Пцр количественный впч 16

пцр количественный впч 16 thumbnail

пцр количественный впч 16

Автор статьи

Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.

Общие сведения

анализ пцр на впчАнализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.

Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:  

  • наличие ВПЧ;
  • штаммы, которыми инфицирован больной;
  • количественное содержание вируса в организме.

Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.

Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.штаммы вируса папилломы человека

Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.

Показания для анализа

Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. папилломы у мужчин и женщин ВПЧ распространяется следующими путями:

  • при незащищенных половых контактах;
  • при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
  • контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
  • во время тесного контакта с кожей больного.

Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.  фото: впч высокого онкогенного риска у женщин

Преимущества метода

ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:

  1. Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
  2. Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
  3. Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
  4. Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.

Недостатки метода

Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.

Читайте также:  Допустимые значения при впч

Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.

Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:

  • собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
  • нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
  • реагенты были непригодными.

Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие. 

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.   

Как сдавать анализ

Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.

Как сдают анализ мужчины

взятие мазка у мужчинГоловка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения. 

Как сдают анализ женщины

взятие мазка у женщины

Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику. 

Забор биоматериала

Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.

Читайте также:  Удаление впч народными средствами

Расшифровка анализа ПЦР

фото: данные пцр исследования

В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.

Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:

  • Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
  • Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
  • Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.

В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.

Источник

ПЦР-диагностика папилломавирусной инфекции 16,18 тип (количественно)

Выявление ДНК Human Papillomavirus 16/18 в образце, позволяющее обнаружить даже минимальную концентрацию вируса.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), мазок урогенитальный, ректальный мазок, соскоб урогенитальный (ПЦР).

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
  • Женщинам взятие урогенитального мазка рекомендуется производить до менструации или через 2 дня после её окончания.
  • Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.

Общая информация об исследовании

Вирус папилломы человека (ВПЧ) представляет собой совокупность около 100 родственных вирусов. Одни виды вызывают кожные бородавки, а другие могут быть причиной венерических заболеваний (ЗППП) и кондилом.

Генитальный ВПЧ является одним из наиболее распространенных венерических заболеваний в мире.

Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет.

Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30  % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса.

Чаще всего встречается у молодых женщин и мужчин, при этом основной путь распространения – оральный, анальный или вагинальный секс. Хотя большинство вирусов из этой группы не очень опасны для здоровья, есть, однако, несколько типов папилломы (например, ВПЧ-16, 18), которые могут быть опасны для здоровья. Обычно они не вызывают видимых изменений, но, находясь в эпителии, способны вызывать рак шейки матки, а также другие, менее распространенные, опухоли, например рак влагалища, рта, горла, пениса и ануса. Тест на ВПЧ определяет ДНК именно таких вирусов, связанных с высоким риском развития рака. Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки). Инфицирование ими приводит к относительно доброкачественному бовеноидному папулёзу или плоскоклеточным интраэпителиальным неоплазиям шейки матки.

Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР. Он позволяет найти ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Для чего используется исследование?

  • В качестве способа определения риска рака шейки матки (для диагностики самого рака шейки матки используется цитологическое исследование , когда выявляются атипичные клетки эпителия, которые могут быть вестником развития рака шейки матки).

Когда назначается исследование?

Женщинам в возрасте от 30 лет, которые подвержены риску заражения ВПЧ, а также женщинам от 21 года, находящимся в группе риска по заражению ВПЧ и имеющим цитологически выявленные атипичные плоские клетки неясного значения (положительный ASC-US тест).

Могут тестироваться и мужчины, подверженные риску заражения ВПЧ.

Что означают результаты?

Референсные значения:

ДНК ВПЧ 16 типа, Ig – не обнаружено.

ДНК ВПЧ 18 типа, Ig – не обнаружено.

При выявлении ДНК вируса указывается количество и дается интерпретация вирусной нагрузки (клинически значимая/незначимая).

Положительный результат указывает на наличие генетического материала ВПЧ 16-го и 18-го типа в исследуемом образце.

Отсутствие генетического материала ВПЧ 16-го и 18-го типа в исследуемом образце означает, что наличие ВПЧ-инфекции маловероятно.

Читайте также:  Впч 16 лечение гроприносин

Если мазок показал цитологические изменения, а результат ПЦР отрицательный, то требуется дальнейший мониторинг, так же как и в случае отрицательного цитологического исследования и положительного ПЦР-теста.

