Количественный впч тест с определением генотипов высокого риска
Скрининговый тест, использующийся в целях диагностики предраковых состояний и рака шейки матки.
Существует более 100 генотипов вируса папилломы человека. Инфицирование этим вирусом – достаточно распространённое явление. Передаётся инфекция обычно половым путём, в редких случаях возможна вертикальная передача вируса от матери к ребёнку во время родов.
Инфицирование вирусом папилломы может не иметь клинических проявлений, часто наблюдается естественное очищение организма от вируса, особенно в молодом возрасте. Но персистенция вируса в эпителии шейки матки в течение длительного времени может вызывать его патологические изменения.
Рак шейки матки – один из немногих видов злокачественных новообразований, для которых установлена основная причина возникновения заболевания. Многочисленными исследованиями показано, что ДНК вируса папилломы человека обнаруживается практически при всех случаях предраковых состояний и при раке шейки матки. Инфицирование вирусом папилломы предшествует последующей сквамозной (чешуйчатой) интраэпителиальной дисплазии шейки матки. Третья стадия интраэпителиального новообразования шейки матки возникает только при наличии персистирующей инфекции генотипами папилломавируса высокого онкогенного риска. Доказано, что длительная персистенция (5 – 10 лет) папилломавируса генотипов высокого онкогенного риска у женщин старше 30 лет связана со значительным ростом риска развития злокачественных изменений шейки матки. Инфицирование вирусом папилломы генотипов низкого онкогенного риска может клинически проявляться в виде появления остроконечных кондилом.
Digene HPV тест – защищённая международным патентным законодательством молекулярная технология фирмы Digene, направленная на выявление специфических фрагментов ДНК вируса папилломы человека (метод «гибридного захвата»).
Digene HPV тест дает возможность дифференцировать между 2 группами генотипов вируса – высокого и низкого онкориска. В тесте № 394 выявляется наличие ДНК HPV группы генотипов высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68). В тесте № 395 выявляется наличие ДНК HPV группы генотипов низкого риска (6/11/42/43/44).
Digene HPV тест получил широкое распространение благодаря своей надежности и простоте применения. Чувствительность теста в комбинации с цитологическим исследованием (PAP-тест, в лаборатории ИНВИТРО тест № 517) в обнаружении предраковых изменений шейки матки и рака шейки матки намного выше, чем проведение только цитологического исследования. Считается целесообразным проведение Digene HPV теста при неопределённых результатах PAP-теста. В настоящее время комбинация Digene HPV теста и цитологического PAP-теста становится «золотым стандартом» в этой области диагностики и предлагается для скринингового обследования женщин старше 30 лет. Метод стандартизован. Это единственный тест выявления HPV высокого онкогенного риска, одобренный FDA (Федеральное Управление США по контролю за пищевыми продуктами и лекарствами). Тест получил одобрение ФСНСЗСР (Федеральная служба РФ по надзору в сфере здравоохранения и социального развития).
Digene-тест выявляет клинически значимый уровень инфицирования вирусом папилломы человека, приводящий к развитию неоплазии шейки матки (в отличие от обычных ПЦР-методов, направленных на максимальную чувствительность выявления вирусной ДНК, что не всегда имеет прямые клинические корреляции). Положительный Digene HPV тест у женщин моложе 30 лет служит показанием к повторному тестированию через 9 месяцев, поскольку у молодых женщин инфекция ВПЧ может носить транзиторный характер.
Положительный Digene HPV тест у женщин старше 30 лет может свидетельствовать о персистенции вируса. При соответствующем результате цитологического исследования это означает, что женщина имеет высокий риск развития онкопатологии шейки матки и ей требуется специальная профилактика или лечение. Современные методы лечения позволяют в случае раннего выявления резко снизить заболеваемость раком шейки матки и особенно его инкурабельных случаев. Тестирование на присутствие вируса после проведённого лечения позволяет убедиться в его эффективности.
Вирус папилломы человека: вопросы и ответы
Что такое папилломавирусная инфекция?
