Пцр генотипирование вирусов папилломы тип 16
- ВПЧ – Вирус Папилломы Человека
HPV — Human PapillomaVirus
Папилломавирусы — это группа ДНК-содержащих вирусов, поражающих клетки эпителия органов и тканей: кожи, слизистых оболочек.
В чём опасность ВПЧ 16 типа для женщин?
Характерная особенность папилломавирусов — способность индуцировать образование различных эпителиальных опухолей.
Формы повреждения тканей, вызванных ВПЧ, многообразны. Встречаются бессимптомные и малозаметные: кератозы, дисплазии. Бывают клинически ярко выраженные: бородавки, папилломы, кондиломы. Большинство абсолютно безопасны. Без лечения они остаются пожизненным косметическим дефектом или исчезают самостоятельно (самоизлечение).
Но иногда доброкачественные поражения могут перерождаться в злокачественные опухоли – карциномы.
- Карцинома или эпителиальный рак – это злокачественная опухоль, которая развивается из изменённых клеток эпителия различных тканей.
На сегодняшний день установлено, что папилломавирусная инфекция – ведущая причина развития рака шейки матки. При клинически выраженном цервикальном раке ВПЧ высоких рисков онкогенности выявляется в 95-100% случаях.
Известно около 100 серотипов папилломавирусов. Около 17 считаются онкогенными.
- В группу наиболее высокого риска входят ВПЧ типов: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 46, 51, 52, 56, 58, 59 и 68.
- Вирусами низкого риска остаются ВПЧ типов: 6, 11, 42, 43, 44.
Для женщин особенно опасны ВПЧ 16 и 18 типов: они чаще всего вызывают рак шейки матки.
На ВПЧ 16/18 приходится 70% ассоциированного с папилломавирусной инфекцией цервикального рака. Причём наиболее распространённый плоскоклеточный рак связывают с ВПЧ 16 типа. А редко встречающийся железистый рак – с ВПЧ 18 типа.
Заражение ВПЧ 16 типа
Распространённость папилломавирусной инфекции чрезвычайно велика: ДНК тех или иных (иногда сразу нескольких) типов ВПЧ обнаруживаются более чем у 80% взрослого населения.
Мукозотропные ВПЧ, в том числе серотип 16, относят к инфекциям, передающимся половым путём (ИППП). Вероятность заражения через кровь, предметы быта, тем более воздушно-капельным путём ничтожна.
Пути заражения ВПЧ 16 типа:
- Половой путь: традиционный, оральный, нетрадиционный сексуальный контакт с инфицированным партнёром.
- Внутриутробно: заражение плода от инфицированной матери через плаценту или околоплодные воды.
- Во время родов: заражение новорожденного при прохождении по поражённым кондиломами родовым путям матери.
Что происходит после заражения ВПЧ 16 типа?
Подавляющее большинство инфицированных ВПЧ не подозревают о случившемся и в дальнейшем не имеют никаких осложнений.
Более того, до 75% сексуально активных женщин на протяжении жизни заражаются различными типами ВПЧ по нескольку раз. Однако у 2/3 женщин активная инфекция через некоторое время частично или полностью выводится из организма системой иммунитета.
«Остатки» вирусов «консервируются» в чувствительных тканях в виде ДНК ВПЧ и наследуются внутри заражённого клона клеток на протяжении всей жизни носителя. В момент ослабления местного или общего иммунитета скрытая ВПЧ-инфекция «просыпается», рецидивирует, проявляется клинически.
Причины снижения иммунитета к ВПЧ 16 типа у женщин:
— беременность;
— возрастные изменения, связанные со старением организма;
— острые, хронические гинекологические, соматические, воспалительные, инфекционные заболевания;
— ИППП: хламидиоз, генитальный герпес, ЦМВИ, трихомониаз, гонорея, сифилис, ВИЧ, др.
— гормональный дисбаланс;
— нейроэндокринные, метаболические нарушения, ожирение;
— операции, травмы, аборты, тяжёлые роды;
— хронический стресс, физическое истощение;
— лечение цитотоксическими, иммуносупрессивными препаратами;
— агрессивная инсоляция, ионизирующее облучение, лучевая терапия;
— курение, алкоголизм.