Вопрос: Василий  |  20 Октября, 2019

Здравствуйте, к какому врачу обращаться при возникновении тревоги и панических атак?

Начинать нужно с невролога.

Вопрос: Татьяна  |  19 Октября, 2019

Здравствуйте, убирают ли у вас в центре сосудистые звездочки?

Пока такой аппаратуры у нас нет.

Источник

Вирус папилломы человека 16/18 тип, HPV 16/18 — качественное обнаружение вируса папилломы человека высокого онкогенного риска в соскобе урогенитального тракта, методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени, позволяет определить количество ДНК клинически значимых типов ВПЧ в образце. 

Вирус папилломы человека (ВПЧ) — широко распространённое инфекционное заболевание мочеполовых органов, которое может стать причиной возникновения рака шейки матки у женщин и плоскоклеточного рака у мужчин. 

Различные типы ВПЧ вызывают развитие:

  • цервикальной, вульвальной, влагалищной дисплазии шейки матки;
  • преинвазивного и инвазивного рака шейки матки, рака влагалища и перианальной области;
  • остроконечных кондилом половых органов, мочевых путей;
  • генитальных кондилом.

Пути распространения инфекции
Основной путь передачи ВПЧ — половой, но описаны случаи бытовой передачи инфекции. Женщины и мужчины подвергаются инфицированию с одинаковой частотой. Приблизительно у 70% обследованных, ВПЧ выявляется у обоих половых партнёров. Возможно внутриутробное инфицирование.

По данным некоторых исследователей, частота инфицирования вирусом прямо пропорциональна числу половых партнёров: при наличии одного партнёра, ВПЧ выявляется у 17–20% женщин, при наличии 5 и более партнёров — у 70–80%.

Инкубационный период 
Длительность инкубационного периода может длиться от 2 месяцев до 2–10 лет. Для ВПЧ характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления и при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании изменения не выявляются. В 30% случаев, в течение 6–12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.

Клинические проявления
ВПЧ может по-разному воздействовать на эпителий: способствовать возникновению доброкачественных образований (папиллом, кондилом) или объединению ДНК папиллома-вируса с геном клетки, что приводит к дисплазии и неоплазии, в дальнейшем к раку. Наиболее частая область локализации рака — переходная зоне шейки матки в цервикальный канал.

Клинические формы папилломавирусной инфекции обнаруживают у 40–60% мужчин, являющихся половыми партнёрами инфицированных женщин. Поражения у них вызываются теми же типами ВПЧ, что и у женщин. В 2/3 случаев возникают характерные высыпания на коже и слизистых оболочках половых органов.

Показания к исследованию:

  • лица, проходящие обследование на другие ИППП;
  • женщины с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом — проявления трансформирующей дисплазии в различной степени;
  • мужчины по клиническим показаниям;
  • ослабление иммунитета;
  • профилактические скрининговые исследования.

При своевременном обследовании и правильном лечении, риск перерождения HPV высокого риска, в том числе папиллома вируса типов 16, 18, в онкологическое заболевание — можно свести к минимуму.

Подготовка
Мужчины
Перед взятием урогенитального соскоба рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5–2 часов. 

Женщины
Сдача соскоба не допускается в дни менструации. За две недели исключить приём антибиотиков, за трое суток до взятия — вагинальные свечи, тампоны, спермициды. За сутки до сдачи анализа нельзя вступать в половые контакты. Нельзя спринцеваться накануне проведения обследования. После УЗИ с применением трансвагинального датчика, должно пройти не менее 48 часов.

Интерпретация результатов
Формат выдачи результата ВПЧ 16/18 типа — обнаружено/не обнаружено.

Причины положительного результата:

  • наличие ВПЧ 16-го и 18-го генотипов в исследуемом материале, что ассоциировано с высоким риском развития рака шейки матки и других новообразований аногенитальной области.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие ВПЧ 16-го и 18-го генотипов в исследуемом материале, что не исключает вероятного инфицирования ВПЧ других генотипов.

Что может влиять на результат?

  • Ложноотрицательный результат возможен при неправильном взятии и хранении материала, а также при содержании вируса в материале ниже детектируемого уровня.
  • Ложноположительный результат бывает следствием загрязнения материала.

Важные замечания

  • Инфицирование ВПЧ не всегда приводит к раку шейки матки.
  • Возможно одновременное заражение несколькими генотипами ВПЧ.
  • Результат анализа должен интерпретироваться с учётом заключений цитологического и гистологического исследований.

Источник