Онкобелки впч е6 и е7
Описание исследования на онкобелок Е7
Один из этапов комплексного диагностического обследования женщин при оценке вероятности формирования рака шейки матки состоит в выявлении онкобелка Е7, синтезируемом вирусом папилломы человека.
О вирусе папилломы человека и его онкобелке Е7
- процесс инфицирования вирусом папилломы человека (ВПЧ) – явление чрезвычайно распространенное, чреватое серьезными последствиями, прежде всего, в отношении развития злокачественных новообразований в шейке матки (ШМ) у женщин;
- процесс инфицирования может не вызывать каких-либо патологий, сопровождаться хроническим носительством вируса, быть причиной возникновения опухолевого заболевания;
- последствия инфицирования зависят от типа ВПЧ, его онкогенного потенциала;
- самыми опасными с позиции возникновения необратимых форм неоплазии являются 16 и 18 типы вируса;
- тканью-мишенью для ВПЧ являются эпителиальные клетки ШМ;
- при внедрении ДНК ВПЧ в клетки эпителия и интеграции ее в геном имеет место размножение вируса, сопровождаемое синтезом белков;
- онкобелок Е7 – один из синтезируемых вирусом продуктов, ответственный за его онкогенные свойства;
- белок обнаруживается в клетках эпителия, претерпевших инфицирование, от начала неопластической трансформации и до этапа возникновения рака ШМ, поэтому может быть использован в качестве онкомаркера;
- в нормальных эпителиальных клетках, не претерпевших интеграции вируса, белок Е7 не синтезируется и не обнаруживается.
Описание анализа
- заключается в выявлении белка Е7, являющегося онкомаркером ВПЧ16 и18 типов, в материале соскоба с ШМ или из цервикального канала (урогенитальный соскоб), помещенном в стабилизирующий раствор;
- анализ осуществляется с помощью метода иммуноферментного исследования биологического материала с применением специально разработанных тест-систем;
- является чувствительным и специфическим тестом, свидетельствующим о факте включения ДНК вируса в геном эпителиальных клеток ШМ, начале процесса опухолевой трансформации;
- при злокачественных преобразованиях в ШМ, не связанных с ВПЧ, онкобелок Е7 не обнаруживается;
- применяется как прогностический и диагностический тест.
Сдача урогенитального соскоба в качестве материала для исследования должна происходить в период, предшествующий менструации, либо спустя пару дней после ее завершения.
Показания к проведению анализа
- проведение скрининговых комплексных обследований, охватывающих женщин с патологиями ШМ;
- осуществление диагностических мероприятий, имеющих целью раннее выявление опухолевого процесса в ШМ и оценку риска его развития у женщин, инфицированных ВПЧ;
- реализация контроля лечебного курса при терапии патологий ШМ, которые ассоциированы с инфицированием ВПЧ16 и 18.
Результаты анализа и их интерпретация
- отрицательные данные – свидетельствующие о невыявлении онкомаркера Е7 в пробах урогенитального соскоба, являются нормальными, трактуются как отсутствие в данный период времени вероятности возникновения рака ШМ при подтвержденном инфицировании ВПЧ16 и18;
- положительные данные – выявление онкомаркера Е7 в пробах урогенитального соскоба, свидетельство наличия высокой вероятности возникновения рака ШМ.
Повышение уровней данного онкомаркера отражает начало неопластического процесса в ШМ.
Продемонстрирована корреляция уровня обнаруживаемого онкобелка Е7 и степени агрессивности процесса опухолеобразования;
Источник
Рак шейки матки – спящий агрессор
Рак шейки матки (РШМ) характеризуется очень высоким уровнем смертности. Каждая третья женщина, страдающая онкологическим заболеванием, умирает именно от рака шейки матки. Отчасти такие печальные цифры обусловлены трудностью диагностики и недостаточным вниманием женщины к своему здоровью.
Риск развития опухоли сильно возрастает после 30 лет. Обычно развитие опухоли занимает 10-20 лет с длительной стадией предрака без каких-либо симптомов, однако существуют агрессивные формы, которым хватает 1-2 года. Вылечить развившийся рак крайне сложно, а на поздних стадиях зачастую невозможно. Поэтому каждой женщине жизненно необходима ранняя диагностика и своевременная профилактика рака шейки матки.