Длительное малопродуктивное персистентное течение ВПЧ-инфекции возможно только на фоне дефектов иммунитета.
Симптомы ВПЧ 16 типа у женщин
- Латентная инфекция – симптомов нет.
Присутствие вируса можно выявить лишь с помощью современных иммунохимических или молекулярно-биологических методик, которые определяют наличие в организме антигенов или ДНК ВПЧ.
У женщин даже бессимптомное течение ВПЧ 16 типа может инициировать рак шейки матки.
- Субклиническая
ВПЧ-инфекция персистирует (то обостряется, то стихает), протекает малозаметно, на фоне хронического вульвогинита, эндоцервицита, псевдоэрозии шейки матки. Иногда пациентку беспокоят жжение, зуд в генитальной области. Возможны скудные аномальные выделения из влагалища, дизурические явления.
В цервикальных мазках появляются: койлоциты, лейкоциты, атипичные клетки; иногда — патогенная флора (сочетание ВПЧ-инфекции с другими ИППП вполне закономерно).
Каким должен быть мазок из влагалища у здоровой женщины подробно читайте в статье: Повышенные лейкоциты в мазке у женщины – причины.
В гистологических препаратах цервикальной слизистой видны патологические изменения структуры эпителия шейки матки. При опухолевой трансформации появляется дисплазия (неоплазия, ЦИН).
- Клинически выраженная
ВПЧ-инфекция у женщин – это папилломатоз или кондиломатоз вульвы, влагалища, шейки матки, аногенитальной области.
Как вылечить кондиломы, как выглядят аногенитальные бородавки — читайте подробно в статье: Кондиломы остроконечные.
ВПЧ 16 типа и рак шейки матки
В состав папилломавирусов высокого риска входят специфические структурные белки-онкопротеины Е6 и Е9. Они способны инактивировать внутриклеточный иммунитет. Их особенно много в ВПЧ 16 типа. Вызывая генетическую нестабильность, онкопротеины ВПЧ 16 инициируют мутацию клеток, развитие интраэпителиальной неоплазии, рака шейки матки.
Дисплазия шейки матки или цервикальная интраэпителиальная неоплазия (ЦИН/CIN) – это нарушение структуры эпителиальных пластов цервикальной слизистой. Патологический процесс обусловлен аномальным размножением (пролиферацией) атипичных, трансформированных ВПЧ, клеток.
Цервикальная дисплазия – раннее проявление папилломавирусной инфекции, вызванной ВПЧ 16 и 18 типов.
Умеренная и тяжёлая дисплазия (ЦИН 2-3) – предраковое состояние. Без лечения к 40-49 годам на фоне возрастных изменений иммунитета она может малигнизироваться в клинически выраженный (инвазивный) рак. Злокачественное перерождение прогрессирует очень медленно, годами.
Своевременное выявление и адекватное лечение ЦИН полностью предотвращает развитие рака шейки матки.
Вот почему каждая женщина, ведущая половую жизнь, должна делать плановую скрининг-диагностику ВПЧ и сдавать мазок на онкоцитологию (ПАП-тест).
ДНК-диагностика ВПЧ 16 типа у женщин
Материалом для данного исследования служат: влагалищный мазок или цервикальный соскоб.
Есть два основных молекулярных метода выявления и верификации серотипов ВПЧ:
1. ПЦР — метод полимеразной цепной реакции.
Позволяет найти в исследуемом материале ДНК определённого типа ВПЧ. ПЦР-тест высокочувствителен. Он выявляет даже минимальное количество вирусного генетического материала.
Но!
По его результатам сложно отличить активный инфекционный процесс от безопасного латентного ВПЧ-носительства.
