При методе пцр впч высокого риска
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. 
ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу. 
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
По данным Всемирной организации здравоохранения, в настоящее время ежегодно регистрируется более полумиллиона случаев развития рака шейки матки. Около 250 тысяч женщин погибают от этой болезни из-за слишком поздней диагностики и неэффективного лечения. Вирус папилломы человека является одним из наиболее опасных онкогенных вирусов, провоцирующих развитие злокачественных опухолей.
Что это такое?
ВПЧ – название для объединенного семейства вирусов, включающего в себя более 100 различных видов. Все эти штаммы разделены по степени онкогенного риска. Около 13 штаммов приводят к возникновению различных видов рака. При излечении от вируса, человек может инфицироваться повторно.
Виды вируса
По статистике, больше половины населения России являются носителями разных видов вируса, что показывает огромную распространенность вируса. Но это не значит, что ВПЧ для всех становится смертельным диагнозом. Многие типы папилломавируса никак не отражаются на здоровье человека, и приносят только эстетические дефекты в виде папиллом и бородавок.
Существуют такие штаммы вируса, при которых развитие рака практически невозможно, так называемый ВПЧ низкого онкогенного риска. Также широко распространены виды среднего онкогенного типа, и эти две категории включают в себя большинство разновидностей папилломавируса.
Видов вируса, провоцирующих возникновение злокачественных опухолей, значительно меньше. Сюда включаются 31, 33, 6, 11, 16 и 18 типы. Последние два представляют большую угрозу для женщин. Сегодня с помощью многочисленных исследований достоверно установлена связь между развитием рака шейки матки и инфицированием 16 и 18 типом ВПЧ. В 70% случаев именно с разрушительным воздействием инфекции связано появление злокачественных новообразований. Рак шейки матки стоит на втором месте по наиболее распространенным видам рака среди женщин.
Уже в первые два года после попадания вируса в организм у 15-30% женщин происходят изменения в области шейки матки, и возникает предраковое состояние. За это же время такие изменения возникают лишь у 2% женщин, незараженных ВПЧ.
16 и 18 типы опасны полным отсутствием внешних проявлений. Только соответствующие анализы могут указать на наличие папилломовируса, в то время как сама инфекция протекает бессимптомно. Даже при обычном осмотре у гинеколога выявить заражением этими типами вируса невозможно. Такое проявление вируса называется латентной формой и без лечения может привести к развитию онкологии.
Способы передачи
Наиболее распространенным путем передачи являются незащищенные половые контакты с носителями ВПЧ. Риск заразиться вирусом в первые три года после первого полового контакта составляет 46%. Именно поэтому к группам, традиционно находящимся в зоне риска, например, проституткам, добавляются те женщины и девушки, у которых может быть только один половой партнер. В частности, высокий процент инфицированных встречается среди подростков. Заражение может произойти при любом виде полового контакта, в том числе анального и орального.
Другой способ заражения – инфицирование новорожденных, проходящих через родовые пути. Если будущая мама является носителем ВПЧ, ребенок имеет высокий шанс подхватить вирус при естественных родах. Впоследствии у таких детей может развиваться папилломатоз гортани – вирусное заболевание, характеризующееся возникновением папиллом в гортани. Поэтому перед планированием беременности женщине необходимо вылечить инфекцию, если она присутствует.
Известен и контактно-бытовой путь заражения. Это может произойти через маленькие кожные раны при тесном контакте. Например, при использовании общих предметов гигиены, посещении спортзала или бассейна. При этом такой путь передачи не может привести к инфицированию высокоонкогенным типом ВПЧ. Зато этим способом вполне можно заразиться кожными бородавками.
Как происходит заражение
ВПЧ инфицирует многослойный эпителий, что и определяет область поражения – кожа и слизистые оболочки. ДНК вируса стремится проникнуть в ядро клетки человека. Её целью является воспроизводство там онкогенных белков. После того, как это происходит, они начинают стремительно реплицироваться. Если это доброкачественный рост, то клетки не выходят за пределы эпителия. Если злокачественный, распространение патологического процесса запускает возникновение метастаз. При этом инкубационный период длится около трех месяцев.
Проявления ВПЧ
- Бородавки. Плотные наросты, имеющие неровные поверхность и цвет от серого до черного. Появляются после заражения низкоонкогенными типами вируса. Не угрожают жизни и здоровью человека, но вызывают косметические проблемы. Чаще всего локализуются в районе рук и стоп, но также могут появляться на поверхности всей кожи. Существуют также подошвенные бородавки, которые уплотняются и грубеют при ходьбе. Их характерное отличие – появление крови при срезании верхушки.
- Остроконечные кондиломы. Являются доброкачественными новообразованиями, располагающимися на коже и половых органах. Встречаются наросты телесного, розового или коричневого цвета. Их характерной особенностью является быстрое распространение. Могут возникать в области шейки матки, но не исключено и поражение мочеиспускательного канала, а также прямой кишки и ануса. Кондиломы доставляют дискомфорт в виде зуда и жжения. На ранней стадии чаще всего появляются одиночные наросты. На более поздних стадиях кондиломы показывают способность к слиянию. Не представляют опасности перерождения в злокачественные новообразования.
- Плоские кондиломы. Более опасны в плане развития онкологии. Вероятность рака увеличивается с возникновением новых наростов. Этот вид кондилом обычно располагается на слизистой оболочке влагалища.
- Бовеноидный папулез. Вирусное заболевание, считающееся предраковым. Характерная особенность – сыпь в области половых органов. Также возникают пигментные папулы – гладкие образования коричневого цвета. Папулы часто появляются вместе с кондиломами и бородавками. Компоненты сыпи могут привести к разным видам рака, опасным женщин.
- Рак шейки матки. Для каждой женщины существует риск того, перерождения вируса в хроническую форму, а предраковое состояние в итоге может перерасти в рак. Если не заниматься лечением вируса, то это станет просто вопросом времени. У женщин с хорошим иммунитетом такие процессы происходят за 15 лет. У тех, чей организм страдает от ослабления иммунитета, например, у ВИЧ положительных женщин, на это потребуется всего 5 лет.
Диагностика заболевания
Нередко случается так, что женщина может обнаружить проблемы в организме после обычного визита к гинекологу, где у нее возьмут мазок. Чтобы выявить причины возможных заболеваний, врачу приходится проводить ряд дополнительных исследований и тестов.
Итак, порядок диагностики заболевания должен быть следующий:
- Первичный внешний осмотр врача, на котором берется мазок для определения состояния микрофлоры влагалища, уровня лейкоцитов и выявления заболеваний.
- Если результаты анализа пришли неудовлетворительные, о чем будет говорить повышенный уровень лейкоцитов, гинеколог назначает дополнительные анализы на ЗППП, в число которых обязательно входит несколько штаммов ВПЧ. В частности, используется ПЦР анализ, помогающий установить не только наличие вируса в организме, но и его типы. Совместно с ПРЦ делается количественный тест, диагностирующий уровень концентрации вируса. Этот показатель, а также количество новообразований влияют на возможность появления онкологии.
- Когда результат показывает один или несколько типов ВПЧ, женщине назначается кольпоскопия. Это процедура осмотра шейки матки с помощью кольпоскопа – аппарата, предназначенного для многократного увеличения. Таким образом проводится детальное исследование шейки матки, влагалища и вульвы. С помощью кольпоскопии можно оценить, насколько вирус успел повлиять на состояние шейки матки, выявить очаги поражения, просмотреть наличие предраковых изменений и генитальных бородавок. Обычно гинеколог проводит расширенную кольпоскопию с использованием химических веществ для выявления атипичных очагов.
- При диагностике ВПЧ назначается лечение, соответствующее типу вируса и его проявлениям.
Лечение папилломовируса
Вирус папилломы человека может длительное время скрыто присутствовать в организме носителя и при этом никак не проявлять себя. Его развитие останавливает иммунная система, которая должна тормозить распространение чужеродной ДНК. Именно на поддержание и активизацию иммунитета направлено одно из направлений лечения. Такой метод называется консервативным и включает в себя назначение иммуномодулирующих и противовирусных препаратов (Изопринозин, Аллокин-альфа и другие).
Другое направление направлено на устранение последствий инфекции: удаление возникших папиллом и кондилом. Для этого существует несколько способов:
- Хирургическое вмешательство. Представляет собой операцию по срезанию новообразований. Процедура проводится под местным наркозом. Недостатками этого метода является не только возможные последствия в виде шрамов, но и риск кровопотери. Кроме того, такой способ не дает гарантии удаления всех клеток папилломовируса.
- Электрокоагуляция. Наиболее распространенный метод удаления папиллом и бородавок за счет дешевизны и доступности. Проводится с помощью высокочастотного тока, точечно воздействующего на наросты. Как и предыдущий способ, оставляет на теле следы от удаленных папиллом. Также не гарантирует отсутствие рецидивов.
- Лазерная деструкция. Один из наиболее современных способ удаления папиллом. Для этого используется лазерный луч, который полностью убирает клетки папилломы, воздействуя на атипичные ткани. Такой метод считается наиболее надежным и безопасным. Не оставляет нежелательных последствий в виде рубцов и шрамов, сразу запаивает сосуды, чтобы предотвратить кровотечение.
- Криодеструкция. Процедура проводится с помощью жидкого азота, который наносится на специальный аппликатор. Под воздействием жидкого азота нарост постепенно отпадает. Однако при таком методе возможно получение ожогов, что в конечном итоге даст нежелательный рубец. Это происходит из-за глубоко воздействия вещества на кожу.
Профилактика ВПЧ
Профилактика этого заболевания сводится к нескольким простым правилам:
- Использование презервативов в качестве средства контрацепции при половом акте. Этот пункт особенно важен, так как половой путь передачи инфекции наиболее распространенный.
- Осмотр у гинеколога. Женщинам раз в полгода нужно проходить осмотр у врача и сдавать мазок, чтобы знать о состоянии своего организма.
- Поддержание иммунитета. Именно иммунная система дает основной отпор папилломовирусу, и хороший иммунитет может подавить его проявления еще до того, как инфекция разовьется.
К неспецифическим методам профилактики относится прививки против ВПЧ высокоонкогенных типов. Эти вакцины защищают от 16 и 18 типа и могут обеспечить некоторую защиту от других типов вируса. Успешно прошедшие клинические испытания, вакцины считаются безопасными и эффективными. Однако вакцинация должна производиться до первого полового контакта, потому что она только препятствует проникновению вируса в организм, но никак не сможет вылечить уже имеющуюся инфекцию. Ими рекомендуется вакцинировать девочек в возрасте с 10 до 13 лет.
О том что такое онкогенный ВПЧ у женщин и к чему он может привести смотрите в нашем видео:
Источник