Папилломавирусная инфекция – группа вирусных инфекционных заболеваний, характеризующихся развитием папилломатозных (бородавчатых) образований на коже и слизистых оболочках, хроническим рецидивирующим течением, широким распространением, высокой контагиозностью, т.е. способностью легко передаваться от человека к человеку.
Проявления папилломавирусной инфекции (ПВИ, ВПЧ) медикам известны давно. Они описаны еще врачами Древней Греции под названием «кондиломы». Гиппократ называл их также «половыми бородавками».
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – это достаточно распространенный вирус, который может вызвать серьезные заболевания вплоть до возникновения онкологических заболеваний.
По эпидемиологическим оценкам в мире инфицировано 10-13% населения или приблизительно 630 млн. человек. При проведении массовых скрининговых исследований ВПЧ обнаруживается у 40-50% сексуально активных мужчин и женщин, но у большинства из них, особенно в молодом возрасте, может исчезнуть без какого- либо лечения.
Как можно заразиться вирусом папилломы человека?
ВПЧ поражает всех – мужчин и женщин – и передается при половых контактах, а также при любых прямых контактах с кожей заражённого человека, однако очень редко метастазирует в отдельные органы и ткани человека.
Не случайно вирус папилломы человека – наиболее сексуально трансмиссивная инфекция. По данным некоторых исследователей, вероятность заражения ВПЧ при половом контакте составляет до 60-70%, частота инфицирования вирусом прямо пропорциональна числу половых партнёров: при наличии одного партнера ВПЧ выявляется у 17-20% женщин, при наличии 5 и более партнёров – у 70-80%.
Клинические формы папилломавирусной инфекции обнаруживают у 40-60% мужчин, являющихся половыми партнёрами инфицированных женщин. Поражения у них вызываются теми же типами ВПЧ, что и у женщин, а примерно в 2/3 случаев возникают характерные высыпания на коже и слизистых оболочках половых органов.
Несмотря на то, что вирус папилломы человека обнаружен в амниотической жидкости, риск заражения плода от матери оценивается как низкий и составляет – до 3%.
К каким заболеваниям может привести наличие у человека вируса папилломы?
На сегодняшний день известно более 300 различных типов вируса папилломы человека. Среди них различают типы ВПЧ высокого, среднего и низкого онкогенного риска. При этом человек может быть инфицирован как одним, так и несколькими типами вируса одновременно.
Различные типы ВПЧ вызывают или принимают участие в развитии:
цервикальной, вульвальной, влагалищной дисплазии шейки матки;
преинвазивного и инвазивного рака шейки матки, рака влагалища и перианальной области;
остроконечных кондилом половых органов, мочевых путей;
генитальных кондилом.
Согласно данным эпидемиологических исследований, частота ПВИ гениталий значительно варьирует в различных этнических и географических регионах. Распространённость вируса папилломы обусловлена многочисленными факторами, а также во многом определяется социально-экономическими, поведенческими и медико-гигиеническими условиями. Так, например, минимальная частота инфицирования ВПЧ (5%) наблюдается в Испании. Эта страна принадлежит к странам с «низким» риском заболевания раком шейки матки. Традиционно «высоким» риском инфицирования ВПЧ считаются страны – Аргентина, Мексика, Бразилия, Марокко. С другой стороны, в США и Канаде, несмотря на высокий социально- экономический уровень, частота выявления ВПЧ составляет от 22 до 26%.
Несмотря на очевидную медико-социальную значимость проблемы, системные исследования по оценке распространенности ПВИ в Российской Федерации практически не проводились. В настоящее время выполняются отдельные, нескоординированные исследования, согласно которым невозможно объективно оценить состояние проблемы в целом и осуществить даже приближённое прогнозирование эпидемиологической ситуации распространенности ВПЧ среди населения.
Как развивается и проявляется папилломавирусная инфекция?
