Вирус папилломы скрининг пцр

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.

Общие сведения

Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.

Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:  

• наличие ВПЧ;
• штаммы, которыми инфицирован больной;
• количественное содержание вируса в организме.

Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.

Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.

Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.

Показания для анализа

Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом.  ВПЧ распространяется следующими путями:

• при незащищенных половых контактах;
• при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
• контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
• во время тесного контакта с кожей больного.

Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.  

Преимущества метода

ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:

1. Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
2. Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
3. Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
4. Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.

Недостатки метода

Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.

Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.

Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:

• собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
• нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
• реагенты были непригодными.

Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие. 

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.   

Как сдавать анализ

Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.

Как сдают анализ мужчины

Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения. 

Как сдают анализ женщины

Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику. 

Забор биоматериала

Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.

Расшифровка анализа ПЦР

В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.

Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:

• Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
• Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
• Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.

В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.

Рак шейки матки получил широкое распространение в наши дни. Если раньше он поражал преимущественно женщин старше 40 лет, сейчас его влиянию подвержены и молодые девушки. Патология занимает третье место среди злокачественных образований половых органов у женщин. Но можно предотвратить развитие этого заболевания при помощи современных профилактических методов. К ним относится регулярное определение наличия вируса папилломы человека в крови – ВПЧ-скрининг (анализ).

Скрининг – это обследование больших групп население с целью раннего выявления заболеваний и своевременного назначения лечения. Статистика гласит, что проведение профилактического обследования на ВПЧ снижает вероятность появления рака шейки матки более чем в 1000 раз!

Что такое вирус папилломы человека

Вирус папилломы человека по своей распространенности стоит наравне с ВИЧ. Более семидесяти процентов населения инфицированы им.

Многие инфицированные являются носителями вируса, то есть он не вызывает никаких клинических проявлений. Возможно самоизлечение. Но снижение иммунитета вследствие простудных заболеваний, аллергических реакций, гиперинсоляции вызывают его активацию и развитие заболеваний.

ВПЧ приводит к появлению не только папиллом на коже. Есть штаммы вируса с высокой канцерогенностью. Инфицирование ими женщин повышает вероятность заболевания раком шейки матки.

Поэтому девушкам еще до первого полового контакта рекомендуют проводить скрининг ВПЧ, который определяет наличие вируса в организме.

Как можно заразиться ВПЧ

Основной путь заражения – половой. Можно заразиться посредством вагинальных, оральных и анальных половых контактов. Поэтому наличие вируса папилломы человека у одного партнера требует обследование другого.

Также существует контактно-бытовой путь заражения. Такой путь инфицирования возможен при контакте с личными вещами больного или носителя. Часто люди заражаются при посещении мест общего пользования: бассейн, городской транспорт (держась за поручень), общественные душевые и туалеты.

Еще один путь передачи ВПЧ – вертикальный – от матери к ребенку. Ткань плаценты проницаема для вируса, поэтому он легко проникает через кровоток в организм плода. Также ребенок может заразиться при естественных родах во время прохождения по родовым путям.

Типы вируса папилломы человека

Всего выделяют около ста видов вируса, которые разделены на группы зависимости от степени канцерогенности:

• с высоким канцерогенным риском – ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 58, 59, 68;
• с низким риском – ВПЧ 6, 11, 42, 43, 44;
• не обладающие канцерогенностью – ВПЧ 1, 2, 3, 4, 5.

Вирусы первой группы еще называют “высокоонкогенными” или ВПЧ ВКР. Аббревиатура ВКР обозначает “высокий канцерогенный риск”, то есть вероятность развития рака при таких формах очень высока. Наиболее опасными считаются вирусы 16 и 18.

При обнаружении этих вирусов назначают дополнительные методы обследования: кольпоскопию (подробный осмотр шейки матки в зеркалах) и мазок на онкоцитологию (берется секрет с шейки матки и рассматривается под микроскопом).

Вирусы с низким риском развития опухоли вызывают развитие остроконечных кондилом. Эти образования безопасны и могут пройти самостоятельно.

Важно! Наличие остроконечных кондилом является предраковым состоянием, поэтому при их обнаружении нужно минимум один раз в год обследоваться у гинеколога.

Типы ВПЧ, которые не способствуют развитию опухолей, приводят к возникновению бородавок и папиллом.

Способы выявления

Что это такое – ВПЧ-скрининг у женщин? Какими способами можно определить наличие вируса в крови? Существуют как методы установления факта наличия вируса, так и анализы, позволяющие подсчитать его количество в организме и степень его онкогенности:

• кольпоскопия – позволяет определить наличие кондилом или бородавок;
• цитологический метод – изучение мазка под микроскопом и выявление злокачественных клеток;
• гистологический способ – исследование маленького участка ткани под микроскопом;
• иммуноферментный анализ – определение наличия антител вируса в крови;
• Digene-тест – современный метод, с помощью которого можно установить количество вируса и его онкогенность;
• полимеразная цепная реакция (ПЦР) – выявление ДНК вируса в биологических жидкостях организма: крови, мазке с шейки матки, моче, околоплодных вод и прочее.

Первые три методы эффективны при уже развившемся раке шейки матки и поэтому не рекомендованы для скрининга.

Иммуноферментный анализ позволяет лишь установить факт наличия вируса в организме. Digene-тест считается наиболее эффективным. Основной его минус – высокая стоимость.

