Пцр диагностика впч 16 что это
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. 
ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу. 
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
Выявление ДНК Human Papillomavirus 16/18 в образце, позволяющее обнаружить даже минимальную концентрацию вируса.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок из зева (ротоглотки), мазок урогенитальный, ректальный мазок, соскоб урогенитальный (ПЦР).
Как правильно подготовиться к исследованию?
- За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
- Женщинам взятие урогенитального мазка рекомендуется производить до менструации или через 2 дня после её окончания.
- Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.
Общая информация об исследовании
Вирус папилломы человека (ВПЧ) представляет собой совокупность около 100 родственных вирусов. Одни виды вызывают кожные бородавки, а другие могут быть причиной венерических заболеваний (ЗППП) и кондилом.
Генитальный ВПЧ является одним из наиболее распространенных венерических заболеваний в мире.
Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет.
Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса.
Чаще всего встречается у молодых женщин и мужчин, при этом основной путь распространения – оральный, анальный или вагинальный секс. Хотя большинство вирусов из этой группы не очень опасны для здоровья, есть, однако, несколько типов папилломы (например, ВПЧ-16, 18), которые могут быть опасны для здоровья. Обычно они не вызывают видимых изменений, но, находясь в эпителии, способны вызывать рак шейки матки, а также другие, менее распространенные, опухоли, например рак влагалища, рта, горла, пениса и ануса. Тест на ВПЧ определяет ДНК именно таких вирусов, связанных с высоким риском развития рака. Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки). Инфицирование ими приводит к относительно доброкачественному бовеноидному папулёзу или плоскоклеточным интраэпителиальным неоплазиям шейки матки.
Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР. Он позволяет найти ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
Для чего используется исследование?
- В качестве способа определения риска рака шейки матки (для диагностики самого рака шейки матки используется цитологическое исследование , когда выявляются атипичные клетки эпителия, которые могут быть вестником развития рака шейки матки).
Когда назначается исследование?
Женщинам в возрасте от 30 лет, которые подвержены риску заражения ВПЧ, а также женщинам от 21 года, находящимся в группе риска по заражению ВПЧ и имеющим цитологически выявленные атипичные плоские клетки неясного значения (положительный ASC-US тест).
Могут тестироваться и мужчины, подверженные риску заражения ВПЧ.
Что означают результаты?
Референсные значения:
ДНК ВПЧ 16 типа, Ig – не обнаружено.
ДНК ВПЧ 18 типа, Ig – не обнаружено.
При выявлении ДНК вируса указывается количество и дается интерпретация вирусной нагрузки (клинически значимая/незначимая).
Положительный результат указывает на наличие генетического материала ВПЧ 16-го и 18-го типа в исследуемом образце.
Отсутствие генетического материала ВПЧ 16-го и 18-го типа в исследуемом образце означает, что наличие ВПЧ-инфекции маловероятно.
Если мазок показал цитологические изменения, а результат ПЦР отрицательный, то требуется дальнейший мониторинг, так же как и в случае отрицательного цитологического исследования и положительного ПЦР-теста.
Вопрос: Кристина | 01 Ноября, 2019
Здравствуйте,ребенка 1,6 принимаете?
Вопрос: Айбек | 30 Октября, 2019
Доброго времени суток! У меня количество ДНК гепатита Б(HBV) по методу ПЦР <450копии/мл (10^2 МЕ/мл) Можете расшифровывать, нужна ли мне терапия? Спасибо!
На этот вопрос может ответить только инфекционист. У нас такого специалиста нет.
Ответ: Наталья, Администратор
Источник
Опубликовано: 11 янв 2017 в 23:49
ВПЧ-инфекция — коварная болезнь, которая годами может развиваться в организме и в итоге приводить к тяжелым заболеваниям. Ее возбудителями являются папилломавирусы. Некоторые из них неопасны, другие же, напротив, характеризуются как высокоонкогенные — более склонны провоцировать рак. К таким штаммам можно отнести 16 и 18. Как же подтвердить диагноз “ВПЧ 16, 18 типов”? Следует обратиться к специалистам в данной сфере: урологу или андрологу, акушеру-гинекологу для назначения комплекса исследований.