Вирус папилломы человека обитает в коже и слизистых оболочках половых органов. Как показывают медицинские и лабораторные исследования, количество вируса зависит от состояния иммунитета кожи и слизистых – чем выше активность иммунной системы, тем меньшее количество вируса содержится в них. Для того, чтобы вирус мог проявить себя какими-либо симптомами, должно накопиться определенное его количество. А это возможно только при условии снижения иммунитета: после перенесённых инфекций, во время (после) приёма антибиотиков, при беременности, во время сильных стрессов и т. д. Накопившись в достаточной мере на участке кожи или слизистой, вирус папилломы изменяет функцию эпителиальных клеток. В результате они начинают бесконтрольно делиться, что приводит к разрастанию участка кожи и появлению разного рода образований – папиллом и кондилом.
В зависимости от проявлений ПВИ на гениталиях выделяют клиническую, субклиническую и латентную формы.
Клиническая форма инфекции – это в основном генитальные бородавки в виде остроконечных (экзофитных) образований. В редких случаях кондиломы наружных половых органов быстро разрастаются, превращаясь в полузлокачественное гигантское образование – опухоль Бушке – Левеншштейна, с экзо- и эндофитным ростом и способностью к проникновению в соседние ткани.
Субклиническая форма ПВИ проявляется в виде плоских кондилом. Они чаще локализуются на шейке матки, реже во влагалище, и в большинстве случаев не заметны при осмотре.
Латентная форма ПВИ не сопровождается морфологическими изменениями в инфицированной ткани, а ДНК вируса часто определяют, где нет заметных клинических признаков инфекции.
Как диагностировать наличие вируса папилломы человека?
Доказательством наличия вируса папилломы служат:
проявления инфекции ВПЧ;
результаты цитологического исследования (изучения характера клеток под микроскопом), свидетельствующего о дисплазии шейки матки;
выявление ВПЧ методом ПЦР;
выявление в крови антител к ВПЧ (используется только в научных целях).
В лабораторной практике для диагностики ВПЧ используются две методики: ПЦР и гибридизационный анализ (Дайджин – тест). В Независимой лаборатории ИНВИТРО для диагностики вируса папилломы человека используют оба метода.
Наиболее распространенным, доступным и достаточно чувствительным является метод ПЦР. Он позволяет диагностировать субклиническую и латентную формы инфекции и обнаружить от 10 до 100 копий генома ВПЧ и идентифицировать, по крайней мере, 43 различных типа.
Несмотря на высокую чувствительность ПЦР, при бессимптомной инфекции ВПЧ выявить вирус удается далеко не всегда. Это связано с особенностями этой инфекции:
инфекция ВПЧ может неопределенное время находиться в латентном (спящем) состоянии. При этом вирус находится в глубине кожи и слизистых, но на поверхность не выделяется. В таком состоянии его сложно выявить методом ПЦР.
инфекция ВПЧ в большинстве случаев поражает обширные участки кожи. При отсутствии симптомов не совсем ясно, исследование какого участка кожи будет более достоверным.
Дайджин – тест – позволяет выявлять не только 13 типов вируса высокоонкогенного риска и 5 типов низкого онкогенного риска ВПЧ, но и определять клинически значимую концентрацию вируса в ткани. Это помогает выработать дальнейшую тактику врача при ведении пациента. Чувствительность теста в сочетании с цитологическим исследованием в обнаружении дисплазий и рака шейки матки намного выше, чем проведение только цитологического анализа.
При цитологическом исследовании, которое также можно провести в Независимой лаборатории ИНВИТРО, часто используется окрашивание мазков по Папаниколау (PAP – тест).
В настоящее время комбинация Дайджин – теста и PAP –теста является «золотым стандартом» в области диагностики патологии шейки матки и предлагается для скринингового обследования женщин старше 30 лет. Положительный тест у женщин моложе 30 лет служит показанием к повторному тестированию через 9 месяцев, поскольку у молодых инфекция может носить транзиторный характер.
Положительный Дайджин – тест у женщин, старше 30 лет может свидетельствовать о персистенции вируса. При соответствующем результате цитологического исследования это означает, что имеется высокий риск развития онкопатологии шейки матки и это требует специальной профилактики и лечения.
Следует помнить, что диагностика ВПЧ инфекции – является одним из важных методов профилактики рака шейки матки и играет значительную роль в успешном лечении данного заболевания.
Однако выявление папилломавирусных инфекций требует современной технологической базы и высококачественных исследований. Именно это может предложить своим клиентам Независимая лаборатория ИНВИТРО.
Источник
Метод исследования: ПЦР
Данный тест показан только для женщин
Исследование позволяет определить тип ВПЧ высокого онкогенного риска и концентрацию. К группе ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 генотипы. Наиболее канцерогенными считаются 16 и 18 типы, наименее – 51, 56, 68. Более 80% инфицированных ВПЧ спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Типы ВПЧ ВКР наряду с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени, также способствуют злокачественной трансформации эпителия шейки матки, приводящей к инвазивному раку.
ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:
- Скрининговые программы с цитологическим исследованием для женщин старше 30 лет
- Обследование при неопределенных и сомнительных результатах цитологических исследований
- Проведение дифференциальной диагностики с заболеваниями непапилломавирусной этиологии
- Контроль эффективности терапии тяжелой дисплазии шейки матки (CIN2+) через 6 месяцев после удаления пораженного эпителия
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Референсные значения (вариант нормы):
Пример результата исследования – ОБНАРУЖЕНО
| Параметр | Результат | Референсные значения | Ед.Изм. |
|---|---|---|---|
| Количество клеток в образце (параметр используется для клининической интерпретации) | более 500 | Более 500 | |
| ВПЧ-тест расширенный | Готов | . | |
| ДНК ВПЧ высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 типы) | ОБНАРУЖЕНО | Не обнаружено | |
| ДНК ВПЧ группы A9 (16, 31, 33, 35, 52, 58 типы) | 5,0 | <3.0 (количество малозначимое) | lg ДНК на 10^5 клеток |
| ДНК ВПЧ группы A7 (18, 39, 45, 59, 68 типы) | 0,0 | <3.0 (количество малозначимое) | lg ДНК на 10^5 клеток |
| ДНК ВПЧ группы A5/A6 (51, 56 типы) | 0,0 | <3.0 (количество малозначимое) | lg ДНК на 10^5 клеток |
| ДНК ВПЧ 16 типа | 5,2 | <3.0 (количество малозначимое) | lg ДНК на 10^5 клеток |
| ДНК ВПЧ 18 типа | 0,0 | <3.0 (количество малозначимое) | lg ДНК на 10^5 клеток |
Пример результата исследования – Не обнаружено
| Параметр | Результат | Референсные значения | Ед.Изм. |
|---|---|---|---|
| Количество клеток в образце (параметр используется для клининической интерпретации) | более 500 | Более 500 | |
| ВПЧ-тест расширенный | Готов | ||
| ДНК ВПЧ высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 типы) | Не обнаружено | Не обнаружено |
Выявление ДНК ВПЧ свидетельствует о наличии возбудителя. При интерпретации результатов следует учитывать, что более 80% инфицированных спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Опасность представляет сохраняющаяся более 12–24 мес. инфекция.
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
Расшифровка анализа ВПЧ – это составляющая часть диагностического исследования. На основе полученных данных врач принимает решение о необходимой терапевтической тактике. Правильно проведенный анализ, достоверно расшифрованные результаты позволяют подобрать правильное лечение.
Методы диагностики ВПЧ
Вирус папилломы человека – инфекционное заболевание, которое невозможно вылечить полностью. Некоторые люди сталкиваются с регулярными проявлениями инфекции, что негативно сказывается на состоянии здоровья и качестве жизни. Таким пациентам рекомендуется проходить периодическое обследование для обнаружения типа ВПЧ, характера его выраженности и онкогенной степени.
Современная медицина использует несколько методов диагностики для количественного контроля папилломавируса:
- Иммуноферментный анализ (ИФА). Исследование наличия антител в организме. Антитела – специфические белки, которые вырабатываются как ответ иммунитета на активность возбудителя. Иммуноглобулины уникальны для каждой конкретной инфекции.
- Digene-тест (метод гибридного захвата Hibrit Capture) предназначен для определения 18 наиболее опасных типов ВПЧ. Суть метода заключается в окрашивании биоптата специальными флуоресцентными веществами. При обнаружении вируса в исследуемых материалах происходит подсвечивание.
- ПЦР — один из наиболее информативных методов диагностики ВПЧ. Анализ основан на искусственном увеличении экземпляров ДНК возбудителя. Удается определить даже единичные вирусы, с наиболее высокой точностью.
После проведения лабораторного исследования специалисты приступают к расшифровке полученных результатов.
Таблица расшифровки результатов
Проводя анализ ВПЧ, расшифровка результатов сводится в таблицу, что включает сведения о количественных и качественных показателях.
Данная таблица раскрывает общие сведения о возможных показателях на основе ПЦР анализа.
| Предполагаемый результат | Вирусная нагрузка ВПЧ | Расшифровка показателей. |
| Отрицательная реакция. Клинически малозначимая. | меньше 3 Lg | Вирус в организме не обнаружен. Относится к норме показателей. |
| Сомнительные сведения. Клинически показатели значимые. | 3 — 5 Lg | Концентрация вируса находится на предельных значениях (немного превышает границу нормы). Требуются дополнительные исследования, в том числе скрининг. |
| Положительный | больше 5 Lg | Вирусная концентрация находится на высоком уровне. |
В лабораторном листе указывают все типы ВПЧ, на наличие которых производилось исследование. В большинстве случаев это 12 типов – 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 средней и высокой онкогенной степени.
Отметка «отсутствие ДНК» и показатель вирусной нагрузки менее 3 Lg указывает на полное отсутствие вируса либо его незначительное количество. Лечения не требуется. Инфекция может присутствовать в организме человека, но не производит какого-либо влияния. Наросты не наблюдаются.
Концентрация 3–5 говорит о наличии вируса в небольшом количестве. Женщинам, в чьем организме обнаружили папилломавирус, необходимо пройти дополнительное обследование с целью исключения наличия дисплазии шейки матки. Пациентам проводят общее иммуноукрепляющее лечение. При наличии кондилом производится удаление.
Положительный результат теста при концентрации выше 5, говорит об опасности для человека. Организм поражен вирусом. Повышена вероятность развития дисплазии шейки матки у женщин. Проводятся дополнительные анализы. Лечение заключается в удалении наростов, масштабной противовирусной и иммуностимулирующей терапии. Возможно, понадобится консультация онколога.
Что значит результат
Во время проведения исследований учитывается качественный и количественный анализ. Первый может показывать присутствие или отсутствие вируса. Второй – о концентрации патогенного возбудителя в организме человека. Расшифровать полученные сведения может только опытный специалист, учитывая все сопутствующие обстоятельства. Не нужно воспринимать положительный результат теста как приговор. Часто во время исследований допускаются погрешности, которые влияют на показатели, не дают возможности определять верные данные. В большинстве случаев ошибки допускаются пациентами во время подготовки к предстоящему анализу. Нужно учитывать референтные значения.
Ложноположительный ВПЧ
Ложноположительные результаты проведения анализов на HPV — распространенное явление. Происходит подобное, если:
- био образец был загрязнен;
- был неправильно проведенный забор материалов;
- перед проведением анализа пациент проходил лечение;
- человек не соблюдал нормы подготовки к диагностики.
Чтобы не получить искаженные результаты необходимо учесть некоторые правила. В течение 12 часов перед сдачей биологического материала запрещается принимать противовирусные, антибактериальные и противомикробные препараты. В день взятия мазка следует принять душ. На протяжении 2-3 предстоящих дней лучше отказаться от половых контактов. Мазок на исследование не сдают при месячных. Часто люди сталкиваются с ложными результатами анализов, если накануне пытались лечить инфекцию противовирусными препаратами. Сам вирус нейтрализуется, но в организме остаются антитела.
Референтность значения
Референтные значения показателя (другое название — референсные) подразумевают общие значения, полученные в ходе исследований лаборатории, на конкретной категории населения. Это могут быть молодые люди в возрасте от 20-30 лет, женщины при беременности, рожавшие, нерожавшие и т.п. Такие показатели необходимы для получения среднего суммарного показателя относительной нормы.
Так определяется количественный анализ на ВПЧ. Среднее значение 3-5 Lg, которое подразумевает сомнительный результат, собрано по оценке определенной категории носителей папиллома вируса. Следовательно, референтные значения нельзя оценивать как единственно верный показатель. Понятие нормы может отличаться в зависимости от особенностей организма, возраста, наличия сопутствующих заболеваний.
В большинстве случаев значение имеет только качественный итог исследования, который оповещает о наличии вируса. В случаях обнаружения неонкогенного типа ВПЧ, его концентрация несущественна.
Если анализ положительный
Положительный анализ ВПЧ говорит о присутствии вируса в организме. Переживать не стоит, по данным статистики 7 людей из 10 являются носителями вируса папилломы. Большинство людей может прожить жизнь, не предполагая, что заражены ВПЧ. Активация симптомов болезни происходит в период ослабления иммунитета.
В зависимости от выявленного типа возбудителя и общей картины заболевания, врач подбирает тактику лечения. В большинстве случаев оно включает противовирусную и иммуностимулирующую терапию, методы деструкции новообразований.
При 56, 16, 31, 18 и другие онкоопасные штаммы
Обнаружение канцерогенных штаммов вируса папилломы требует немедленного лечения, направленного на восстановление иммунной защиты организма и устранения образований. Типы ВПЧ высокой онкогенности особенно опасны для женщин, как вызывающие развитие рака шейки матки. Пациентке необходимо пройти дополнительное исследование на наличие эрозии или дисплазии. Гистологическое исследование тканей поможет выявлять злокачественные изменения в клетках.
Обнаружение подобных штаммов в организме не будет означать наличие рака. Людям с подобным диагнозом необходимо быть внимательным к собственному здоровью. Регулярно обследоваться, сдавать анализы.
Встречаются случаи, когда происходит самоизлечение от вируса. Наибольшая вероятность исцелится у молодых людей с сильной иммунной защитой.
Своевременное удаление кондилом поможет предотвратить риск развития опасных последствий. Все, что нужно делать пациентам с выявленными штаммами, это следовать рекомендациям доктора, лечиться, следить за состоянием иммунитета, посещать плановые осмотры, стараться не заражать окружающих.
При доброкачественных штаммах
Доброкачественные штаммы ВПЧ не опасны для человека. Все с чем столкнется пациент – появление на теле неприятных образований. В зависимости от количественного показателя вируса в организме, врач порекомендует лекарственную терапию.
Чаще здоровым молодым людям с незначительным количеством бородавок на теле назначается удаление. Сильный иммунитет в состоянии справиться с инфекцией, и вспомогательные средства не требуются. Удаление можно произвести при помощи аптечных препаратов либо обратиться в клинику и пройти аппаратную процедуру.
Если наросты возникают часто или диагностирован папилломатоз, требуется противовирусное лечение. Оно включает прием препаратов, подавляющих активность инфекции и способность к размножению. Имунностимулирующие средства, помогают иммунной системе подавить вирус.
Случается, что анализ на ВПЧ положительный, но бородавок на теле нет. Это говорит о носительстве, но отсутствии инфекционной активности. Отрицательный анализ может выявиться и при наличии папиллом на теле. Бывает, когда иммунитет в состоянии самостоятельно снижать активность инфекции. В таком случае концентрация вируса в крови постоянно меняется и может быть низкой в момент проведения исследования.
Независимо от того, какой тип ВПЧ обнаружен, все необходимые действия пациенту необходимо обговорить с врачом. Самостоятельное лечение может привести к развитию болезни и увеличить риск нежелательных последствий.
Расшифровка анализа на ВПЧ – информативная и важная процедура, от которой зависит последующие действия в плане терапии. Не следует пытаться расшифровывать значения самостоятельно или при поддержке людей с отсутствием необходимой квалификации. Правильно объяснить данные обследования могут исключительно опытные специалисты, которые будут основываться на цифрах, особенностях организма конкретного пациента.
Источник
