Пцр на впч скрин
Автор Виталий Колчанский На чтение 7 мин. Просмотров 3.3k. Опубликовано 26.02.2018
Папилломавирус — это распространенный возбудитель из семейства паповавирусов, которым, по некоторым данным, заражено 80-90% населения. Заражение является не только косметической проблемой: некоторые типы вируса существенно повышают вероятность появления злокачественных опухолей (например, рака шейки матки). Чтобы вовремя обнаружить наличие повышенного риска онкологии, необходимо регулярно проходить ВПЧ-скрининг.
Типы ВПЧ
Общее число всех серотипов вируса папилломы человека достигает 150. Но не все типы ВПЧ, которые открыты специалистами, опасны для пациентов. Из 80 наиболее исследованных раковый риск существенно повышают лишь 12-15 серотипов. По признаку онкогенности типы возбудителя классифицируются на:
- Неонкогенные. К ним относятся 1-5 серотипы ВПЧ. Их присутствие в организме может проявляться только в виде бородавок.
- Низкоонкогенные. 6, 11, 42-44 типы ВПЧ маркируются как вирусы с низким канцерогенным риском (НКР). Они способны спровоцировать развитие раковых новообразований, но это происходит редко и только при особых условиях. Эти серотипы ВПЧ вызывают появление остроконечных и плоских кондилом и папилломатоз дыхательных путей.
- Высокоонкогенные (ВКР). Наибольший риск развития раковых опухолей возникает в том случае, если в организме присутствует ВПЧ следующих типов: 82, 73, 68, 66, 59, 58, 56, 52, 51, 45, 39, 35, 33, 31, 18 и 16. Два последних обнаруживаются в крови большей части пациенток с диагностированным раком маточной шейки.
Виды рака, которые провоцируются высокоонкогенными ВПЧ, отличаются большой распространенностью и относительно высокой летальностью (до 16,3% в первый год после постановки диагноза). Для мужчин опасность представляет повышение риска развития злокачественных неоплазий внешних половых органов и аногенитальной области. Реже вирус провоцирует появление опухолей гортани, полости рта и других органов.
В медицинской практике применяется и другая классификация, обусловленная филогенетическими особенностями вирусов папилломы человека. Генитальные типы ВПЧ объединены в группу А. Самые распространенные высокоонкогенные вирусы (16 и 18 типов) входят в подгруппы А9 и А7 соответственно. Это разделение позволяет более точно прогнозировать развитие инфекции.
Причины заражения вирусом папилломы
Вирус папилломы человека передается тремя путями:
- от матери к ребенку в процессе родоразрешения;
- при сексуальном контакте;
- при использовании предметов личной гигиены носителя (контактно-бытовым путем).
Риск заражения как у женщин, так и у мужчин при незащищенном половом контакте составляет 60-66%. Использование презерватива существенно снижает вероятность передачи вируса, но не устраняет полностью.
Скрининг — общее обследование
Проявления болезни могут оставаться незамеченными даже при регулярном посещении гинеколога, поэтому о том, что такое скрининг ВПЧ, не задумывается большинство носительниц вируса.
Общее обследование начинается с гинекологического осмотра и взятия мазка. Анализ на онкоцитологию делается ежегодно по плану (после 30 лет) либо в связи с замеченными проявлениями папилломавирусной инфекции (например, кондиломами).
Анализ ПЦР и расширенный метод скрининга на ВПЧ могут назначаться при патологическом мазке (наличии атипичных клеток в биоматериале) или проводиться параллельно цитологическому исследованию. Вирусы присутствуют в биологических материалах: крови, моче, выделениях, околоплодных водах. Для определения наличия вируса чаще всего используется мазок из влагалища и уретры (у мужчин).
Всего существует два способа установить диагноз ПЧ с уточнением серотипа вируса. Также они помогают определить количество вируса в организме, а также спрогнозировать вероятность малигнизации (развития злокачественной ткани).
Что показывает расширенный скрининг
Наиболее чувствительный метод диагностики ВПЧ — это ИФА-анализ. С его помощью определяется наличие антител к возбудителю инфекции. Однако поставить диагноз на основании этого теста невозможно, т. к. он не уточняет ни серотип, ни количество инфекционного агента в организме пациента.
ВПЧ ВКР-скрининг основывается на определении ДНК вируса в крови или выделениях. Распространенным анализом является метод цепной реакции полимеразной (ПЦР). Этот тест является универсальным, чувствительным и удобным. С его помощью определяются и типы вируса в организме пациента, и их концентрация в биоматериале.
Чувствительность ПЦР-теста позволяет определять наличие ВПЧ практически сразу после попадания в организм, поэтому результат не всегда является поводом для опасений. Для проведения диагностики необходимо выбирать проверенную лабораторию, т. к. процент ложноположительных и ложноотрицательных результатов этого анализа при недостаточной опытности проводящих его специалистов остается высоким.
Digene-тест не менее эффективен для расширенного скрининга, но, в отличие от предыдущего метода, он обнаруживает опасный уровень вирусной нагрузки. При выявлении нескольких онкогенных типов ВПЧ течение заболевания может быть осложнено.
Кроме онкоцитологии, ПЦР и Digene-теста полное тестирование (цервикальный скрининг) может включать кольпоскопию (визуальное исследование слизистых маточной шейки) и гистологический анализ образца тканей.
Надежен ли скрининг
Комплексный скрининг, включающий цитологическое исследование и анализ на ДНК ВПЧ методом ПЦР или Digene-теста, позволяет снизить риск заболеваемости раком, ассоциированным с онкогенными серотипами папилломавируса. Эти тесты применяются как для профилактики, так и для отслеживания эффективности лечения и рецидивов при РШМ.
Динамика результата не менее важна, чем факт наличия вируса: если спустя 9-12 месяцев концентрация возбудителя резко снижается, то заболевание ВПЧ имело транзиторный характер. В другом случае в организме присутствует постоянная (персистентная) инфекция, повышающая риск возникновения раковых опухолей.
Зачем диагностировать заболевание
Регулярные профилактические осмотры позволяют обнаружить проявления ВПЧ (бородавки, кондиломы) или выявить бессимптомную инфекцию при плановых анализах ПЦР. Своевременная терапия и повторная диагностика — гарантия действенной профилактики или лечения онкологии на самых ранних стадиях.
Необходимо учитывать, что у женщин, которые инфицированы ВПЧ, частота возникновения злокачественных новообразований маточной шейки в 300 раз выше, чем у здоровых пациенток.
Кто должен проходить скрининг
Скрининг необходимо проходить всем женщинам после 30 лет не реже чем раз в 3 года. При обнаружении инфекции у партнера и признаках наличия ВПЧ онкогенных типов (плоских и остроконечных кондиломах) рекомендуется обратиться к врачу за направлением на исследование.
Вероятность выявления вируса с ВКР при ПЦР-тестировании достигает 99%. При обнаружении онкогенных типов ВПЧ специалист назначает дополнительные исследования, иммунную терапию и повторные уточняющие анализы.
Анализ ПЦР является частью профилактических мероприятий при планировании беременности.
Что расскажет доктор перед исследованием
При назначении анализа на ВПЧ врач должен остановиться на следующих аспектах:
- определяет ли выбранный тест высокоонкогенные папилломавирусы или только наличие инфекции в организме;
- какое количество ВПЧ ВКР выявляется анализом;
- будет ли указана в результате вирусная нагрузка;
- как сдавать анализ, чтобы не получить ложный результат;
- каковы методы лечения и прогнозы пациентов при ВПЧ;
- спустя какое время исследование необходимо провести снова при положительном результате.
Что необходимо делать для прохождения исследования
Чтобы результат анализа не оказался ложным, необходимо следовать следующим рекомендациям:
- не сдавать анализы во время менструации и в течение 3 дней после;
- не применять вагинальные свечи, мази и кремы в течение 3 суток до исследования;
- накануне сдачи анализа не использовать бактерицидные средства гигиены и спринцевание;
- за 2 суток до забора биоматериала отказаться от вредной пищи, спиртных напитков и сексуальных контактов;
- мужчинам не мочиться в течение 1,5-2 часов до исследования.
Если для анализа берется кровь пациента, то ему рекомендовано заняться исследованием, прежде чем отправиться на завтрак: наиболее точный результат у пробы, взятой натощак.
Как оценить результаты ВПЧ теста
Для интерпретации теста используются показатели Lg или цифровые определения. Результат менее 3 Lg (103) свидетельствует о незначительном количестве возбудителей, 3-5 Lg (103-105) является диагностически важным, а при более чем 5 Lg (>105) существует высокий риск малигнизации тканей.
Оценивать результаты анализа должен врач, принимая во внимание серотип вируса и сопутствующие показания пациента.
Излечима ли папилломавирусная инфекция
В зависимости от онкогенного риска врач может рекомендовать следующие препараты:
- иммуномодуляторы для стимуляции защитных сил организма;
- противовирусные препараты для снижения вирусной нагрузки;
- комплексную терапию против грибковых и бактериальных возбудителей различных болезней;
- витаминные препараты и др.
В большинстве случаев ВПЧ терапия не проводится, устраняются только внешние проявления вируса в виде бородавок и папиллом.
Источник
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. 
ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу. 
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
