Пцр мочи на впч
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. 
ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу. 
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
ПЦР диагностика мочи на HPV 16, 18
Для обнаружения папилломавируса типов 16, 18 в моче чаще всего используется метод ПЦР. Анализ позволяет выявить ДНК вируса в исследуемом образце и подтвердить тем самым факт инфицирования.
HPV 16,18 типа относятся к классу вирусов с высокой онкогенностью, которые провоцируют развитие рака шейки матки у практически 75% зараженных женщин. Передается вирус половым путем от инфицированного партнера, также возможно заражение при совместном пользовании средствами гигиены и полотенцами.
Когда делают анализ
Анализ мочи на вирус папилломы человека 16 и 18 типа методом ПЦР рекомендуется врачом при:
- обнаружении во время осмотра изменений эпителия в области шейки матки;
- эрозии, дисплазии шейки матки;
- в рамках осмотра при планировании беременности (анализ сдают оба супруга);
- частой смене половых партнеров;
- диагностировании ЗППП;
- выявлении ВПЧ у полового партнера;
- иммунодефицитных состояниях, которые могут сопровождаться хронизацией заболеваний и развитием серьезных осложнений;
- перед вакцинацией против ВПЧ (обнаружение вируса не является противопоказанием к введению вакцины);
- отслеживание эффективности назначенной противовирусной терапии.
Как правильно собрать мочу
Собирать мочу для проведения ПЦР диагностики следует в специальный стерильный контейнер, который можно приобрести в аптеке. Для получения максимально достоверных результатов важно правильно подготовиться к процедуре.
Правила для пациента:
- Исследованию подлежит образец утренней мочи.
- Перед сбором биоматериала желательно не мочиться в течение двух часов, также нельзя подмываться (гигиенические процедуры следует сделать вечером накануне анализа).
- За 5 дней до анализа рекомендуется прервать антибактериальную и противовирусную терапию.
- Запрещено применение вагинальных свечей и процедура спринцевания.
- Женщинам не следует собирать мочу во время менструации, поскольку возрастает вероятность получения ложных результатов.
Методика проведения анализа
Полимеразная цепная реакция включает многократное копирование выделенного праймером участка ДНК вируса. Образец биоматериала помещается в контейнеры амплификатора. Здесь автоматически регулируется цикл нагревания содержимого до 95 градусов и его охлаждения.
Специально подобранный праймер добавляется в охлажденный биоматериал, чтобы активизировать стадию отжига. На этом этапе происходит выделение фрагмента ДНК, который поможет определить тип возбудителя.
На последнем этапе происходит элонгация. В качестве катализатора процесса копирования используется энзим ДНК-полимераза. Для выделения образованных фрагментов вносится флуоресцентный краситель.
Расшифровка анализа
Нормальным считается отрицательный результат анализа, подтверждающий отсутствие заражения ВПЧ.
При положительном результате должна указываться концентрация выявленных ДНК-фрагментов HPV 16, 18 в расчете на 100 тысяч клеток:
- меньше 103 — очень низкое содержание вирусных частиц, пациент считается носителем инфекции;
- от 103 до 105 возрастает вероятность формирования внешних проявлений папилломавируса;
- больше 105 считается высоким показателем вируса папилломы человека 16 и 18 типа, поэтому женщинам следует регулярно проходить анализ для своевременного выявления рака шейки матки.
Источник
ПЦР диагностика мочи на ВПЧ 18, 16, 31, 51, 58
Анализ мочи, проведенный с помощью высокочувствительного метода ПЦР диагностики, позволяет обнаружить наличие в организме пациента 18, 16, 31, 51, 58 серотипы ВПЧ, проводится для выявления папилломавирусной инфекции и клинического разграничения ассоциированных с ней патологических процессов.
Вирус папилломы человека (Human papillomavirus) является наиболее широко распространенным возбудителем инфекционных заболеваний органов мочеполовых путей, которые могут спровоцировать развитие цервикального рака у женщин и плоскоклеточной карциномы у мужчин.
Основные способы передачи папилломавируса – половой и бытовой, в медицинской практике известны случаи внутриутробного инфицирования. Воздействие различных типов ВПЧ на эпителиальную ткань различно:
- могут формироваться доброкачественные образования (кондиломы и папилломы);
- ДНК вируса объединяется с геномом клетки и развивается дисплазия, которая провоцирует возникновение злокачественного процесса – рака.
Наиболее частой локализацией карциномы считается переходная зона шейки матки в цервикальный канал. Клинические признаки HPV-инфекции выявляют у 50% сексуальных партнеров инфицированных папилломавирусом женщин – у них наблюдается наличие генитальных кондилом. В этих случаях поражение кожных и слизистых покровов половых путей вызвано теми же видами ВПЧ, что и у их партнерш.