Расшифровка результатов ПЦР-теста на онкогенные ВПЧ 16/18 типов
| HPV 16/18, ДНК ПЦР-тест | Что значит? |
| Отрицательный | В биоматериале не найдено ДНК ВПЧ 16/18 типа: онкогенная ВПЧ-инфекция маловероятна. Повторный скрининг-тест через 2-3 года. |
| Положительный | В биоматериале обнаружены ДНК ВПЧ 16/18 типа. Рекомендовано: ПАП-тест + консультация специалиста. |
2. Метод гибридного захвата или ВПЧ Digene-Тест (НС2)
система двойной генной ловушки.
Преимущество Дайджен-теста перед ПЦР —
количественное определение клинически значимого уровня вирусной нагрузки.
Для выявления концентрации единственных серотипов ВПЧ 16/18 иногда используются ВПЧ-скрининг-тесты АмплиСенс ВПЧ 16/18-FL.
Клинически значимый (референсный) уровень вирусной нагрузки
| ВПЧ-тест | Пороговый уровень ДНК ВПЧ |
| Digene HPV-test | 1 pg/ml (или 105 копий ДНК ВПЧ в 1 мл) |
| ВПЧ тесты АмплиСенс | 3 lg на 105 клеточных геномов |
Расшифровка:
- «ДНК не обнаружено»
или
«-» результат отрицательный (концентрация ДНК ВПЧ меньше пороговой).
В биоматериале не найдено ДНК вируса или вирусная нагрузка клинически незначима.
Рекомендации: профилактическое посещение гинеколога 1 раз в год. Повторить ДНК ВПЧ-тест через 2-3 года.
- Результат «+» положительный:
Вирусная нагрузка превышает допустимый уровень.
Рекомендации: ПАП-тест, консультация специалиста, и, в случае необходимости, дальнейшее обследование.
Цитологическая диагностика ВПЧ 16 типа у женщин
Мазок на цитологию шейки матки = ПАП-тест.
Это исследование окрашенных мазков-отпечатков соскоба поверхности шейки матки под микроскопом.
Расшифровка:
- NILM — морфологически изменённых, атипичных клеток в мазке нет. Это значит, что ВПЧ-инфекции нет или она существует в безопасной латентной форме.
- КА, ASC, SIL — в мазке видны клетки шеечного эпителия, поражённые ВПЧ: койлоциты, дискератоциты (клетки плоского эпителия маленького размера с ороговевшей цитоплазмой), атипичные клетки, что указывает на субклиническое или клиническое течение ВПЧ.
По числу изменённых клеток в мазке, по выраженности атипии (многоядерность, деформация ядра, дистрофия цитоплазмы, др.) можно предположить степень цервикальной дисплазии: ЦИН1 – лёгкая, ЦИН2 – умеренная, ЦИН3 – тяжёлая, СIS – преинвазивная карцинома.
Подробно о ПАП-тесте: как берётся мазок на цитологию, жидкостная цитология, расшифровка цитологии — читайте в статье: Цитология шейки матки – что это такое, расшифровка, атипичные клетки.
Эндоскопическая диагностика ВПЧ 16 типа у женщин
Расширенная кольпоскопия — осмотр оболочек влагалища и шейки матки с помощью оптического прибора кольпоскопа после их обработки химическими веществами (проба с уксусной или салициловой кислотой, проба с раствором Люголя).
При визуализации участков изменённого эпителия пациентка направляется на прицельную биопсию шейки матки. Окончательный диагноз и тактику лечения устанавливают на основании гистологического исследования образца патологической ткани (биоптата).
Если у женщины обнаружено ВПЧ 16 типа – что делать?
Установлено, что присутствие сверхпороговых уровней ДНК ВПЧ у женщин в 99% сопровождается дисплазией эпителия шейки матки (ЦИН) разной степени выраженности.
Порядок действий при ВПЧ-тесте «+» (положительном):
Как лечить ВПЧ 16 у женщин
Медикаментозных, иных средств, для выведения из организма или полного уничтожения ВПЧ 16 не существует .
Поэтому лечение ВПЧ 16/18/… направлено не на искоренение вируса, а на разрушение и удаление поражённых им тканей, на восстановление, укрепление общего и местного иммунитета.
Другими словами, у женщин лечат не ВПЧ 16, а его клинические проявления, болезненные последствия: кондиломы, дисплазию ЦИН, рак шейки матки. Одновременно выявляют и по мере возможности устраняют причины ослабления или дефекта иммунитета.
Местное лечение кондиломатоза:
Физическая или химическая деструкция (разрушение) поражённой ткани:
— криодеструкция;
— лазерное лечение;
— диатермокоагуляция;
— электрохирургическое иссечение;
— Химические методы: солкодерм, трихлоруксусная кислота, подофиллотоксин (требуется консультация врача, есть противопоказания).
Иммунологические методы лечения ВПЧ 16/18/…:
Неспецифическая противовирусная терапия:
— препараты интерферонов а-, β-, γ-;
— препараты-индукторы эндогенного интерферона.
Режим и форму приёма интерферонов назначает врач.
Есть противопоказания и тяжёлые побочные эффекты.
Лечение дисплазии шейки матки (ЦИН):
ЦИН1 – динамическое наблюдение с повторным обследованием каждые 6 мес. Выявление и лечение сопутствующей ИППП. Если дисплазия не регрессирует, проводят криодеструкцию, лазерное лечение или хирургическое иссечение (конизацию) патологической ткани шейки матки.
ЦИН2/3 – лазерное лечение, конизация или ампутация шейки матки.
Сочетание любого варианта ЦИН с миомой, эндометриозом матки — радикальное удаление матки (экстирпация).
Возможно ли самоизлечение от симптомов ВПЧ 16 типа у женщин?
Да. В 50% случаев пороговая вирусная нагрузка, единичные кондиломы, незначительная атипия (КА, ASC-US), лёгкая дисплазия (ЦИН 1) регрессируют и разрешаются без лечения.
Пациенткам с пороговой патологией рекомендуется активное наблюдение, повторное обследование через 3 или 6 месяцев. Важна оптимизация образа жизни: отказ от курения, алкоголя, борьба с лишним весом. При необходимости назначается консультация иммунолога, лечение сопутствующих гинекологических, нейроэндокринных, соматических болезней.
Профилактика ВПЧ 16 типа у женщин
Презерватив не защищает женщину от заражения ВПЧ 16 типа в полной мере.
- Вакцинация (смотрите видео).
- Разумный выбор полового партнёра. Барьерная контрацепция (презерватив) снижает риск заражения ВПЧ.
- Ежегодное диспансерное гинекологическое обследование.
Вероятность заболеть раком шейки матки при «+» тесте на ВПЧ 16 типа
Отметим, что многозначный вопрос происхождения цервикального рака до сих пор не нашёл окончательного решения. Папилломавирусная инфекция – обязательное, но не единственное условие его развития.
Другими словами: все женщины, заболевшие раком шейки матки, были инфицированы ВПЧ высокого риска. Но очень немногие, инфицированные ВПЧ 16/18/… женщины, обязательно заболевают этим раком.
Совокупные риски развития рака шейки матки:
1. Генетическая предрасположенность.
Врождённо высокая чувствительность организма к папилломавирусам. Врождённо-низкий специфичный к ВПЧ противовирусный иммунитет.
2. Заражение инфекцией высокого риска: ВПЧ 16/18/… типов.
3. Вторичный иммунодефицит. Приобретённые дефекты иммунитета, снижение местной или общей резистентности организма.
4. Фоновые заболевания матки: полипы, гиперплазия эндометрия, миома, эндометриоз, кольпиты, цервициты.
5. Травмы шейки матки во время аборта, родов, приводящие к нарушению иннервации и питания цервикальных тканей.
6. Курение.
7. Длительный, неадекватный приём гормональных контрацептивов (КОК).
Нажмите «ЗВЕЗДОЧКУ» сверху 🙂
Источник
Вирус папилломы человека считается одним из наиболее распространённых заболеваний, включающих в себя более 100 различных типов. Большинство из них малоопасны для человека и при хорошем состоянии организма могут быть нейтрализованы работой иммунной системы. Однако существуют штаммы ВПЧ, вызывающие серьезные кожные поражения и отличающиеся высоким уровнем онкогенности:
Для выявления типов вируса существует процедура генотипирования, позволяющая не только диагностировать наличие инфекции, но и дать прогноз относительно развития заболевания. Благодаря этой процедуре лечащий врач может подобрать тактику лечения, подходящую для конкретного типа.
Что это такое
Под «генотипированием» понимается не конкретная процедура, а ряд диагностических мер, нацеленных на определение типа ВПЧ, концентрации вируса в организме. Тесты могут определить сразу несколько штаммов, что характерно для подобной инфекции. В таком случае обычно говорят о более сложном течении болезни.
Обычно диагностика не ограничивается только генотипированием: лечащим врачом также проводится внешний осмотр, при необходимости сдаётся кровь, у женщин выполняется кольпоскопия и т.д. Однако именно генотипирование является основным способом определить наличие ВПЧ. Такой метод очень чувствителен к минимальным изменениям в концентрации вируса, поэтому легко позволяет выявить отклонения.
Определение типа ВПЧ
Процедура диагностики проводится в несколько этапов. После консультации врачу необходимо подтвердить наличие вируса, и только после этого проводится типирование. Перед самим тестом пациенту предстоит пройти несколько процедур:
После подтверждения присутствия ВПЧ в организме врачом может быть назначен мазок или соскоб, необходимый для теста ПЦР.
В случае если инфекция уже проявила себя в виде новообразований, дополнительные методы диагностики обычно не применяются. В зависимости от обнаруженных вирусных штаммов назначается специфическое лечение, обычно включающее в себя удаление имеющихся наростов.
Особенности типов вируса
Все типы папилломавируса делятся на несколько больших групп, исходя из степени онкогенности, т.е. риска развития злокачественных новообразований. Чем более высокая степень, тем большему риску подвергается больной с уже имеющимися доброкачественными папилломами. Выделяют следующие классификации HPV (обозначение ВПЧ в анализах):
- Высокоонкогенные. Риск развития злокачественной опухоли в пораженной области очень высок. К таким типам HPV относятся 16, 18, 31, 33, 45, 50 штаммы. Они обычно проявляются остроконечными кондиломами, образующимися в области половых органов больного.
- Среднеонкогенные. Развитие злокачественной опухоли происходит примерно в половине случаев среди всех инфицированных. В эту группу входят 26, 30, 35, 65 штаммы.
- Низкоонкогенные. Эти типы ВПЧ обычно проявляются в форме бородавок, что считается довольно безвредным, хоть и неприятным косметическим дефектом. К ним относятся 6, 11, 13, 32, 40 штаммы. Развитие раковых заболеваний с такими формами вируса практически невозможно.
Среди всех типов HPV больше всего выделяются 16 и 18 штаммы. Они представляют наибольшую опасности для женщин: в 80% случаев у больных раком шейки матки был диагностирован один из этих типов ВПЧ. Такие формы вируса считаются наиболее агрессивными, поэтому при диагностировании требуют незамедлительного лечения.
Способы диагностики
Для проведения диагностики пациент может обратиться к гинекологу, урологу, проктологу, дерматологу или даже к терапевту, если не уверен в природе появления своих наростов. Врач может дать первичное заключение, исходя из внешних признаков проявления вируса, однако для прояснения деталей назначаются разные типы исследований. К ним относятся:
- Кольпоскопия. Благодаря кольпоскопу гинеколог способен многократно увеличивать изображение, показывающее слизистую оболочку половых органов изнутри. Процедура позволяет детально рассмотреть влагалище и шейку матки, благодаря чему врач может заметить появление даже мелких новообразований. Особенности протекания ВПЧ таковы, что наросты могут образовываться даже на внутренних половых органах, поэтому исследование кольпоскопом является обязательным этапом диагностики.
- Цитология. Этот метод исследования основан на взятии мазка с пораженной оболочки места воздействия вируса. После забора мазок исследуется под микроскопом и проверяется на наличие злокачественных клеток. Результаты цитологии расшифровываются следующим образом: 1-2 группа говорит об отсутствии патологии, 3 показывает необходимость других исследований, так как диагноз под сомнением, 4-5 группа свидетельствует о наличии злокачественных изменений.
- Гистология. Для процедуры также берут частичку биоматериала с определенного участка тела, после чего данные исследуются под микроскопом. Отличие этого метода от предыдущего в том, что анализу подвергается не мазок, а небольшой кусочек нароста. Так можно более наглядно увидеть, происходят ли онкологические изменения на конкретном участке.
- ПЦР-диагностика. Один из наиболее распространенных анализов, основанный на взятии мазка из влагалища или уретры. Метод считается довольно чувствительным и позволяет выявить не только наличие вируса, но и определить конкретные штаммы. Также ПЦР тест используют для отслеживания концентрации вируса, что помогает увидеть, насколько эффективным было лечение.
- Digene test. Предназначен преимущественно для скрининговых обследований женщин, так как эффективно выявляет предраковое состояние. Материал для забора – мазок, взятый из влагалища. Также тест может использоваться в качестве дополнительного исследования, уточняющего результаты других тестов.
Каждый тест необходимо выполнять только под наблюдением специалиста. При несоблюдении правил проведения диагностики существует вероятность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата, причем последний встречается чаще.
Видео от нашего практикующего дерматовенеролога:
Особенности обследования у мужчин и женщин
Принцип действия каждого теста генотипирования одинаков и основан на заборе небольшого количества клеток с пораженного места. Различается только способ забора материала. Женщины обычно сдают на анализ соскоб, берущийся из шейки матки. Такой материал считается самым информативным, в отличие от соскоба из влагалища. Для этого врач берет небольшую щетку, щетинки которой предназначены специально для забора материала из цервикального канала.
После этого материал отправляется на изучение в лабораторию. Такая манипуляция не должна причинять женщине неудобства. Единственным противопоказанием для неё является наличие менструации.
Материал для изучения у мужчин берется из уретры. С помощью небольшого зонда врач берет соскоб эпителия, который после извлечения остается на специальном стекле. В таком виде анализ отправляется на исследование. При диагностике ВПЧ мужчинам обычно назначают тест ПЦР.
Принцип лечения
Полное излечение пациента от папилломавируса невозможно даже при грамотном, своевременно назначенном лечении. ВПЧ всегда будет присутствовать в организме в скрытой форме и сможет проявить себя в виде рецидива на фоне сильного стресса или ослабленного иммунитета. Поэтому принципы терапии основаны не на полном излечении инфекции, а на минимизировании последствий инфицирования. В рамках терапии для этого используется:
- удаление всех новообразований (конкретный способ пациенты должны обговаривать с лечащим врачом, так как разные типы наростов требуют разных подходов);
- применение иммуностимулирующих средств;
- назначение противовирусных препаратов.
В совокупности все эти методы помогают держать под контролем концентрацию вируса в организме, а регулярное генотипирование отслеживает вирусную нагрузку.
Лечение важно проводить исключительно под контролем врача, так как необходимо смотреть на реакцию организма, которому могут не подойти назначаемые лекарства. Домашнее самолечение в виде прижигания папиллом, использование чистотела и т.д. может оказаться очень опасным. Больной может не знать, что его новообразование переродилось в злокачественное, а самостоятельная попытка удалить раковые клетки может привести к летальному исходу.
Цена на анализы
Стоимость процедур зависит от места проживания и может существенно разниться от региона к региону. Усредненные цены на диагностику вируса выглядят следующим образом:
- количественный ПЦР тест с определением 12 генотипов вируса – 600-800 рублей;
- идентификация отдельно взятых штаммов ВПЧ – 250-350 рублей;
- кольпоскопия – 900-1400 рублей;
- цитология – 700-1200 рублей;
- Digene-тест на определение высокоонкогенных штаммов вируса – 5000-6000 рублей;
- гистологическое исследование – 2000-3000 рублей.
Подбирать способ диагностики больному следует совместно с лечащим врачом, так как каждая ситуация требует индивидуального рассмотрения. Кроме того, необходимо через некоторое время повторно провести диагностику для анализа качества проведенного лечения.
Источник