Определение ВПЧ 16 18: анализы, осмотр пациента
Диагностика папилломавирусных инфекций начинается уже в кабинете врача. Для этого он выясняет жалобы больного, собирает анамнез. Далее проводится объективный осмотр, исследуются гениталии.
Затем гинеколог совершает осмотр шейки матки, используя специальные зеркала. На этом этапе осуществляется забор материала из цервикса для цитологии и мазок на микрофлору. У мужчин мазки берутся из зоны входа в уретру (внешний сфинктер). Следующий этап осмотра у женщин — бимануальное исследование.
Цитологический метод диагностики включает взятие и микроскопию мазков с цервикального канала. Так как папилломавирусы поражают эти структуры, приводя к перерождению клеток шеечного эпителия, значение метода в диагностике разных форм рака и передрака трудно переоценить. Если выявляют патологические клетки в значительном количестве, то ВПЧ 16, 18 типов, вероятно, тоже обнаружатся лабораторно.
Данный способ исследования также называется мазком по Папаниколау, или ПАП-тестом. Чтобы получить достоверные результаты, нужно:
- За сутки до процедуры не спринцеваться.
- За двое суток перед исследованием не иметь половых контактов.
- Не использовать препараты вагинально.
- Запрещено проводить РАР-тест при месячных.
Мазок берется специальной небольшой щеткой с цервикального канала и вокруг отверстия наружного маточного зева. Результаты исследования могут быть такими:
I — нормальный. Патологии в строении эпителия нет.
II — воспалительный. Ставится диагноз эндоцервицита.
III — дисплазия или цервикальная интраэпителиальная неоплазия (ЦИН). Бывает трех степеней тяжести.
IV — есть атипические клетки, их мало — подозрение на рак.
V — много атипических клеток — рак шейки матки.
Если выявлена дисплазия, то результаты анализов на папилломавирусы 16, 18 типов чаще всего тоже положительные.
Далее пациентку отправляют на кольпоскопию. Она дает возможность увидеть эпителий шейки матки при увеличении в несколько десятков раз. Оценивается степень изменений в цилиндрическом слое эпителия, переходной зоне, сосудах. Осуществляется специальным прибором — кольпоскопом.
Показания:
- контроль эффекта после лечения патологии шейки матки;
- если обнаружен вирус папилломы человека 16, 18 или любой другой штамм из группы высокого риска злокачественности.
Кольпоскопия может проводиться несколькими способами:
- Простая.
- Расширенная кольпоскопия – предусматривает воздействие на шейку химическими реагентами и оценку реакции эпителия и сосудов на специальное вещество.
- Кольпомикроскопия – проводится при увеличении в сотни раз с минимального расстояния.
У многих женщин с изменениями кольпоскопической картины обнаруживают папиллому 16, 18 типов. Данное исследование совместно с ПЦР являются важнейшими способами диагностики инфекции и ее последствий.
ПЦР на ВПЧ 16, 18 типов
Самым специфическим методом диагностики является ПЦР-анализ на ДНК ВПЧ 16 типа. Он определяет факт наличия патогенных частиц в организме без их подсчета (качественный метод). Методика позволяет также произвести генотипирование и выяснить степень опасности данного штамма в плане риска онкопатологии.
Часто рекомендуют проводить только анализ на ДНК ВПЧ (HPV) 16 и 18 типов качественного характера, так как эти виды представляют наибольшую угрозу возникновения рака. Однако сейчас разработаны целые пакеты ПЦР анализов, включающие типирования всей высококанцерогенной группы: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 штаммы. Их вариации возможны в зависимости от конкретной лаборатории. Исследование может быть предложено как скрининговое только для женщин, поскольку у мужчин присутсвует высокий процент спонтанной элиминации вируса.
Показания к проведению ПЦР-диагностики:
- скрининг для женщин раз в 3 года;
- наличие кондилом, диспластических процессов шейки матки;
- сомнительные результаты цитологии;
- контроль лечения после цервикальной интраэпителиальной неоплазии через полгода;
- контроль элиминации вирусов;
- у мужчин при наличии ИППП.
