекции |
| нет | есть | нет | У человека имеется постинфекционный иммунитет |
| есть | нет/есть | нет/есть | Острая инфекция |
| есть | есть | есть | Состояние хронической инфекции находится в стадии обострения |
| нет | нет/есть | нет/есть | В организме присутствует хроническая инфекция |
При расшифровке результатов (есть) говорит о положительном результате, а (нет) – об отрицательном.
Общее исследование забора крови
Общий анализ крови не предназначен для определения наличия вируса папилломы человека в организме. Этот метод используется для того, чтобы выявить сопутствующие заболевания, передающиеся половым путем.
К ним относятся:
- Гепатит.
- Хламидиоз.
- ВИЧ.
- Микопалазмоз и др.
Если общий анализ крови показал отрицательный результат на сопутствующие инфекции, то лечение будет направлено исключительно на ВПЧ.
Что означают результаты
Кратко, но о каждом расскажем ниже.
Ложноположительный
Не всегда положительный результат анализа на HPV-инфекцию означает наличие заболевания. Бывают и ложноположительные результаты, которые необходимо перепроверять.
Референтность значения
Референтные результаты анализа нельзя рассматривать, как единственно верные. Эти показатели подразумевают общее значение, полученное лабораторией в ходе исследования определенной выборки населения.
Например:
- беременные женщины;
- молодые люди в возрасте 20-35 лет;
- нерожавшие девушки и т. д.
Результаты анализов этих категорий граждан необходимы для того, чтобы получить средний суммарный показатель относительной нормы.
Таким образом, производится количественный анализ на ВПЧ. Усредненное значение 3–5 Lg подразумевает сомнительные результаты. Они собраны по оценке определенной выборки носителей HPV вируса.
СПРАВКА: Поэтому, понятия нормы – размыты, ведь они могут отличаться в зависимости от возраста, сопутствующих заболеваний и особенностей организма.
Чаще всего необходимо предавать значение только качественному итогу исследования, который показывает наличие вируса. Если обнаружится неонкогенный тип HPV, следует считать, что его концентрация несущественна.
Если исследование положительное?
Если анализ на ВПЧ оказался положительным, значит, в организме присутствует вирус. Не стоит переживать.
СПРАВКА: По статистическим данным, 7 человек из 10 – носители вируса папилломы.
Многие даже не догадываются о своем заболевании и живут счастливо долгие годы. Симптомы патологии активизируются только в период ослабления иммунной системы.
В зависимости от общей клинической картины болезни и выявленного типа возбудителя, врач назначает лечение. Чаще всего оно включает в себя:
- противовирусную терапию;
- методы деструкции новообразований;
- терапию по укреплению иммунитета.
При 56, 16, 31, 18 и другие онкоопасные штаммы
При обнаружении штаммов инфекции с повышенным онкогенным риском, необходимо немедленно приступить к лечению. Терапия должна быть направлена на восстановление иммунитета и устранение образований.
Важно!
Онкоопасные штаммы вируса наиболее губительны для женского здоровья. Они могут вызвать развитие злокачественных новообразований в области шейки матки.
Поэтому нужно обязательно пройти дополнительное диагностическое исследование на наличие дисплазии или эрозии. Чтобы выявить злокачественные изменения в клетках, следует пройти гистологическое обследование тканей.
При доброкачественных штаммах
Неонкогенные типы HPV—вируса не приводят к мутации клеток. Они могут нести угрозу только при повреждении или расчесывании папиллом деталями одежды.
В рану может попасть инфекция, которая вызовет вторичный воспалительный процесс. Поврежденные клетки новообразования начнут ускоренно распространяться на здоровых «соседей».
Доброкачественные штаммы ВПЧ могут проявляться в виде:
- бородавок различных форм и видов;
- кондилом;
- «бородавок мясника» — новообразований красного цвета, похожих на открытые раны.
Бывает, что анализ на ВПЧ положительный, но клинические проявления вируса (бородавок, кондилом и т. д.) отсутствуют. Это может говорить о том, что человек является только носителем инфекции.
Если ДНК папилломавируса не обнаружено
Если результаты анализа показали, что ДНК вируса папилломы человека не обнаружено, значит, в организме пациента отсутствует инфекция.
Важно!
Но не всегда отрицательный результат говорит об отсутствии вируса.
Если в организме присутствует маленькая концентрация инфекции, то иммунная система человека в состоянии самостоятельно подавить ее активность.
Но при ослабленном иммунитете вирус может начать «действовать». Поэтому не стоит пренебрегать повторными обследованиями. Нередко именно они выявляют наличие заболевания.
Что может влиять на показатели
Чтобы анализ на ВПЧ не был ложным, врачи рекомендуют придерживаться определенных правил. Если пациенты их нарушают – результаты исследования искажаются.
Ложноположительные результаты могут диагностироваться, если:
- человек проигнорировал рекомендации врача и нарушил правила подготовки к диагностике;
- незадолго до проведения анализа, пациент проходил лечение;
- забор материала был произведен неправильно;
- биологический образец был загрязнен.
Чтобы результаты анализа на ВПЧ не были ложными, нужно учесть несколько правил:
- запрещается употреблять противомикробные, антибактериальные и противовирусные препараты в течение 12 часов перед забором материала для анализа;
- за 72 часа до сдачи мазка нужно воздержаться от половых контактов;
- за несколько часов до сбора материала, желательно воздержаться от мочеиспускания;
- перед походом к специалисту для забора материала, необходимо принять ванну;
- мазок не следует сдавать во время критических дней, а также за два дня до их начала, и в течение двух дней – после.
В том случае, если пациент собирается сдавать анализ крови, то лучше делать это на голодный желудок.
Правильная подготовка к обследованию, соблюдение четких рекомендаций врача – позволит не только выявить заболевание, но и дать ему вовремя отпор.
Источник