Наибольшее распространение получил метод ПЦР, который может быть качественным и количественным. И если первый позволяет только установить факт присутствия вируса, то при помощи второго можно определить точное число вируса в организме. Именно количественный скрининг ВПЧ наиболее эффективен для профилактики рака шейки матки. Его рекомендуют проводить каждые 5 лет.

Преимущества полимеразной цепной реакции

Метод ПЦР позволяет определить количество вируса в организме, то есть относится к ВПЧ-скринингу с вирусной нагрузкой. Но с его помощью нельзя выяснить онкогенность. Поэтому проводят ПЦР с целью определить ДНК наиболее онкогенных вирусов. Врач при направлении на анализ указывает типы вируса, которые нужно искать.

Данный метод имеет ряд достоинств:

• высокая эффективность – ПЦР обладает точностью до 100 %;
• быстрота получения результатов – вирусная нагрузка известна уже через 4 часа после обследования;
• возможность одновременного определения нескольких типов ВПЧ при помощи одного анализа;
• приемлемая стоимость;
• доступность – возможность сделать анализ практически в любом медицинском учреждении.

ПЦР-скрининг на ВПЧ ВКР. Что это такое

Обследование на папилломавирус с высокой степенью онкогенности проводится по строгой схеме. На первом этапе делается ПАП-тест, с помощью которого определяют наличие измененных клеток среди эпителия шейки матки. Присутствие таких клеток получило название дисплазии.

Если участки дисплазии обнаружены, следующий этап ВПЧ ВКР скрининга – определение количества вируса в организме, а также его идентификация. Этот этап еще называют расширенным скринингом. Как правило, проводится при помощи полимеразной цепной реакции.

Показания к сдаче

Скрининг ВПЧ проводится вне зависимости от наличия симптомов или каких-либо заболеваний. Но есть ряд патологий, который должны насторожить врача и больного. При наличии этих состояний лечащий врач должен немедленно направить пациента на обследование ВПЧ:

• наличие кондилом на половых органах, вокруг анального отверстия, вокруг рта;
• личное желание пациента после незащищенного полового акта;
• выделения из половых органов, причина которых не ясна.

Сдача анализа в профилактических целях также очень важна. Это дает возможность постоянно контролировать состояние половых органов. Для носителей обследование проводится 1 раз в год.

Первичное выявление ВПЧ при профилактической диагностике позволяет назначить раннее лечение. Это повышает вероятность успешного выздоровления за меньшие сроки терапии.

Как подготовиться к анализу

При подготовке к нему необходимо придерживаться некоторых правил:

• не принимать противовирусные средства и антибиотики минимум за 3 дня до сдачи анализа, также нужно отменить антибактериальные средства для интимной гигиены;
• не использовать средства личной гигиены в день сдачи анализа;
• не ходить в туалет за 2 часа до скрининга;
• анализ не сдается в менструальный период и в течении двух дней после менструации;
• избегать использование противозачаточных средств в виде гелей, мазей или губок за несколько дней до сдачи анализа;
• исключить половые контакты минимум на 2 дня до обследования.

Если проводится определение ВПЧ в крови, анализ осуществляется натощак, то есть нужно отказаться от приема пищи за 10-12 часов до обследования. За 3 дня до скрининга следует исключить прием алкоголя, скорректировать рацион питания: не употреблять жареную и копченую пищу, пряности.

Интерпретация результатов ПЦР

В результате записывается количество выявленных ДНК вирусов на 100 тысяч клеток. Если вирус отсутствует, в бланке указывается, что вирус не обнаружен. Если же он есть в организме, указывается его точная концентрация:

• Lg < 3 – крайне маленькое количество;
• Lg 3-5 – средняя вирусная нагрузка;
• Lg >5 – вирус в высокой концентрации.

Существует риск ложноположительного результата. В такой ситуации лабораторное обследование выявляет вирус в крови, когда его на самом деле нет.

Где можно выявить

Основной материал для обнаружения вируса папилломы человека – эпителий. У женщин он берется из канала шейки матки, у мужчин – из уретры. Помимо клеток эпителия, для проведения ПЦР также используют мочу, кровь, выделения из влагалища и уретры.

При определении вируса гистологическим методом используется маленький кусочек ткани, вырезанный во время обследования шейки матки в зеркалах.

Как делают скрининг ВПЧ: правила забора

Чтобы избежать искажения результатов, при заборе материала для обследования следуют ряду правил. При взятии мазка из канала шейки матки используют специальный инструментарий – мягкую маленькую щеточку. Раньше широко использовалась металлическая ложечка Фолькмана, которая сейчас практически не применяется. Врач вводит щеточку в шейку матки и делает несколько вращательных движений. Далее щеточка аккуратно вытаскивается и кладется в стерильную емкость для отправки в лабораторию.

Что такое ВПЧ-скрининг в гинекологии? Забор материла для гистологического обследования – более серьезная процедура. По сути она является микроскопическим хирургическим вмешательством.

Поэтому после гистологического выявления ВПЧ запрещены физические нагрузки, купание в бассейне или море, чрезмерное пребывание под солнцем. Также не стоит сразу после обследования принимать препараты, разжижающие кровь (“Гепарин”, “Варфарин”), любые медикаменты в форме вагинальных таблеток, свечей, гелей, мазей.

Что делать после получения результатов

После того, как пациент получил результаты ВПЧ-скрининга, он должен проконсультироваться со специалистом. Только лечащий врач может правильно интерпретировать и назначить дополнительные методы обследования и лечение.

Вся информация, присутствующая в интернете, носит исключительно рекомендательный характер. Окончательный диагноз может поставить только квалифицированный специалист!