Наиболее точным способом диагностики папилломавирусной инфекции считается полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Когда делают анализ
Врач назначает анализ мочи на вирус папилломы человека 18, 16, 31, 51, 58 методом ПЦР при:
- наличии у женщины любых изменений в тканях цервикального канала;
- оценивании успешности проведенной вакцинации против ВПЧ-инфекции;
- контроле эффективности курса противовирусной терапии;
- скрининговом обследовании женщин детородного возраста.
Методика проведения анализа
- низкой вероятностью пропустить наличие в образце биоматериала возбудителя инфекционного процесса;
- высокой скоростью проведения тестирования;
- возможностью диагностирования ранней стадии заболевания, что способствует уменьшению финансовых затрат пациента на медицинское обслуживание и повышает успешность проводимого лечения.
Для собирания биологического материала пациенту необходимо приобрести вакуумный набор – в его состав входят контейнер с крышкой и пробирка с трубкой. Техника сдачи мочи состоит в следующих действиях:
- утром нужно помочиться в контейнер;
- накрыть его крышкой и вставить пробирку;
- ее наполнение осуществляется самостоятельно (под отрицательным давлением).
По завершению процедуры контейнер и трубку можно утилизировать, а пробирку – доставить в лабораторный центр.
Расшифровка анализа
Отрицательный результат анализа: «фрагменты ДНК ВПЧ не обнаружены» – это показатель нормы, указывающий на отсутствие в организме пациента папилломавирусной инфекции.
Положительный результат анализа свидетельствует о наличии специфических участков генетического материала ВПЧ 18, 16, 31, 51, 58 и подтверждает инфицирование.
Источник
ПЦР диагностика мочи на ВПЧ 18, 45, 35, 39, 39 (в.р.)
Молекулярно-биологический анализ мочи, проведенный с помощью высокоточной методики ПЦР диагностики и позволяющий обнаружить наличие в организме пациента серотипы вируса папилломы человека, которые обладают высокой канцерогенной активностью – 18,45, 35,39, 39 (в.р.) проводится для выявления папиллома-вирусной инфекции и оценивания риска возникновения ассоциированных с ней заболеваний.
Вирус папилломы человека (ВПЧ, Human papillomavirus) характеризуется поражением эпителиального слоя кожных покровов. Заражение происходит половым либо контактно-бытовым способом. Факторами, способствующими развитию папиллома-вирусной инфекции, считаются:
- ранняя сексуальная активность;
- снижение иммунной защиты;
- авитаминоз;
- вредные привычки;
- проживание в мегаполисах;
- использование гормональных контрацептивов.
Продолжительность инкубационного периода может составлять до десяти лет. Начало инфекционного процесса скрытое, с отсутствием специфических клинических проявлений. Для острого течения HPV-инфекции характерно возникновение доброкачественных образований – бородавок, папиллом, кондилом. Объединение молекул ДНК вируса с клеточным геномом приводит к неправильному развитию тканей – дисплазии.
Инфицирование папиллома-вирусами, обладающими высокой онкогенной активностью, провоцирует формирование бовеноидного папулеза или плоскоклеточных карцином. Для выявления данных типов ВПЧ используют методику полимеразной цепной реакции, основанную на создании большого количества копий фрагментов генетического материала возбудителя инфекции и возможности его идентификации.
Когда делают анализ
Проведение молекулярно-генетического анализа на вирус папилломы человека 18, 45, 35, 39, 39 (в.р.) методом полимеразной цепной реакции необходимо при:
- подтверждении наличия у пациента ВПЧ-инфекции;
- оценивании степени онкогенного риска у женщин с диагностированной цервикальной дисплазией;
- сомнительных итоговых данных цитологического анализа мазка из влагалища.
Методика проведения анализа
Анализ мочи ПЦР методом имеет ряд преимуществ:
- высокую скорость проведения тестирования;
- низкую вероятность получения ложных результатов;
- возможность обнаружения инфекционного агента даже при наличии его генома в минимальном количестве.
Для сдачи биологического материала необходимо приобрести специальный вакуумный набор, состоящий из пробирки с трубкой и емкости с плотно прилегающей крышкой. Собирание образца биоматериала производят утром – пациент должен помочиться в контейнер, накрыть его крышкой и вставить пробирку, которая наполнится самостоятельно за счет отрицательного давления. После завершения этой процедуры емкость и трубку можно утилизировать, а пробирку необходимо доставить в клинико-диагностический центр.
Расшифровка анализа
Отрицательный результат анализа: «фрагменты ДНК вируса папилломы человека серотипов высокого риска не выявлены» – это показатель нормы, опровергающий инфицирование.
Положительный результат анализа указывает на присутствие в организме пациента папиллома-вирусов с высоким риском формирования злокачественных патологий.
Источник
