Впч на пцр генотипирование

впч на пцр генотипирование

Автор статьи

Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.

Общие сведения

анализ пцр на впчАнализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.

Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:  

  • наличие ВПЧ;
  • штаммы, которыми инфицирован больной;
  • количественное содержание вируса в организме.

Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.

Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.штаммы вируса папилломы человека

Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.

Показания для анализа

Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. папилломы у мужчин и женщин ВПЧ распространяется следующими путями:

  • при незащищенных половых контактах;
  • при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
  • контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
  • во время тесного контакта с кожей больного.

Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.  фото: впч высокого онкогенного риска у женщин

Преимущества метода

ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:

  1. Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
  2. Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
  3. Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
  4. Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.

Недостатки метода

Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.

Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.

Читайте также:  К онкологии чего приводит впч

Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:

  • собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
  • нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
  • реагенты были непригодными.

Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие. 

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.   

Как сдавать анализ

Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.

Как сдают анализ мужчины

взятие мазка у мужчинГоловка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения. 

Как сдают анализ женщины

взятие мазка у женщины

Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику. 

Забор биоматериала

Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.

Расшифровка анализа ПЦР

фото: данные пцр исследования

В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.

Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:

  • Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
  • Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
  • Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
Читайте также:  Впч на шее лечение

В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.

Источник

Вирус папилломы человека – ВПЧ – это особый вирус, который может быть неактивен, а может проявляться в виде наростов (бородавок, папилломы) на коже в любом месте, в том числе и на органах.

genotipirovanie-VPCH

ВПЧ: описание заболевания

Нет определенного характера наростов, все 120 типов ВПЧ проявляются в разных видах. Это и кондиломы, и папилломы на широкой ножке, и небольшие наросты, размерами с ушко иголки. Каждый тип отличается размерами, местом появления, формой, цветом и степенью опасности для человека.

Самым распространенным считается появление бородавок. Локализаций – руки и лицо чаще всего. Бородавки не перерождаются в рак и никак не опасны для своего носителя. Единственный их минус – неэстетичный вид, часто травмируются из-за тонкой оболочки. Наиболее восприимчивы к проявлению ВПЧ те люди, чей иммунитет не оказывает должной защиты.

Самыми опасными проявлениями признаны генитальные бородавки, которые появляются только на слизистых половых органов. Это плоские или чуть заостренные новообразования, которые в большинстве случаев постепенно перерастают в рак.

Заражение происходит половым путем в 100 случаев из 100. На перерождение папилломы в раковые образования медики отводят от 5 до 25 лет, в зависимости от уровня.

Причины возникновения

Если на теле появляются папилломы, значит, где-то в организме есть «поломка» и сил иммунитета недостаточно. Обычно папилломавирусу предшествует какое-либо заболевание вирусное или бактериальное.

Не последнюю роль играет и зашлакованность организма. Здесь и неправильное питание, и вредные привычки, и применение лекарств, и множество убитых клеток после болезни.

  1. Основная причина – падение иммунитета.
  2. С возрастом противостояние организма снижается, и возникновение папилломы может быть частым.
  3. Стрессы – далеко не последнее, что может вызывать активизацию вируса папилломы человека. Серозные эмоциональные переживания способны отравить абсолютно здоровый организм в считаные дни.
  4. Беременность и подростковый период – время, когда организм может вытворить что угодно из-за бурных скачков гормонов. В любом случае, эти изменения чаще всего проходят после рождения ребенка в первом случае, и после урегулирования гормонального уровня во втором. Если папилломы не исчезли, следует срочно обратиться к дерматологу или инфекционисту.
  5. Вирус папилломы прекрасно передаются между людьми при половых связях. Вирус длительное время живет и на открытом воздухе. Чужое белье или полотенце может наградить каждого ВПЧ. Во время родов ребенок проходит через родовые пути и обзаводится своим первым вирусом.

genotipirovanie-VPCH1

Симптоматика

Благодаря иммунитету, вирус длительное время не может перейти к наступлению и просто задерживается в спящем режиме в организме. Большинство носителей папилломавирусной болезни так никогда и не узнают о том, что организм заражен.

Некоторые познакомятся с наростами несколько раз в жизни, но есть и те, кто не только будет постоянно лечить новые образования, но и столкнется с раковыми осложнениями.

Типы новообразований

Благодаря современной медицине, типы ВПЧ хорошо изучены и представлены широкой массе. На сегодняшний день выявлено 120 видов этого заболевания.

Большинство не несут ничего, кроме вероятности пробуждения вируса и появления достаточно неприятных образований на коже. Но есть и те, которые действительно опасны и перерождаются в опухоли. Условно принято делить типы заболевания на подгруппы:

  • с высоким риском образования злокачественных опухолей, в том числе и рак;
  • средний риск образования злокачественных опухолей, в том числе и рак;
  • низкая степень риска;
  • неопасные для человека.

Klassifikatsiya-VPCH

Генотипирование папилломавирусов: что это такое?

Благодаря генотипированию ВПЧ делается прогноз будущего заболевания, изучение типа, выявление их количества в организме. Если вирусов несколько, обычно говорят о неблагоприятном прогнозе течения болезни. После проведения всех основных тестов и выявления онкогенного генотипа (или генотипов), назначаются дополнительный исследования.

Если все подтверждается, можно применять достаточно радикальные методы лечения. Именно ВПЧ генотипирование этого вируса позволяет вовремя исключить даже минимальную вероятность рецидива и, как следствие, летального исхода.

Как определить тип ВПЧ?

После обращения к специалисту, начинается подтверждение диагноза, а затем его типирование. Процедуры включают в себя:

  • осмотр очагов, внешняя принадлежность к типам папилломы;
  • кольпоскопия для женщин, перед этим обязательно должно быть проведено взятие мазка;
  • методы диагностики на молекулярно-биологическом уровне;
  • обследование цитологического направления;
  • гистологические обследования после взятия биопсии;
  • общие анализы крови, мочи, секреции.

projdet-samo-ili-lechit

Сама диагностика ВПЧ обычно не вызывает сложностей так, как образования могут выявляться или самостоятельно, или на осмотре врача. Чтобы убедиться в вирусной основе новообразований на теле и органах, назначается мазки и соскобы на ПЦР.

Читайте также:  Количественная нагрузка на впч

После этого уже производится процедура генотипирований обнаруженного вируса папилломы человека: биопсия, тестирования на онкогенность. После, в зависимости от того, какой генотип обнаружен, назначается удаление образований и лечение. При устойчивом иммунодефиците (СПИД) обычно диагностика затруднена, а лечение часто не дает положительного эффекта.

Особенности каждого типа вируса

Условно принято делить типы заболевания HPW (он же ВПЧ, но в анализах прописывается именно HPW) на подгруппы по онкогенности – то есть вероятности трансформации пораженного участка в злокачественную опухоль:

  • HPW с высоким риском образования злокачественных опухолей, в том числе и рак (16, 18, 31, 33, 39, 45, 50, 56, 59, 61–62, 64, 66, 68, 70, 73 типы), жирным выделены наиболее опасные;
  • HPW, имеющие средний риск образования злокачественных опухолей, в том числе и рак (26, 30, 35, 52, 53, 58,65);
  • HPW, имеющие низкий риск перерастания в злокачественную опухоль, в том числе и рак (6, 11, 13, 32, 34, 40, 41, 42, 43, 44, 51, 72);
  • HPW неопасные для человека все остальные виды (1, 2, 3, 4, 5, 100–120 и прочие).

rznovidnost-VPCH

Максимально опасны штамм № 16 и штамм № 18. Каждый человеческий вирус папилломы может выглядеть по-разному. Бывают бородавки, вытянутые папилломы, совсем маленькие образования, широкие бляшки, плотные и мягкие наросты.

Способы диагностики

Определение факта наличия вируса человек может получить или самостоятельно (просто заметив на теле наросты), или на приеме у врача. Это может быть и терапевт, и гинеколог, и проктолог, и уролог, и дерматолог. Соответственно, типирование обнаруженного заболевания может быть совершенно разным.

  1. Исследование кольпоскопом. Благодаря кольпоскопии можно достаточно хорошо рассмотреть слизистую внутренних половых органов. Увеличение размера картинки позволит заметить даже небольшие наросты, если они есть.
  2. Цитологический метод исследования. Взятый мазок из пораженного участка исследуется при помощи микроскопа. Результаты трактуются по группе. 1 и 2 группа ставится, если не было обнаружено развития злокачественных клеток. 3 класс означает, что результат под сомнением и нужно дополнительное гистологическое исследование. 4 или 5 группа – при обнаружении злокачественных клеток.
  3. Гистологический метод исследования. Это исследование под микроскопом, но уже не мазка, а частички новообразования. Позволяет воочию убедиться есть ли в клетках папилломы злокачественные изменения.
  4. Неамплификационный тест ПЦР. Самый распространенный анализ, позволяющий выявить ВПЧ из крови, мазка влагалища и уретры, носа, горла, околоплодных вод. Если рак уже образовался, ПЦР всегда положительный.
  5. Амплификационный digene test. Точное исследование, которое показывает не только наличие и тип вируса, но и его онкогенность, степень пораженности. Обнаружить злокачественные изменения с помощью этого теста можно даже на самых ранних стадиях. Материалом для исследования становится соскоб по слизистым влагалища, уретры.

Выполнять любые тесты должен только высококлассный специалист. Так как неправильная технология может дать ложный результат.

Особенности обследования у женщин

При исследовании, женщина сдает соскоб из шейки матки. Этот вариант наиболее предпочтительный и дает намного более полную информацию, нежели соскобы из влагалища или уретры. Для того, чтобы взять соскоб в этом месте, используют специальную щеточку.

Она помещается в цервикальный канал женщины, собирая своими щетинками необходимый для исследования материал. Затем инструментом делаются отпечатки и отправляются на исследование. Щеточку часто заменяют на универсальный зонд. Анализ не доставляет женщине никаких болевых ощущений. Не проводится во время критических дней.

Принципы лечения ВПЧ

Вылечить ВПЧ на 100% невозможно. Это важно понимать, так как это заболевание в неактивной форме всегда присутствует в организме зараженного человека. И он вновь проявится, даже если удалить хирургическим путем все папилломы до последней. Принцип качественно лечения – помочь организму снизить количественный размер активных ДНК вируса. Для этого:

  • удаляются наросты (лазер, хирургический метод и прочие);
  • применение противовирусных средств;
  • работа по укреплению иммунной системы (общая и медикаментозная).

впч на пцр генотипирование

Самолечение не даст настолько положительного эффекта, как медицинское вмешательство. Порой человек может даже усугубить течение своей болезни, прижигая раковые папилломы настойками, чистотелом, чесноком и т. д.

Цена на анализы

Цены по России могут достаточно сильно отличаться. Клиника Инвитро в г. Москва предлагает следующие анализы:

  • определение онкогенных типов ВПЧ и соскоб в уретре – 575–1050 рублей;
  • digene test – 6430 рублей;
  • определение низко онкогенных типов ВПЧ и соскоб в уретре – 585 рублей;
  • скрининг 14 типов онкогенного ВПЧ – 885 рублей;
  • кольпоскопия – 1300 рублей;
  • гистологическое исследование – 2060 рублей;
  • ПЦР – 2940 рублей;
  • цитологическое исследование мазка или соскоба – 745–1270 рублей.

Источник