Как определяется вирус впч
ВПЧ рассматривают, как предрасполагающий фактор рака шейки матки, а также как провокатора других видов рака: полового члена, ротоглотки, прямой кишки. Ежегодная мировая заболеваемость около 1,5 млн.
Общая распространенность вируса папилломы человека в общей популяции среди женщин составляет 10%, среди мужчин – 20%.
Оглавление:
Методы диагностики ВПЧ-инфекции
ПЦР
Кольпоскопия у женщин
Цитологическая диагностика ВПЧ
– Мазок Папаниколау, ПАП-тест
5. Биопсия
6. Гистологическое обследование
7. Кому необходимо обследоваться на ВПЧ
Обратите внимание
ВПЧ-инфекция чаще встречается у сексуально активных молодых женщин и мужчин в возрасте от 16 до 25 лет.
Около 50% мужчин с нетрадиционной сексуальной ориентацией, практикующие анальный секс, подвержены риску развития плоскоклеточной карциномы, которой предшествовали аноректальные бородавки.
Для гетеросексуальных мужчин и женщин данный риск составляет 20%.
Наиболее значимым предиктором для инфицирования ВПЧ у мужчин или женщин считается количество сексуальных партнеров.
Около 189 генотипов ВПЧ классифицированы в соответствии с их биологической нишей и онкогенным потенциалом. Из них около 40 могут поражать урогенитальный тракт.
Категория риска | ВПЧ-типы |
Высокий риск | 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,73,82 |
Низкий риск | 6,11,40,42,43,44,54, 61,70,72, 81, 83, 89 |
Неопределенный риск | 26, 53, 66 |
У женщин с инвазивным раком шейки матки чаще диагностируются типы ВПЧ
16,18,33,45,31 и 58, но при этом клинический исход может различаться.
В последнее время набирает популярность прививка от ВПЧ-инфекции, но, по мнению специалистов, вакцинация не освобождает от регулярного посещения врача. Есть данные, что эффект ослабевает через 15-20 лет, кроме этого, стоит учитывать роль других неизученных генотипов вируса, на которых нет действия вакцины.
Методы диагностики ВПЧ-инфекции
Отметим, что диагноз можно заподозрить при визуальном осмотре, во время которого определяют локализацию поражений и клинические проявления папилломавирусной инфекции.
Для диагностики ВПЧ используют множество способов:
- цитологический метод (ПАП-тест);
- жидкостная цитология;
- расширенная кольпоскопия;
- уретроцистоскопия;
- ПЦР (полимеразно-цепная реакция, подтверждает присутствие ДНК вируса папилломы человека);
- определение вирусной нагрузки (ВПЧ-Digene-тест), ПЦР в режиме реального времени — способы для выявления количества копий ДНК-онкогенных вирусов;
- морфологическое исследование;
- онкомаркеры с определением онкобелков р16, ki67, mcm2, mcm7 и пр.
ПЦР-диагностика ВПЧ
ПЦР-диагностика может быть качественной и количественной (ПЦР в режиме реального времени, ВПЧ-Digene-тест).
Важно
В настоящее время скрининг рака шейки матки и раннее выявление инфекции признаны самым эффективными мерами для борьбы с раком шейки матки.
Необходимо отметить, что качественное определение ВПЧ малоинформативно, так как позволяет только подтвердить инфицирование, поэтому для решения вопроса о необходимости терапии и у мужчин, и у женщин с клиническими проявлениями лучше выполнить ВПЧ-Digene-тест, который выявит концентрацию вируса.
При выполнении полимеразно-цепной реакции используют типо- и видоспецифичные праймеры, которые дают количественную оценку риска присоединения малигнизации (озлокачествления). Определение вирусной нагрузки — основная цель этих анализов.
Если уровень ДНК ВПЧ выше 5 000 геномов — вероятность развития рака высокая, показано проведение терапии, направленной на подавление активности ВПЧ. Менее 3000 геномов – риск низкий.
ПЦР-диагностика позволяет обнаружить все онкогенные типы вирусов у мужчин и женщин
Помимо обследования на ВПЧ, в обязательном порядке проводят диагностику на ЗППП, ВИЧ, эти заболевания рассматриваются, как кофакторы папилломавирусной инфекции.
Поскольку связь между ВПЧ и раком шейки матки, раком полового члена и прямой кишки доказана, обосновано проведение молекулярных методов для обнаружения ДНК ВПЧ в биоматериале. Используют следующее:
- влагалищное отделяемое и экссудат шейки матки у женщин;
- уретральный соскоб у мужчин;
- сперма;
- анальные выделения;
- глоточную слизь;
Итальянскими учеными проводилось исследование, которое продемонстрировало, что ПЦР-диагностика (88-100%) является более эффективной, по сравнению, с цитологией (34-86%), для предотвращения инвазивного рака шейки матки.
Специфичность ВПЧ-тестирования (82-97%) считается выше специфичности цитологии(78-99%).
У большинства людей папилломавирусная инфекция саморазрешается без применения лекарственных средств. Но у женщин старше 30 лет ВПЧ редко устраняется спонтанно, поэтому в рамках онконастороженности рекомендовано регулярное обследование, которое в РФ согласно действующим приказам выполняется 1 раз в год.
В некоторых зарубежных странах, если результат ПЦР-анализа на папилломавирус и цитология при обследовании женщины отрицательны, интервал для прохождения обследования — 1 раз в 3 года, в случае отрицательной цитологии, но положительных результатах полимеразно-цепной реакции на ВПЧ высокоонкогенных типов проводится ежегодное обследование с кольпоскопией.
Мужчины ежегодно проходят осмотр у уролога, при подозрительных на папилломавирусную инфекцию образованиях, обоснована консультация дерматовенеролога.
Важно
По показаниям, особенно, если есть подозрение на перерождение в злокачественную опухоль, возможно выполнение биопсии.
Кольпоскопия у женщин
Кольпоскопия – наиболее доступный метод диагностики для женщин, результаты которого позволяют делать выводы о необходимости продолжения обследований.
Важно
Исследования доказали, что 99-100% случаев рака шейки матки связаны с высокоонкогенными типами вируса папилломы человека.
Во время расширенной кольпоскопии проводят обработку шейки матки раствором Люголя или уксусной кислотой, при взаимодействии с которыми появляется следующее:
- побеление эпителия;
- мозаичность;
- точечность;
- атипичная зона трансформации.
После окраски раствором Люголя видоизмененный участок на фоне ВПЧ приобретает вид «манной крупы».
При цитологическом исследование ведущие признаки инфекции — присутствие клеток с койлоцитозом и дискератозом, что свидетельствует в пользу CIN.
Цитологическая диагностика ВПЧ
Материал забирают с помощью специальной щеточки. У женщин – соскоб с подозрительного участка шейки матки, у мужчин – из уретры, определяют тип, количество и изменение клеток слизистой.
Мазок Папаниколау, Пап-тест и жидкостная цитология
Мазок Папаниколау — неинвазивное исследование, применяемое в гинекологической практике, позволяет диагностировать рак шейки матки и эндометрия на ранних стадиях, до развития клинических проявлений. Цель – обнаружение атипичных клеток, подозрительных на опухолевый процесс. При стандартном Пап-тесте полученный с помощью цитощетки материал окрашивается и исследуется под микроскопом.
Скрининговое исследование для выявления рака было разработано в 1940 г. Г.Папаниколау, верифицирует отшелушенные клетки, подозрительные на рак или предрак.
Анализ на основе жидкостной цитологии – разновидность Пап-теста, более современный и эффективный метод для диагностики ВПЧ. При проведении исследования биоматериал помещают не на предметное стекло, а в специальный жидкий консервант.
Биопсия
Прицельная биопсия шейки матки и выскабливание слизистой цервикального канала с последующим гистологическим исследованием выполняются при:
- обнаружении атипичных клеток по результатам цитологии,
- при высокоонкогенных типах ВПЧ с изменениями, выявленными с помощью кольпоскопии,
- при явных признаках патологии без учета результатов тестов на ВПЧ.
У мужчин возможно выполнение биопсии при подозрительных на ВПЧ новообразованиях. Если кондиломы располагаются в глубине уретры, материал для биопсии берется во время уретроскопии.
Гистологическое обследование
Гистология при ВПЧ – способ диагностики, при котором специальным образом обработанная ткань папилломы изучается под микроскопом. Исследование информативно на 100% для подтверждения озлокачествления.
Гистологические проявления:
- экзофитные плоские кондиломы с дискератозом и акантозом,
- изменения цитоплазмы плоского эпителия,
- СIN,
- рак шейки матки,
- рак полового члена,
- аноректальный рак.
Было предложено несколько вариантов контролирования папилломавирусной инфекции. В первом случае, используют цитологическое исследование, во втором с помощью ПЦР-диагностики выясняют, является ли ВПЧ транзиторной. Для этого назначают ПЦР-анализ повторно через 6 месяцев.
Кому необходимо обследоваться на ВПЧ
Качественные анализы чаще используются для массовых обследований с целью профилактики, количественные назначают при появлении клинической картины, подозрительной на инфицирование ВПЧ.
Помимо этого, показания к сдаче анализов на ВПЧ следующее:
- незащищенный «случайный» половой контакт;
- контроль эффективности терапии;
- обнаружение ИППП;
- отягощенный гинекологический анамнез;
- ВИЧ-инфицирование;
- планируемая беременность;
- наличие более одного сексуального партнера.
Женщинам репродуктивного возраста рекомендовано сдавать анализ на ВПЧ 1 раз в 3-5 лет.
Какая именно требуется диагностика – подскажет врач.
Обследование мужчин на ВПЧ обосновано только при клинических проявлениях, иногда проводят диагностику при отягощенном акушерско-гинекологическом анамнезе у партнерши.
Мишина Виктория, уролог, медицинский обозреватель
9,707 просмотров всего, 1 просмотров сегодня
Загрузка…
Источник
Дерматологи, инфекционисты и вирусологи часто сталкиваются с диагностикой папилломовирусной инфекции. В последнее время количество заболеваний, которые провоцирует данный вирусный агент, увеличилось многократно, причем в большинстве случаев вирус регистрируется у женщин. Ниже будут рассмотрены основные виды диагностики ВПЧ.
Что это за заболевание
ВПЧ (вирус папилломы человека) – это вирусное семейство, которое провоцирует появление папиллом, бородавок, дисплазии, а также может давать толчок для развития онкозаболеваний половых органов (шейки матки).
В современном мире ВПЧ является самой распространенной вирусной инфекцией половых органов. Медикам известно более 100 штаммов ВПЧ, среди которых 30 относятся к вирусам высокоонкогенного типа, на долю остальных приходятся вирусы средней и низкой онкогенности.
Важно!
Достоверно установлено, что человек может быть носителем штамма высокой онкогенности, но злокачественная патология может развиваться только при сочетании набора определенных факторов.
Заразиться вирусом папилломы можно не только половым путем, но и при бытовом контакте с носителем или через общие предметы быта. Кроме того, не исключен риск передачи вируса от зараженной матери к плоду.
По статистическим данным, вирусом папилломы заражено 80% населения земли. Следовательно, шанс инфицирования очень высок. Поэтому врачи рекомендуют регулярно проходить обследования на наличие вируса в организме и при необходимости проводить соответствующее лечение, которое будет удерживать инфекцию в латентном состоянии.
Справка! Попав в организм человека однажды, вирус папилломы остается в нем навсегда.
Когда нужно записаться на обследование?
Показаниями для анализа на ВПЧ являются:
- наличие активно размножающегося нароста на слизистых оболочках и кожных покровах;
- выделения из половых органов нехарактерного типа или эрозийные проявления в области поражения;
- наличие зуда, боли, жжения и прочих симптомов в области развития нароста;
- бесплодие, преждевременные роды или частые выкидыши;
- диагностирование возбудителя у полового партнера;
- наличие случайных и беспорядочных половых контактов;
- подозрение на наличие возбудителя при плановом профилактическом осмотре.
Кроме того, сдавать анализы на ВПЧ рекомендуется при наличии:
- бородавок;
- кондилом;
- дисплазии тканей.
Как часто нужно сдавать анализы на папилломавирус?
Женщинам до 30 лет рекомендуется сдавать анализ на ВПЧ 2 раза в год. Женщинам и мужчинам после 35 лет данные исследования желательно проходить 1 раз в год.
Как узнать тип вируса папилломы человека?
Как уже было сказано, классификация ВПЧ основана на степени его онкогенности. Генотипирование вирусов необходимо для определения тяжести патологии и выбора оптимальной схемы лечения. Чаще всего для этой цели используется ПЦР-диагностика и Digene-тест.
Справка! Определить штамм вируса, может только врач-лаборант.
Особенности мужской и женской патологии
У женщин развитие ВПЧ, может длительное время протекать незаметно – на фоне воспалений половых органов – эндоцервицита, псевдоэрозий, вульвовагинита, кроме того, вирус практически всегда сочетается с другими инфекциями – трихомониазом, герпесом, хламидиозом, сифилисом, гонореей.
Клиническая картина наличия вирусной инфекции в женском организме:
- жжение и зуд в области гениталий;
- нетипичные выделения;
- затруднения и боль при мочеиспускании;
- дискомфорт и болезненность при интимной близости;
- кондиломатоз.
Кондиломы могут поражать влагалище, вульву, уретру, шейку матки, прямую кишку, анус, промежность.
У мужчин ВПЧ тоже длительное время, может никак себя не проявлять, и мужчина, оказывается только носителем инфекции. Точно так же, как и у женщин ВПЧ у мужчин сочетается с хламидиозом, гонореей, герпесом и прочими инфекциями, передающимися половым путем.
Признаки у мужчин:
- дискомфорт в области гениталий;
- наличие выделений;
- боль при мочеиспускании и интимной близости;
- кондиломатоз.
Кондиломы у мужчин появляются на крайней плоти, на уздечке, в области ануса.
Современные диагностические методы
Чтобы поставить правильный диагноз, врач направляет пациента на ряд специализированных анализов. Женщинам, перед тем как сдавать анализы следует пройти гинекологический осмотр. Назначить необходимые анализы может только врач, полагаться на опыт друзей и знакомых в этом вопросе не целесообразно.
Ниже подробно описываются анализы, с помощью которых можно не только определить наличие вируса в организме, но и выяснить его тип и распространенность.
Осмотр на папилломовирусную инфекцию
В процессе клинического исследования врач осматривает тело и половые органы пациента (женщины осматриваются в гинекологическом кресле).
Все манипуляции должны проводиться при хорошем освещении. Первичная задача специалиста – отличить вирусные элементы от других заболеваний дермы и слизистых.
Количественный анализ
Количественное определение вируса направлено на обнаружение присутствия патологии, а также степени активности вируса. Данные показатели нужны и для определения уровня онкогенности вируса.
Исследование проводится методом полимерной реакции, и обязательно при отсутствии какой-либо симптоматики по причине небольшого количества вирусных агентов в организме человека.
В отличие от качественного анализа ПЦР, количественный анализ не только дает ответ «отрицательно» или «положительно», но и определяет концентрацию вирусных агентов. Без количественного анализа дальнейшая диагностика считается бесполезной.
Общий анализ крови и мочи
Надо сказать, что общий анализ крови и мочи наличие в организме патогенного вируса опередить не может. Однако, эти анализы назначаются для выявления сопутствующих патологий, передающихся половым путем, так как практически всегда возбудителей оказывается несколько. Общий анализ крови может определить наличие следующих патологий:
- микоплазмоз;
- хламидиоз;
- ВИЧ и прочие.
Как проводится и что показывает ПЦР
ПЦР при ВПЧ – это очень точный диагностический метод, поскольку в данном случае выявляются не следы присутствия вируса, а непосредственно ДНК возбудителя.
Данный анализ может проводиться по моче, крови, слюне и прочих биологических жидкостей, но самым предпочтительным материалом является мазок – у мужчин из уретры, у женщин из шейки матки.
Мазок забирается при помощи специальной щеточки, и направляется в лабораторию на исследование, уже через три дня результат будет готов.
Если анализ проводится по крови, надо помнить, что кровь на ПЦР сдается натощак. Мочу же для анализа надо собирать утром, и в лаборатории она должна оказаться не позднее чем через 4 часа.
Для всех видов анализа необходимо за пару дней отказаться от половых контактов, алкоголя и курения. Кроме того, необходимо обговорить с врачом прием медикаментозных средств и противовирусных препаратов, которые могут исказить картину заболевания.
Digene-тест
Тоже крайне чувствительный метод исследования, который может и выявить наличие вируса в организме, и установить его тип, и определить концентрацию вируса.
Справка! Digene-тест – золотой стандарт в диагностике вируса папилломы человека.
Метод имеет следующие преимущества:
- позволяет обнаружить 18 штаммов вируса, из которых 13 имеют высокую онкогенность;
- безболезненность – стандартный мазок;
- относительно быстро можно получить результаты исследования;
- образцы могут быть использованы для цитологического исследования;
- высокая точность и простота.
Антитела
Папилломавирус в крови определяется с помощью иммуноферментного анализа. Это довольно чувствительный анализ, и его результаты очень точны.
Принцип методики – обнаружение в крови пациента антител к вирусу папилломы человека. При этом выяснить штамм вируса невозможно. По сути, эта методика доказывает лишь контакт человека с вирусом, который иммунитет вполне мог и подавить.
Цитологическое исследование
Для цитологического исследования потребуется мазок с шейки матки у женщин или из уретры у мужчин. Данный метод позволяет определить наличие вируса, его тип, количество и изменения клеток слизистой.
Кольпоскопия
С помощью кольпоскопии определить наличие вируса в организме невозможно, поскольку это не лабораторный анализ, а инструментальный осмотр вульвы и шейки матки.
Однако, этот метод часто используется в диагностике ВПЧ, так как с его помощью можно получить материал для лабораторного исследования, а кроме того, выявить наличие генитальных бородавок, предраковых изменений и онкологических процессов.
Гистологическое обследование
Для проведения гистологического анализа необходимо провести биопсию, она необходима для получения материала для исследования.
Далее, специалист обрабатывает образец специальным раствором, в результате чего получается гистологический блок. Его разрезают на тонкие пластинки.
Окрашивают красителями и изучают под микроскопом. Это очень важный этап исследования, так как он позволяет установить наличие злокачественных клеток со 100% достоверностью. Анализ будет готов через 10 дней.
Полимеразная цепная реакция
ПЦР может проводиться 4 методами:
- Качественный способ – подтверждение или опровержение наличия вируса в организме.
- Генотипирование – установка вида вируса. Также этот метод применяется для определения эффективности проведенного лечения.
- Комбинированный метод – узкоспециализированный метод, объединяющий два предыдущих. Назначается чаще всего при подозрении на наличие высокоонкогенного штамма папилломовируса.
- Количественный – определяет концентрацию и развитие вируса.
Подготовка к сдаче анализов
Безусловно, подготовка к сдаче анализов зависит от того, какой метод исследования был назначен врачом. Специалист должен деталью проинформировать пациента о нюансах подготовительного этапа.
Если обобщить все правила подготовки к сдаче анализов на ВПЧ, они выглядят следующим образом:
- Прекратить прием всех медикаментов, а особенно противовирусных препаратов.
- За пару недель до анализов, пересмотреть свой рацион питания, исключить из него жирное, копченое и острое.
- За несколько дней отказаться от употребления спиртосодержащей продукции.
- В день анализа не курить.
- Накануне сдачи анализов постараться снизить умственную и физическую нагрузку.
- Перед сдачей мазка женщинам за 2 часа не рекомендуется мочиться.
- Женщинам за 3 дня стоит исключить использование средств интимной гигиены, которые могут оказать бактерицидное действие.
- За 2 дня исключить половые контакты.
Правила забора биоматериала
Кровь забирается натощак, пробирку нужно закрыть крышкой и перевернуть вверх дном, чтобы кровь хорошо перемешалась с антикоагулянтом. Кровь можно хранить не более 6 часов, при температуре 20-25 градусов. Если кровь взята для количественного исследования, температура хранения не должна превышать 2-8 градусов тепла.
Для анализа мочи нужна первая утренняя порция в количестве 15-20 мл. сбор мочи должен проводиться только после качественного туалета наружных половых органов.
Во время менструации собирать мочу не следует. Условия хранения полученного материала – не более 3 суток, в стерильной посуде при температуре 2-8 градусов тепла.
Соскобное отделяемое из влагалища, цервикального канала или уретры забирается при помощи зонда. Собранный материал переносится в стерильную пробирку, которая плотно закрывается и маркируется.
В некоторых случаях требуется биопсийный материал. В этом случае его собирают с очага инфекции. Кусочки ткани помещаются в стерильные пробирки, которые плотно закрывают и хранят при комнатной температуре не более 6 часов.
Расшифровка результатов
Интерпретировать результаты анализов на ВПЧ, может только врач. Конечно, в норме результат должен быт отрицательным. Результаты ПЦР и Digene-теста исчисляются в коэффициенте Lg, он указывает на относительное количество вирусных агентов.
Что касается анализа на антитела, он измеряется в МЕ/мл, и указывает на то, насколько давно произошло заражение и насколько сильный ответ дает иммунная система на возбудителя.
Положительный
Если результат показывает менее 3 Lg, это свидетельствует о незначительной концентрации вирусов, если 3-5 Lg – это клинически значимая концентрация, более 5 Lg – высокое содержание вирусной инфекции.
Если при анализе на наличие антител результат IgM – это значит, что организм инфицирован недавно, IgG значит, что вирус в организме находится уже давно.
Отрицательный
Отрицательный анализ свидетельствует о том, что в ходе приведенных исследований определяемых штаммов ВПЧ выявлено не было. Значит, человек не является носителем вируса.
Стоимость исследования
Цена в зависимости от метода исследования:
- Digene-тест – около 5000 рублей.
- ПАП— Digene-тест – около 7000 рублей.
- ПЦР – 1000 рублей.
Опасность вируса папилломы человека недооценивать не стоит, несмотря на то, что не все штаммы данной инфекции имеют высокий онкогенный индекс, многие из них могут привести к серьезным и смертельным заболеваниям.
Определить онкогенность вируса, возможно только в лабораторных условиях, поэтому каждый человек должен регулярно сдавать необходимые анализы и консультироваться со специалистом. Только так можно предупредить развитие онкологии и уменьшить дерматологические проявления вируса.
Источник
