Дифференцированное определение днк впч
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток урогенитальный
Определение ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) 16, 18 типа (HPV 16, 18) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Вирус папилломы человека (ВПЧ) может быть причиной возникновения рака гениталий у женщин и плоскоклеточного рака у мужчин и женщин. Доказано, что этот вирус является причиной возникновения остроконечных кондилом, кондилом и новообразований шейки матки. Различные виды ВПЧ являются причиной различных поражений. Некоторые из них являются факторами высокого онкогенного риска. Более 90% всех цервикальных карцином позитивны к присутствию ВПЧ. Наиболее часто в материале из опухолей шейки матки обнаруживаются 16 и 18 типы ВПЧ. Обнаружение в исследуемом материале ВПЧ не говорит о наличии злокачественного процесса, но требует дополнительного гистологического исследования и динамического наблюдения.
Необходимым условием получения достоверного результата исследования является соблюдение техники взятия соскоба эпителиальных клеток. В состав тестов по диагностике и мониторингу ВПЧ введен специальный параметр – контроль взятия материала (КВМ). КВМ представляет собой тест по определению количества геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент – специфичные участки ДНК ВПЧ 16, 18 типа;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность определения 100 копий ДНК ВПЧ 16, 18 типа в образце.
Литература
- Профилактика рака шейки матки: Руководство для врачей. – М.: МЕДпресс-информ, 2008.
- Полонская Н.Ю., Юрасова И.В., Сокольская Т.Ю. Преимущества и эффективность стандвртизации цитологических исследований в гинекологии // Клиническая лабораторная диагностика. – 2004. №11 с.47-50.
- Bekkers R., Meijer C., et al. Effects of HPV detection in population-based screening programmers for cervical cancer: a Dutch moment // Gynecol. Oncol. 2006; Mar: 100(3):451-4.
- Khan M., et al. The elevated 10-year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus (HPV) type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinical practice // J. nat. cancer inst. 2005; 97:1072-9.
- Snijders J., Meijer C. The value of viral load in HPV detection in screening // HPV today 2006; 8:8-9.
Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5 –ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. При наличии патологических изменений, взятие материала проводится в день обращения. Накануне и в день обследования пациентке не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии ( общей / местной) и во время menses, ранее 24- 48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. Рекомендуется брать материал не ранее, чем через 14 дней после применения антибактериальных препаратов и местных антисептиков, и не ранее, чем через 1 месяц после применения антибиотиков перорально. Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2 – 3 часов после мочеиспускания.
Для мужчин: За 1–2 суток до взятия мазка (соскоба) необходимо исключить половые контакты. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии ( общей / местной). Нельзя мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры.
С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться
здесь >>
Проявления трансформирующей дисплазии в различной степени.
Ослабление иммунитета.
Профилактические скрининговые исследования.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено» для каждого типа ВПЧ (16, 18).
- «обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты ДНК, специфичные для ВПЧ 16, 18 типа; инфицирование ВПЧ указанного типа.
- «не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для ВПЧ 16, 18 типа или концентрация возбудителей в образце ниже границы чувствительности теста.
Контроль взятия материала:
Тест КВМ выполняется до проведения тестов по выявлению ДНК ВПЧ. В случае, если в пробе значение КВМ неудовлетворительное, т.е. менее 4 lg (10000) копий ДНК человека в пробе, исследование ДНК ВПЧ не проводится и рекомендуется повторное взятие биологического материала.
Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.
Источник
Папилломатозная инфекция — это патологическое состояние организма, когда на теле появляются наросты. Причиной появления болезни является папилломавирус. При обнаружении ДНК ВПЧ высокого риска перерождения необходимо срочно принимать необходимые меры, о которых должен рассказать лечащий врач.
Что такое ДНК ВПЧ
ДНК папилломавирусов высокого и низкого канцерогенного риска представляет собой нуклеиновую кислоту, которая содержит наследственную информацию и передает ее из поколения в поколение. Для ВПЧ характерна двухцепочная молекула генного аппарата.
Вирус должен попасть внутрь клетки, чтобы размножаться.
Инфекция передается контактно-бытовым, половым, вертикальным путем (от зараженной матери при естественном родоразрешении). Если на теле имеются царапины, микротрещины, инфекция передается от больного человека к здоровому.
Половой путь передачи патологии происходит при любом сексуальном контакте с носителем заболевания. ВПЧ проникает через слизистые оболочки на наружные и внутренние половые органы, ротовую полость, анальную область. Папилломы на члене, анусе, половых губах, шейке матке является распространенной локализацией патологических наростов.
Вертикальным путем заражаются младенцы. Инфицированная мать передает ДНК папилломавируса ребенку во время родов. Малыш контактирует со слизистой оболочкой родовых путей, где находится огромная концентрация ВПЧ.
Бородавки выскакивают у детей в период полового созревания. Связано с гормональной перестройкой организма.
Ослабленный иммунитет, частые респираторные инфекции, беременность, переохлаждение, вредные привычки, авитаминоз, нарушение концентрации гормонов в крови провоцируют появление бородавок на теле взрослых и детей.
Каким бывает ДНК вируса папилломы
Медицине известно о существовании около 170 видов вируса.
Известные штаммы отличаются друг от друга формой, генотипом, размерами, онкогенностью.
Прогноз для жизни и здоровья пациента при заражении ВПЧ зависит от типа микроорганизма.
Высокого канцерогенного риска
Выявление в организме ВПЧ ВКР 16, 18, 35, 45 типов грозит серьезными нарушениями со стороны половых и мочевыделительных органов. В 70% перечисленные штаммы обнаруживаются при раке шейки матки, цервикального канала, ротовой полости, заднего прохода.
После проникновения внутрь эпителиальных клеток, высокоонкогенный вирус заменяет клеточную ДНК своей. Происходит пролиферация атипических клеток. Человек может вовремя заметить подозрительное образование, если оно располагается на видимых местах. Папилломы на шейке матки или в анальной области зачастую определяются поздно. Ежегодное посещение врача-гинеколога, дерматолога, уролога со сдачей необходимых анализов снижает риск развития осложнений. Заподозрить недуг поможет простой мазок по Папаниколау, полимеразно-цепная реакция или даджейн тест.
Низкого канцерогенного риска
Нуждаетесь в совете опытного врача?
Получите консультацию врача в онлайн-режиме. Задайте свой вопрос прямо сейчас.
Задать бесплатный вопрос
Неонкогенные типы ВПЧ и их ДНК не вызывают перерождения доброкачественных наростов кожи в злокачественные опухоли. Остроконечные кондиломы на гениталиях, бородавки на руках и ногах вызываются вирусом. Такие образования не приводят к развитию рака. После заражения вирусами 1-5 типов проходит несколько месяцев, когда на теле выскакивают папилломы. Внешнее проявление инфекции связано с ослаблением иммунитета, стрессовыми ситуациями, частой сменой половых партнеров. Патология проходит после удаления провоцирующих факторов из жизни больного.
ВПЧ низкого онкогенного риска считаются неагрессивными вирусами. Осложнения папилломавирусной инфекции могут возникнуть при повреждении образования. Кровотечение, присоединение бактериальной флоры — основные последствия повреждения наростов, вызванных вирусом папилломы человека. Малигнизация нароста практически исключена.
Методы диагностики ВПЧ
Скрининг заболевания включает целую группу обследований:
- Доктор сможет поставить правильный диагноз при первом осмотре нароста. Телесный цвет, неровные контуры, правильная форма, гладкая поверхность образования, типичная локализация свидетельствуют в пользу ВПЧ. Встречаются разрастания кондилом, которые напоминают куриный гребень. Образования располагаются тесно друг с другом, имеют бледно-розовый цвет. Множественные наросты обычно располагаются на головке члена у мужчин и на больших половых губах у женщин.
- Подробно разобраться с проблемой помогает анамнез заболевания. Пациенты могут не связывать появление наростов с определенными причинами. С момента инфицирования может пройти несколько месяцев и даже лет. Наводящие вопросы врача помогут найти первичный контакт с вирусом. Высокий риск заражения присутствует у людей, которые ведут беспорядочную половую жизнь, имеют иммунные заболевания. На течение болезни влияет наличие вредных привычек, авитаминоза, гормональных нарушений в анамнезе.
- Женщины должны обязательно пройти осмотр гинеколога. Осмотр поможет выявить наличие папиллом на шейки матки. Стандартный мазок по Папаниколау покажет воспалительные изменения органа, перерождение эпителиальных клеток в атипичные, злокачественные.
- По показаниям женщинам назначается кольпоскопия. Метод позволяет осмотреть слизистую оболочку влагалища, вульвы, шейки матки под увеличением. Нередко во время кольпоскопии выявляют микроскопические дефекты слизистой оболочки, дисплазию, эрозию, злокачественные опухоли.
- Биопсия с гистологическим исследованием проводится при выявлении очагов патологии. Врач берет небольшой образец ткани, отправляет в лабораторию для подробного изучения под микроскопом ее ДНК.
- