Пцр на папиллому как берут
Существуют десятки видов вируса папилломы человека (ВПЧ). Часть из них не наносит никакого особенного вреда. Другие вызывают появление бородавок и папиллом на коже и слизистых. А самые опасные могут спровоцировать развитие онкологического заболевания, особенно у женщин. Именно поэтому ранняя и точная диагностика ВПЧ может спасти жизнь.
Что такое вирус папилломы человека (ВПЧ) и чем он опасен
Вирус папилломы человека распространен очень широко, им инфицировано 80% всей популяции планеты. Этот вирус передается от человека к человеку — при половом контакте, бытовым путем или во время родов от матери к ребенку. Попадая в организм, этот вирус встраивается в ДНК клетки, заставляя ее делиться не так, как это предусмотрено нашей «программой», а так, как нужно вирусу. Результатом становятся плоские и обычные бородавки и кондиломы. При заражении определенными типами вируса они могут перерождаться в раковые опухоли.
Важно
Самыми онкогенными считаются вирусы папилломы человека 16 и 18 типов. Вирус 16 типа находят в половине случаев рака шейки матки, вирус 18 типа — в 10% случаев.
Вирус может присутствовать в организме, но при этом никак не проявлять себя. Наша иммунная система способна долго сдерживать его. Но достаточно какого-либо сбоя в работе организма — тяжелого инфекционного заболевания, продолжительного стресса, воздействия алкоголя, никотина или наркотиков, — чтобы вирус активировался и прорвал защитный заслон.
Когда назначается анализ на ВПЧ
Если врач обнаружит на вашем теле признаки деятельности вируса, он направит вас на обследование. Мало знать, что вирус как таковой присутствует в организме — гораздо важнее выяснить его тип, поскольку, как уже было сказано, ВПЧ может быть как относительно безвредным, так и смертельно опасным.
Анализ на вирус папилломы человека необходимо сделать и в том случае, если вы планируете беременность, а также при выявлении причин бесплодия, выкидышей и патологий вынашивания. Причем обследование должны пройти оба партнера — ВПЧ передается при незащищенных половых контактах очень легко, и если один из партнеров инфицирован, то и второй, наверняка, тоже.
Какой анализ на вирус папилломы человека может быть назначен: методы исследования
Существует несколько методов лабораторной и инструментальной диагностики вируса папилломы человека. Они преследуют несколько целей: во-первых, выявить сам факт наличия вируса, во-вторых, узнать его разновидность, и в третьих — оценить нанесенный им ущерб, а также выяснить, не начался ли уже процесс перерождения безобидной кондиломы в злокачественную опухоль.
Кольпоскопическое исследование
назначается женщинам для обнаружения кондилом, расположенных в области шейки матки. Исследование достаточно простое — при помощи специального микроскопа врач осматривает слизистые оболочки шейки матки и влагалища. Многократное (8–16-кратное) увеличение позволяет увидеть даже очень маленькие кондиломы. Результат обычно выдается на руки сразу после обследования.
Цитологическое исследование
. Материалом для этого лабораторного исследования является мазок, который содержит клетки эпителия. Образцы клеток рассматриваются под микроскопом. Такое исследование позволяет заметить видоизмененные клетки, указывающие на вирусную инфекцию. Метод этот прост и дешев, но не очень точен — есть высокий риск ложноотрицательного результата. Результат анализа выдается через 5–7 дней и обозначается в бланке цифровым кодом. 1 — пораженных клеток нет, 2 — обнаружены клетки, измененные из-за воспалительных процессов, 3 — результат вызывает сомнения, необходимо дополнительное обследование, 4 или 5 — наличие пораженных клеток.
Гистологическое исследование
обычно назначают в дополнение к цитологическому. Это лабораторный метод исследования биоптата, то есть маленького фрагмента тканей. Специалист рассматривает препарат в микроскоп и оценивает состояние пораженных клеток. Гистологическое исследование дает возможность определить характер новообразования и отличить кондилому от опухоли. Обычно результат можно получить на руки через 3 дня.
Как правило, после гистологического анализа назначают ПЦР-анализ.
ПЦР-диагностика
— один из самых достоверных способов диагностики, который применяется для выявления многих бактерий и вирусов. При помощи ПЦР-диагностики можно выявить ДНК вируса даже в том случае, если количество возбудителя в крови крайне мало и он никак себя не проявляет. Точность метода приближается к 100%, однако на нее сильно влияет соблюдение техники проведения исследования. Поэтому ПЦР-анализ лучше проводить только в тех лабораториях, где строго следят за соблюдением всех стандартов. Материалом для исследования чаще всего становится мазок, но иногда исследуют околоплодные воды, мочу или кровь. Результаты исследования будут готовы через 1–2 дня, в некоторых случаях их можно получить даже в день обращения, поскольку само исследование как таковое занимает всего 4–5 часов.
ПЦР позволяет очень точно определить количество вируса в биоматериале. Конечная цифра обозначает количество геномных эквивалентов на 100 тысяч клеток. Если вирус вообще не обнаружен, то в бланке это будет указано. Если же вирус присутствует, в результатах обозначат его концентрацию.
- Lg < 3 — вирус ВПЧ есть, но его концентрация крайне мала.
- Lg 3–5 — клинически значимое количество вируса.
- Lg > 5 — высокая вирусная нагрузка.
Если любое из этих исследований даст положительный результат, врач, скорее всего, направит вас на повторный анализ. При современных методах лабораторных исследований риск ошибки низкий, однако ненулевой. Чаще всего ложноположительный результат бывает следствием загрязнения биоматериала и нарушения техники его забора, неправильно выбранного времени для исследования (например, вы прошли лечение и вирус был уничтожен, однако его следы в биоматериале еще можно обнаружить) или несоблюдения пациентом правил подготовки к анализу.
У пациентов вызывает много вопросов неоднозначная ситуация, при которой папилломы есть, тем не менее анализы не выявляют самого вируса. Так бывает, если в какой-то момент в прошлом вирус был активным и привел к формированию кондилом и папиллом, однако впоследствии иммунная система окрепла и подавила его деятельность. Но папилломы не могут рассосаться сами собой. В таком случае наилучшее решение — просто удалить папилломы и не забывать регулярно проходить обследование.
Исследуемый биоматриал
Основной биоматериал для проведения анализа на вирус папилломы человека — клетки эпителия, полученные методом мазка из уретры у мужчин и из цервикального канала — у женщин. Технически для проведения ПЦР-анализа возможно исследование крови, выделений из влагалища и уретры, околоплодных вод и мочи, однако на практике эти типы биоматериала практически не используются.
Для проведения гистологического исследования необходим биоптат, маленький образец тканей из пораженного участка, который отщипывают специальным прибором.
Правила забора биоматериала
Мазок берут при помощи миниатюрной мягкой щетки-ершика, напоминающей щеточку от туши для глаз. Раньше для этой цели использовалась так называемая ложка Фолькмана — крошечная ложка на очень длинном тонком черешке, однако сегодня данный инструмент почти никто не использует.
Щеточку осторожно вводят в канал и вынимают вращательным движением. На ворсинках остаются клетки эпителия. После этого щеточку помещают в специальную стерильную емкость и отправляют на исследование.
Для того чтобы результат анализа был точным, к забору мазка нужно подготовиться. За 2 суток для проведения исследования нельзя вступать в половые контакты, пользоваться антибактериальным мылом для интимной гигиены, проводить спринцевание. Если мазок берется из уретры, забор биоматериала производится до мочеиспускания. Перед забором мазка желательно принять душ без моющих средств.
На результат могут повлиять такие факторы, как прием антибиотиков, пробиотиков и местных антисептиков. Если за последние два месяца вы принимали какие-либо препараты, обязательно предупредите врача об этом.
Забор биоптата из шейки матки — дело гораздо более серьезное. Как и при заборе мазка, за 2 дня до биопсии нельзя вступать в половые контакты, спринцеваться, пользоваться любыми местными антибактериальными средствами и тампонами. После биопсии как минимум 2–3 недели нельзя вступать в половые контакты, при кровотечении разрешено пользоваться только прокладками, но не тампонами. Запрещены существенные физические нагрузки, перегрев, купание в бассейне или открытом водоеме, любые препараты, разжижающие кровь (в том числе обычный аспирин) и любые вагинальные средства — гели, спреи, свечи и т.п.
Где можно сдать биоматериал на анализ
Все описанные выше диагностические методы широко распространены, и сдать анализ на папилломавирусную инфекцию у женщин и мужчин можно практически в любой коммерческой или муниципальной лаборатории.
Многие люди предпочитают заплатить, чтобы избежать общения с государственными медучреждениями — и это их право. Впрочем, следует сказать, что, несмотря на явный недостаток комфорта и неудобство для пациентов, муниципальные поликлиники и диагностические центры в крупных городах прекрасно оснащены, и врачи, работающие там — специалисты высочайшего класса. Что, увы, не отменяет очередей, бюрократии и неудобного графика работы.
Если вы предпочитаете сдать анализ на вирус папилломы человека в частном медцентре, выбирайте крупное и известное учреждение, имеющее собственную лабораторию — это гарантия точности и соблюдения всех правил забора и обработки биоматериала. И, кроме того, в серьезных диагностических центрах результат можно получить быстрее, чем в маленьких компаниях. Небольшие центры часто отдают материал на исследование в сторонние лаборатории, с которыми сотрудничают на условиях аутсорса, а это заметно замедляет получение результата.
Сколько стоит исследование на выявление папилломавирусной инфекции
Стоимость исследования зависит и от уровня медицинского центра, и от его расположения. Мы приведем лишь средние для Москвы цены на анализы на вирус папилломы человека.
Кольпоскопия обойдется приблизительно в 700–1500 рублей. Цитологическое исследование стоит около 1100–2500 рублей, к этой сумме нужно прибавить стоимость забора мазка — 300–600 рублей.
Гистологическое исследование стоит 2000–3000 рублей, а забор биоптата — около 400 рублей.
Стоимость ПЦР-анализа на вирус папилломы человека с определением типа в московских лабораториях составляет 700–1900 рублей.
Сдавать анализ на вирус папилломы человека нужно регулярно, начиная с 20–25-летнего возраста. Особенно это касается женщин — не выявленный вовремя ВПЧ может привести к проблемам с зачатием, бесплодию, невынашиванию, дисплазии шейки матки и появлению злокачественных новообразований. Проходить обследование нужно раз в три года. Если вы входите в группу риска — то есть курите или употребляете алкоголь в больших количествах, часто меняете половых партнеров и болеете инфекционными заболеваниями — обследование должно проводиться раз в год.
Источник
Папилломавирусная инфекция человека – воспалительная патология, поражающая слизистые и кожные покровы.
Возбудителем заболевания служат папилломавирусы (ВПЧ – распространенное сокращение от «вирус папилломы человека»).
Их легко обнаружить при проведении соответствующего анализа на ВПЧ.
Известно свыше сотни типов этого вируса.
Примерно треть из которых передается при любых видах сексуальных контактов и обуславливает болезни мочеполовой системы.
Инфекция очень распространена: к 50-ти годам 80% всех женщин оказывается зараженными.
Что собой представляет и чем опасен ВПЧ?
Папилломавирусы имеют шарообразную форму.
Склонны поражать делящиеся клетки эпителия у основания верхнего слоя кожи.
А образование новых вирусных частиц осуществляется в верхних эпителиальных слоях.
Помимо полового пути заражения возможно занесение вируса новорожденному матерью в родах.
Также контактно при микроповреждениях кожных покровов.
(Вирус некоторое время сохраняется в эпителиальных клетках после их отшелушивания).
Человек бывает заражен сразу несколькими типами.
Через сколько проявляется заболевание?
Вирус зачастую продолжительное время сохраняется в организме бессимптомно, а затем самопроизвольно элиминируется.
Но в ряде ситуаций при наличии благоприятствующих факторов возможно развитие инфекционной патологии.
Последнее случается как через пару недель от момента заражения, так и спустя несколько месяцев.
Папилломавирусы оказываются причиной целого ряда заболеваний, в том числе рака шейки матки (рака цервикального).
Каждый год в мире регистрируется до полумиллиона новых эпизодов этого страшного заболевания, обусловленных воздействием именно данного микроорганизма.
А также почти четверть миллиона смертей от цервикального рака.
В целом 93% случаев онкозаболевания маточной шейки имеет причиной именно ВПЧ.
По риску возникновения онкологии все типы разделяются на три группы:
- онкогенного риска высокого (18,16, 35, 33, 31 и др.) – при участии провоцирующего факторов вирусы этой группы способны вести к злокачественным изменениям;
- низкого (8, 6, 14, 12 и др.) – вирусы вызывают онкологическую патологию только при определенных условиях и весьма редко;
- неонкогенные (1,2,3 и др.) – не способны вызывать рак.
Представители первой из перечисленных групп вызывают такие заболевания, как:
- неоплазия (иначе дисплазия) маточной шейки – появление атипично измененных клеток, выраженность процесса изменяется от легкой степени (предрака) до рака;
- бовеноидный папулез (причина – преимущественно ВПЧ 16-го типа) – проявляется плотными красно-коричневыми образованиями (папулами) на коже половых органов, имеет в целом доброкачественное течение, но в 3% случаев приводит к озлокачествлению.
Представители второй из перечисленных групп могут стать причиной:
- остроконечных кондилом (иначе бородавок аногенитальных) – образований дольчатого строения в области половых органов, заднего прохода;
- бородавчатой эпидермоплазии – плоских папулезных бородавчатых разрастаний, которые в свою очередь могут иметь высокий и низкий онкогенный риск;
- ларингеального папилломатоза (причина – обычно вирус 11 типа) – папиллом гортани, образующихся чаще всего у детей вследствие заражения от матери в процессе родов.
Вирусы третьей группы могут приводить к развитию бородавок:
- вульгарных (2 тип) – появляющихся обычно у детей самоизлечивающихся сосочковых ороговевших разрастаний на тыльной области рук;
- плоских (3 и 5 типы) – мелких узелков на лице и кистях, самоизлечивающихся и характерных для подросткового возраста;
- подошвенных (1 тип, реже – 2-й) – образующихся на местах сдавливания обувью утолщений до 100 мм диаметром, болезненных, устраняющихся оперативным путем.
Как диагностируются заболевания, ассоциированные с ВПЧ?
Бородавки и кондиломы остроконечные легко определить при внешнем осмотре.
В случае обнаружения последних требуется дополнительное изучение маточной шейки, а в ряде эпизодов и уретры (уретроскопией).
Из всех ВПЧ-провоцируемых патологий наибольшую настороженность вызывают онкозаболевания в области шейки.
Что является основным методом диагностики соответствующих неопластических изменений?
Цитологическое исследование по Папаниколау соскоба (мазка) из цервикального канала (т.н. ПАП-тест, PAP).
Это в гинекологии одно из основополагающих скрининговых мероприятий.
Цитологические признаки ВПЧ-инфекции:
- койлоцитоз – появление характерно измененных при действии вируса клеток-койлоцитов, имеющих одно/несколько темных объемных ядер неправильной формы и с околоядерной светлой зоной, вакуолей;
- дискератоз – появление мелких поверхностных клеток-кератоцитов с темными ядрами и специфической цитоплазмой.
При выявлении клеточных изменений показаны:
- кольпоскопия с одновременной реализацией тестов с уксусной кислотой и Люголя раствором;
- гистологическое исследование – изучение образца тканей под микроскопом.
Признаком ВПЧ при кольпоскопии считаются:
- поглощение неравномерное раствора Люголя;
- жемчужная поверхность, белое окрашивание эпителия в тесте с уксусной кислотой (эпителий ацетобелый);
- выросты и пр.
Для установления конкретного типа вируса используется типирование посредством ПЦР.
Что делать и какие анализы на ВПЧ следует сдать, если обнаружены клетки с атипией в ПАП-тесте?
Если в итоге ПАП-теста были обнаружены признаки вируса и поражения незначительной степени, то возможны следующие тактические варианты:
- Спустя 3 месяца повторяют исследование цитологическое. Если результат отрицательный, анализ проводят спустя еще полгода, год и два. Если итог положителен, показана кольпоскопия.
- Сначала проводят кольпоскопию и в отсутствие изменений повторяют цитологию через полгода/год в зависимости от того, выявляются ли в анализе на ВПЧ вирусы онкогенного типа. При необходимости могут осуществляться выскабливание диагностическое шеечного канала, биопсия. Если же кольпоскопия не позволяет дать адекватное заключение, проводят терапию эстрогенами или антивоспалительными препаратами с последующим повторением исследования.
- Сразу проводят анализ на ВПЧ методом гибридного захвата (т.н. ВПЧ Digene-тест) или методом ПЦР. При положительном итоге осуществляется кольпоскопия, при отрицательном – спустя полгода повторяется цитология.
Анализ на ВПЧ по крови с выявлением и подсчетом антител в диагностике не используется.
Имеет только научно-исследовательское значение.
Таким образом, анализ на ВПЧ (мазок) называется исследованиями методами ПЦР, гибридного захвата, типированием ВПЧ.
Помимо специфических анализов на ВПЧ, по врачебной рекомендации дополнительно иногда берется мазок на флору, проводится анализ крови общий и др.
Что представляет собой метод гибридного захвата?
Анализ на ВПЧ Digene-тест используется для:
- обнаружения характерных фрагментов вирусных ДНК с высоким (обычно, независмо от лаборатории – Инвитро, Гемотест и др., исследование осуществляется для 130ти типов) и низким онкорисками (5-ти типов);
- определения, в отличие от чрезмерно чувствительного ПЦР, клинически существенного содержания вируса (от примерно 5000 копий ДНК).
Как берут анализ?
Данный анализ ВПЧ – мазок из половых органов и цервикального канала (не анализ крови!).
Сколько делается?
Время собственно исследования – 2,5 часа, но пациенту результат предоставляться может в течение 8 рабочих дней.
Где можно получить подробную информацию о данном анализе ВПЧ?
У врача и в любой лаборатории, где исследование проводится.
Принцип действия метода схож с принципом иммуноферментного анализа.
К ДНК вируса из образца прикрепляется соответсвующая РНК (гибридизация).
После чего полученый комплекс связывается с ферментномеченными антителами и детектируется измерением хемилюминесценции.
«Плюсы» метода:
- чувствительность – более 95%;
- специфичность – совпадает с таковой для цитологии;
- ценность прогностическая – 99%;
- легкость реализации, объективность данных и стандартизированность процедуры;
- возможность использования того же образца для ПАП-теста.
Расшифровка анализа ВПЧ любым методом – прерогатива квалифицированного врача.
Тем не менее, некоторое представление дают результаты, которые отображаются в итоговой таблице.
Для данной методики способ представления – полуколичественная форма выявления ДНК разных ВПЧ типов.
Результат ниже определяемого порога – выдается ответ «не обнаружено».
Больше – отображается показатель в единицах относительных (равных отношению полученных данных и порогового значения).
Что значит положительный результат и как обозначается наличие вируса?
Показатель выше 1 относительной единицы показывает наличие вируса в клинически значимых количествах.
Говорит о риске развития заболевания.
Первичное обнаружение ВПЧ этим методом – показание к обращению за врачебной консультацией.
Метод эффективен и для динамического наблюдения за ходом терапии.
Часто пациенты спрашивают, почему после лечения стали хуже анализы?
Для ответа также следует обратиться к лечащему доктору.
Возможно, неправильно проведено предварительное диагностическое обследование.
Или лечение оказалось недостаточно эффективным и т.д.
Что такое ПЦР анализ на ВПЧ?
Метод полимеразной цепной реакции отличается высочайшей диагностической точностью.
Позволяет произвести идентификацию отдельных вирусных типов.
Однако, важно понимать, что почти 90% эпизодов инфицирования ВПЧ заканчивается самопроизвольным удалением вируса из организма.
Поэтому рутинное применение ПЦР может явиться причиной гипердиагностики.
Положительный анализ на ВПЧ не позволяет предположить наличие или вероятность возникновения рака.
Хотя такой результат весьма значим на фоне неопластических изменений маточной шейки.
Ведь сочетание неоплазии и ВПЧ-инфекции указывает на серьезный риск развития онкологического заболевания.
На основании значительной распространенности инфицированности ВПЧ, склонности инфекции к самоизлечению, относительно высокой стоимости исследования ПЦР анализ на ВПЧ согласно мировым медицинским стандартам:
- не рекомендован женщинам до достижения ими 30-ти лет;
- рекомендовано типирование групповое вируса у женщин старше 30-тилетнего возраста (обнаружение вирусных типов высокого/низкого онкорисков);
- не рекомендован для подтверждения диагноза ВПЧ-инфекции у мужчин, как, впрочем, и любые лабораторные тесты.
ПЦР выявляет в образце материала фрагмент ДНК одного из 43-х типов вируса путем многократного его воспроизведения.
Данная методика позволяет обнаруживать всего от 10 ‑ 100 копий ДНК.
Качественный анализ на ВПЧ осуществляется методом ПЦР и может включать определение 2-х типов вируса (анализ ВПЧ 16, 18, что это за типы указано выше), 3-х, 14-ти и т.д.
Итог ‑ суммарный ответ по изучаемым типам в формате «не обнаружено/обнаружено».
То, сколько стоит такое обследование, зависит от лаборатории и количества анализируемых типов.
Анализ ВПЧ количественный образца клеток эпителия ПЦР проводится в режиме «реального времени».
Т.е. когда одновременно проводится определение числа молекул и их воспроизведение.
Он дает возможность специалисту проводить контроль эффективности проводимой терапии.
Что такое КВМ в названии анализа на ВПЧ?
Для того чтобы результат был достоверным, важно тщательно соблюдать технику забора образцов материала.
Поэтому в набор диагностических тестов включен особый параметр КВМ (аббревиатура от «контроль взятия материала»).
Тест КВМ исполняется до реализации исследований по обнаружению ДНК вируса.
Оценивает в достаточном ли количестве содержатся анализируемые молекулы в образце.
Референсные значения для КВМ указываются в абсолютных единицах, минимальный пороговый уровень составляет 4 ед.
Если КВМ меньше 4, рекомендуется новый забор материала.
Специфичность методики составляет 100%.
Результат анализа ВПЧ (мазок) — количественное выражение по каждому отдельному вирусопоказателю.
Это логарифмом количества ДНК копий в образце.
Его можно получить в течение двух суток.
Расшифровка результатов анализа на ВПЧ осуществляется врачом.
Относительная норма – отсутствие участков ДНК, характерных для данного вируса.
Аналогичный результат отмечается и в ситуации, когда концентрация молекул ниже чувствительности исследования.
Положительный результат – обнаружение ДНК в установленном количестве.
Типирование ВПЧ также проводится ПЦР в реальном времени.
Такой анализ на ВПЧ позволяет определить не только наличие вируса, но и какого типа возбудители присутствуют.
Важно, например, в ситуации, когда у женщин при беременности выявляется вирус 6 и/или 11 типа.
Это – причина респираторного папилломатоза новорожденных.
Следует отметить, что ПЦР – весьма чувствительный и точный метод.
Ложноположительный результат анализа на ВПЧ (мазок) часто обнаруживается, когда делается повторное исследование и вирус вдруг «исчез».
Это бывает обусловлено нарушением техники забора биоматериала или загрязнением образца.
Как подготовиться к анализу на ВПЧ?
Подготовка к анализу на ВПЧ соскоба из урогенитального тракта включает определение того, что нельзя делать перед процедурой, а именно:
- спринцеваться;
- использовать антисептики для гигиены;
- иметь сексуальные контакты;
- мочиться (при соскобе из уретры);
- обследоваться УЗИ с интравагинальным датчиком, кольпоскопией.
Исследование следует проводить не раньше, чем через 2 недели после завершения антибиотикотерапии, до менструации или спустя пару суток после ее прекращения.
Как берется анализ на ВПЧ (мазок)?
В каждом конкретном случае о том, что должна включать в себя подготовка к исследованию и как сдавать собственно анализ, рассказывает врач, назначающий данную процедуру.
Забор материала осуществляется специальными зондами или вагинальными тампонами.
Со слизистой мочеиспускательного или цервикального канала, прямой кишки, ротоглотки и др.
Цервикальный канал предварительно очищается от слизи, промывается физиологическим раствором.
Важно исключить касание зонда влагалищных стенок в процессе извлечения инструмента.
Источник