Основная причина развития рака шейки матки – вирус ВПЧ
Доказано, что основной причиной развития рака шейки матки является инфицирование вирусом папилломы человека (ВПЧ). Этот вирус широко распространен, передается половым путем и поражает слизистую оболочку шейки матки. Носительство вируса на ранних стадиях инфицирования никак не проявляется.
Риску стать носителем ВПЧ подвержена любая женщина, ведущая половую жизнь.
В большинстве случаев после заражения ВПЧ элиминируется в течение нескольких месяцев, однако в ряде случаев инфекция может перейти в хроническую форму. Это зависит от состояния иммунитета хозяина, что на 30% обусловлено наследственными факторами (генетикой) и особенностями самого вируса.
Разнообразие ВПЧ
Существует более 100 различных типов ВПЧ, которые объединяются в 2 основные группы по степени онкориска (высокий и низкий). В России наибольшую опасность представляют 16-й и 18-й типы ВПЧ из группы высокого онкориска (к которым уже создана профилактическая вакцина Гардасил). Также стоит иметь ввиду, что возможно одновременное инфицирование сразу несколькими типами ВПЧ.
Как ВПЧ вызывает РШМ?
При определенных условиях вирус папилломы высокого онкориска после проникновения в клетку шейки матки способен встраиваться в ДНК (интегрироваться). Затем вирус начинает продуцировать онкобелки E6/E7, которые нарушают работу противоопухолевых белков, и клетки шейки матки начинают бесконтрольно делиться. В результате этого процесса образуется опухоль.
Как определить риск развития рака шейки матки?
Как известно, болезнь проще предотвратить, чем вылечить, тем более рак.
Благодаря современным методам исследований в лаборатории МедЛаб существует возможность раннего выявления пациентов, инфицированных ВПЧ. Методом полимеразной цепной реации (ПЦР) и ПЦР в реальном времени проводится определение типов вируса, количества, интеграции, а также определение риска развития рака шейки матки, обусловленного наследственными факторами (генетикой).
Для анализа на носительство ВПЧ абсолютно безболезненно берется урогенитальный соскоб. Если женщина ведет половую жизнь, необходимо проводить тесты на ВПЧ с определением типа вируса как минимум ежегодно. Оптимальный набор анализов на ВПЧ собран в комплекс ДНК-типирование ВПЧ с вирусной нагрузкой и онкобелками E6/E7 (комплекс RT-PCR)
Для генодиагностики берется кровь из вены на генетический профиль ГП9 Рак шейки матки — 5 генов предрасположенности. Тест проводится однократно и его результаты актуальны всю жизнь. Если уровень индивидуального риска развития РШМ оказался высоким – пациентка будет определена в группу риска, а предупрежден – значит вооружен!
Вирус найден. Что дальше?
- В случае обнаружения типов ВПЧ высокого онкориска рекомендуется повторно определить его тип, количество (вирусную нагрузку) и интеграцию.
- Если вирусная нагрузка невелика – требуется мониторинг, т.е. повторные анализы не реже чем раз в полгода.
- При высоких значениях вирусной нагрузки врач может назначить иммуномодулирующие и другие препараты для элиминации вируса. После лечения обязателен мониторинг.
ВПЧ можно вылечить как простую простуду и предотвратить рак – главное знать!
Источник
Онкогенные типы ВПЧ вызывают рак шейки матки, но заболевают не все?!
Этот постулат верен, но как определить заболеет та или иная женщина раком шейки матки или нет. Всем известно, что онкогенные вирусы ВПЧ поражают шейку матки и вызывают злокачественное перерождение тканей, но при этом сложно определить, сколько пройдет времени между инфицированием и дисплазией-началом процесса малигнизации.
{jb_info}Этот вопрос не столь важен для пациенток старшего возраста, так как уже малейшие изменения в шейке матки, выявленные при кольпоскопии или цитологическом исследовании, могут служить поводом к проведению радиоволновой деструкции. Ведь единственным осложнением данной манипуляции может служить рубцовая деформация шейки матки, что абсолютно ни на что не влияет, если женщина не планирует детей.
{/jb_info}
К сожалению, рак шейки матки, болезнь молодых, а в этом возрасте подобные изменения могут привести к невынашиванию беременности, частым выкидышам, в том числе на поздних сроках и тяжелым разрывам шейки матки в родах. Поэтому данная «активная» тактика не может быть применена к женщинам молодого репродуктивного возраста.