ПЦР на ДНК ВПЧ 16, 18: как сдавать?
Забор проводится как минимум спустя 120 минут после мочеиспускания. Материалом для исследования является мазок на ВПЧ 16, 18 и прочие штаммы из шейки матки. У представителей сильного пола собирают материал из наружного отверстия уретры.
Интерпретация:
- отрицательный ВПЧ 16, 18 — не обнаружено генетических данных вирусов, вероятность рака отсутствует;
- результат положительный ВПЧ 16, 18 — выявлено вирусное ДНК, риск канцерогенеза может быть велик, рекомендуется назначить количественный метод диагностики.
Количественный анализ ВПЧ 16 и 18 типов
Такой анализ на ВПЧ 16, 18 называют Digene-тест, суть которого заключается в определении числа вирусных копий. От концентрации патогенного организма зависит вероятность развития опухолевых процессов.
Подготовка:
- не мочится на протяжении 2 часов до процедуры;
- накануне запрещается вводить любые вагинальные препараты.
Показания к проведению Digene-исследования:
- цервикальная интраэпителиальная неоплазия;
- в случае положительного качественного анализа;
- контроль выведения вируса из организма;
- контроль эффективности проведенной терапии.
Расшифровка количественного анализа на ВПЧ 16, 18 типов
При проведении Digene-теста можно получить различные ответы. Варианты результатов анализа могут быть такими:
- ДНК возбудителя не найдено — это норма количественного анализа ВПЧ 16 или 18 типа.
- ДНК выявлено. Количество геномов ˃0, но меньше 3Lg свидетельствует о слабоположительном результате, но данное значение считается низким для инициации канцерогенеза.
- ДНК выявлено в количестве от 3 до 5Lg. Это уже значимая клиническая нагрузка ВПЧ 16 и 18 видов. Результат считается положительным. Риск онкогенеза высокий.
- Более 5Lg вирусных копий свидетельствует о достаточно высокой вероятности формирования онкопроцесса.
При положительном результате ПЦР на ВПЧ 16 типа у женщины ˃30 лет ей рекомендована кольпоскопия, по показаниям проводится биопсия (изъятие кусочка тканевых структур) шейки матки.
Когда у пациенток имеется положительный результат ПЦР на ВПЧ 16, 18, ее возраст менее 30 лет и цитология нормальная, то ей рекомендуется еще раз повторить исследование спустя 12 месяцев. Объясняется это тем, что часто возможно и самоизлечение от папилломавируса, особенно у молодых лиц.
Если анализ ПЦР на ВПЧ 16 в норме, то женщине нужно повторять его желательно каждые 3 года. Подобный подход позволяет выявить инфекцию на ранних этапах.
Следует заметить, если обнаружен ВПЧ 16 типа, это не обязательно свидетельствует об инфицировании. Иногда возможно загрязнение материала для исследования при неправильной транспортировке. Также бывают и ложноотрицательные анализы. Чтобы исключить ошибку, врачи рекомендуют повторять исследования на выявление возбудителя 2-3 раза подряд через определенные периоды.
Помочь диагностировать папилломавирусную персистирующую инфекцию способен опытный специалист с помощью комплексного обследования пациента. Ценным критерием для постановки диагноза считается методика ПЦР. В случае положительного ответа он дополняется иными, не менее важными, исследованиями.
Интересные материалы по этой теме!
ВПЧ 31 типа: что это?
При попадании болезнетворных агентов в организм человека иммунная система запускает защитные механизмы,…
Опасны ли папилломы на ножке?
Если на теле по какой-либо причине появились наросты, нужно срочно записаться на прием к дерматологу. Такие новообразования могут быть доброкачественными или злокачественными. Также обратиться…
Насколько опасен папилломавирус 1 2 3 4 5 типов?
Папилломатоз – это вирусное заболевание, которое имеет ярко выраженные наружные симптомы в виде разрастания эпителия. Эти патологические новообразования доброкачественные, но некоторые типы вызывают…
Рекомендации к прочтению Вам лично!
загрузка…
загрузка…
загрузка…
загрузка…
Оставить отзыв или комментарий
загрузка…
загрузка…
загрузка…
Источник