Кольпоскопия, цитология и гистологическое исследование после биопсии шейки матки могут помочь определить уже совершившиеся изменения, и гипотетически предположить ход дальнейшего течения болезни. Ведь процесс трансформации от начальных проявлений до рака может длиться годами и десятилетиями.
При наличии дисплазии степеней 2,3, тем более Cainsitu, дальнейшая тактика уже вопросом не является, в данной ситуации помогут только деструктивные методы.
Сложнее дело обстоит с незначительными изменениями, например лейкоплакии или дисплазии 1.
Все это определяет необходимость поиска новых методов диагностики, которые позволили бы выявить, как долго у данной конкретной пациентки будет развиваться процесс трансформации здоровых клеток в раковые, для своевременного принятия решения о дальнейшей тактике, наблюдении или деструкции.
Онкобелки
В настоящее время выявлены структуры, которые сопровождают процесс озлокачествления, способные служить маркерами активности данного процесса. Самым важным из них на сегодняшний день является Онкобелок Е7.
Экспрессия белка Е7 играет ключевую роль в репликации ВПЧ.
В последние годы предпринимаются небезуспешные попытки создания противовирусных препаратов, направленных на подавление функций онкобелка Е7.
- На сегодняшний день профилактику неопластических процессов шейки матки возможно проводить здоровым женщинам с наличием латентной формы ВПЧ-инфекции, особенно в тех случаях, когда в цервикальном материале определяется Е7, даже при отсутствии каких-либо изменений на шейке матки.
Наличие данного белка может свидетельствовать о том, что на биохимическом уровне процесс малигнизации запущен и требует “активной” тактики в отношении таких пациенток, а не “пассивного” наблюдения.
- Еще одним важнейшим путем применения данной диагностики является контроль после лечения шейки матки.
При этом, оставшийся в тканях после применения деструктивных методов, ВПЧ, являясь сильнейшим канцерогеном, вновь может провоцировать развитие неопластических процессов в цервикальном эпителии путем интеграции в клетки и выработки онкобелков. Поэтому при наблюдении за женщинами, перенесшими хирургическое лечение, включая криотерапию и лазеровапоризацию по поводу диспластических процессов шейки матки, целесообразно определять концентрацию онкобелка Е7. Наличие Е7 должно являться показанием к проведению этиопатогенетической и противорецидивной терапии.
Некоторые вопросы о онкобелке Е 7 и диагностике рака шейки матки
Вопрос: положительный Е7 у меня вот какая ситуация:впч 16 положительно в количестве 5,02 (это после лечения!) и онкобелок Е7 положительно. Дисплазии, говорят нет. А каким анализом определяется дисплазия? кольпоскопия тоже не показала изменений. биопсию не делали, потому что говорят: нет видимых изменений, не понятно, откуда брать биопсию. есть видимо эрозия. мне предлагают вырезать с помощью радиоволнового метода.мы хотели завести второго ребенка, но врач говорит, что нужно сначала операцию произвести..меня удивляет, что собираются резать, но при этом биопсию “взять не от куда”. что вы думаете? неужели едиственный выход – операция?
Ответ: Здравствуйте. В любой спорной ситуации, тем более, когда речь идет о вмешательстве на уровне радиоволнового лечения, лучше подобные вопросы решать на очной консультации. Подтвердить или опровергнуть наличие дисплазии можно только путем биопсии с последующим гистологическим исследованием. Для определения места забора материала используется метод прицельной биопсии при расширенной видеокольпоскопии, если изменений нет, то ткани можно также забрать из различных участков шейки матки, есть методики, при которых травматизация шейки минимальна.
Онкобелок и ВПЧ говорят о наличии в организме условий для развития онкологических процессов в шейке матки, а не о их наличии, то есть предпосылки развития, а не сама болезнь.
Если вы планируете беременность в ближайшее время и нет данных за наличие дисплазии или рака, то нет смысла в выполнении радиоволнового лечения, тем более, что при этом не достигается излечение от ВПЧ, метод предполагает иссечение измененых тканей шейки матки, но если нужно просто вылечить “эрозию”, то, конечно, выбор в данной ситуации за лазеровапоризацией.
Вопрос: У меня выворот шейки матки врожденный (это кажется называется эктропион). с такой шейкой я уже родила одного ребенка. но сейчас на фоне высокой активности ВПЧ16 и наличия Е7 врач говорит, что велика вероятность рака во время беременности… мне это очень сомнительно при том, что в норме кольпоскопия, флора и цитология. а если сделать радиоволновую эксцизию, то ведь насколько я понимаю и беременность можно будет планировать уже через месяц, и эксцизия будет считаться и прицельной биопсией, ведь так? или все-таки лучше сделать отдельно биопсию (разве радиоволновая хирургия не самая щадящая? так хорошо про нее пишут) и расширенную кольпоскопию (как я понимаю, эти две процедуры будут совмещены?). и при хороших результатах оставить шейку в покое до послеродов? и еще вопрос: могут ли быть изменения в шейки выше того места, куда дотягивается кольпоскоп? и как о них узнать? может УЗИ?
Ответ: Эктропион-показание к деструкции. Вопрос в сроках. Эксцизия-удаление значительной части шейки матки. Тактика и решение о деструкции может быть принято с учетом прицельной биопсии, данных кольпоскопии, цитологического и гистологического исследования. Процесс малигнизации длится годами.
Вопрос: Положительный Е7. подскажите пожалуйста, является ли положительный онкобелок Е 7 для ВПЧ 16 показанием для эксцизии? если кольпоскопия изменений в шейке не показывает, мазок в норме, цитология в норме (в связи с этим отказываются делать биопсию
Ответ: Здравствуйте. Не является. Наличие этого белка свидетельствует о высоком риске развития у вас рака шейки матки, но необходимо заметить, что даже от этапа дисплазии до рака шейки матки могут пройти годы или десятилетия. Если противовирусная терапия неэффективна, то в любом случае деструктивные методы вам показаны.
Вопрос когда, в репродуктивном возрасте особенно важно сохранить целостность шейки матки, так как это влияет на вынашивание беременности, поэтому предпочтение отдается малотравматичным методам или динамическому наблюдению. Эксцизия в данной ситуации самый простой способ, но и самый травматичный.
Если мы говорим о старшем возрасте, тогда желательно провести эксцизию, причем обширную, с обязательной противовирусной терапией и дальнейшим наблюдением не дожидаясь цитологической или гистологической верификации дисплазии.
В любом случае формально без какого-либо диагноза, а просто опираясь на лабораторные показатели, проводить то или иное вмешательство нельзя.
Определить наличие дисплазии, ее степени или тем более рака шейки матки можно только путем цитологического и гистологического исследований.
Автор: специалист по патологии шейки матки, врач высшей квалификационной категории, Никитина О.А.
Комментарии ()
Rated 0 out of 5 based on 0 voters
Оставьте свой комментарий
Источник
Метод определения
Гистологическое исследование биоптатов шейки матки согласно гистологической классификации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) с окрашиванием гематоксилином-эозином. ИГХ-исследование индекса пролиферативной активности с применением моноклональных антител к Ki-67 (MIB-1) и белку p16INK4a (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).
Исследуемый материал
Биоптат опухоли, фиксированный в парафиновом блоке
Комплексное исследование биоптатов шейки матки, включающее морфологическое описание и гистохимическую оценку экспрессии p16INK4a для уточнения биологического потенциала диспластических изменений в эпителии шейки матки.
Рак шейки матки
является превалирующим среди онкологических заболеваний у женщин и остается одной из важных медицинских и социальных проблем в экономически развитых странах. Ежегодная статистика первичной выявляемости рака шейки матки составляет 10-12 случаев на 100 тысяч женщин. От стадии и распространенности опухоли на момент выявления зависят возможности терапии и прогноз выживаемости.
Своевременное распознавание и корректное лечение предраковых процессов шейки матки имеют существенное значение в связи с локальным характером прединвазивной и микроинвазивной стадий рака шейки матки. Удаление опухоли в таких случаях приводит не только к полному выздоровлению больных в ряде случаев, но и к репродуктивной, психоэмоциональной и социальной реабилитации женщин. Проведение органосохраняющего лечения рака шейки матки является новым направлением в современной онкогинекологии.
В настоящее время доказано, что основным этиологическим фактором в индуцировании и развитии рака шейки матки является вирус папилломы человека (ВПЧ). Однократное выявление ВПЧ в эпителии шейки матки недостаточно информативно. Подавляющее большинство ВПЧ-инфекций являются скоротечными и существенно не влияют на механизмы роста эпителиальных клеток, организм способен избавиться от ВПЧ-инфекции в течение 6-12 месяцев. Однако небольшая доля инфицирования определенными типами ВПЧ может сохраняться и в отсутствие лечения приводить к малигнизации процесса. Патологический процесс протекает бессимптомно. В результате интеграции ВПЧ в геном эпителиальных клеток, в ядрах клеток происходит репликация вирусных онкобелков Е6 и Е7, которые могут вызвать неопластическую трансформацию с нарушением регуляции клеточного цикла.
Белок p16INK4a представляет собой ингибитор циклин-зависимых киназ и играет важную роль в регуляции клеточного цикла эукариот. Этот белок участвует в опосредованном через белок ретинобластомы (pRB) контроле перехода клетки из фазы G1 в фазу S, он подавляет опухолевый рост; повышенная экспрессия p16INK4a может запускать остановку цикла клеточного деления. Многие виды опухолей характеризуются инактивацией гена p16INK4a, что приводит к нарушению регуляции клеточного цикла и бесконтрольной пролиферации клеток. Но в опухолях, связанных с трансформирующим действием ВПЧ, отмечается увеличение экспрессии данного белка. Экспрессия белка p16INK4a реактивно увеличивается при росте количества вирусных онкобелков ВПЧ Е6 и Е7. При этом повышение экспрессии p16INK4a оказывается неэффективным для регуляции клеточного цикла, поскольку онкобелки ВПЧ действуют на уровне белка ретинобластомы. Повышение экспрессии p16INK4a применительно к этому виду опухолей рассматривают как косвенный признак интеграции ВПЧ высокого риска в геном и трансформации эпителиальных клеток под действием ВПЧ.
Антиген Кi-67, впервые описанный Gerdes и соав. в 1983 г., состоит из 2 полипептидных цепей с молекулярной массой 345 и 395 кДа. Это основная часть нуклеарного матрикса в интерфазе, ассоциирующаяся с хромосомами фазы митоза. Ki-67 является димерной молекулой, имеющей тесную связь с 10-й хромосомой, но конкретная роль этого протеина в процессе клеточного деления до сих пор неизвестна. Экспрессия Кi-67 позволяет выделить опухолевые клетки, находящиеся в активной фазе клеточного цикла на всем его протяжении (G1-, S-, G2- и M-фазы), кроме G0-периода.
Пролиферативная активность опухолевых клеток представляет собой «фракцию роста» новообразования и является ведущим фактором как в механизме злокачественной трансформации клеток, так и в биологическом поведении уже возникших опухолей. Пролиферативная активность опухоли − одна из наиболее важных характеристик ее фенотипа, в значительной степени определяющая скорость роста новообразования, способность его к метастазированию, к ответу на лечебные мероприятия и исход онкологического заболевания. Многие факторы, влияющие на течение и исход онкологических заболеваний, свое патогенетическое действие на опухоль опосредуют через изменение пролиферативной активности.
Гистологическая диагностика интраэпителиальной цервикальной неоплазии (CIN) исторически основывалась только на морфологической оценке метаплазированного эпителия и определении цитопатического воздействия ВПЧ. Рутинные гистологические методы не лишены субъективности оценки и иногда приводят к ложно-положительным или ложно-отрицательным диагнозам, что значительно сказывается на тактике прогноза и ведения пациентов. ИГХ-определение индекса пролиферации при исследовании экспрессии Ki-67 (MIB-1) является необходимым рутинным исследованием при любой онкопатологии. При дисплазиях умеренной и высокой степени (в 80–100% случаев CIN II и практически во всех случаях CIN III) и инвазивном раке шейки матки иммуногистохимически определяется усиленная экспрессия белка p16INK4a. ИГХ-определение экспрессии белка p16INK4a, в сопоставлении с индексом пролиферативной активности (экспрессия Ki-67), является одним из важных критериев для дифференциального диагноза дисплазии умеренной и высокой степени тяжести (CIN II и III) и начальных форм рака шейки матки (Аdenocarcinoma in situ, микроинвазивная аденокарцинома).
Источник
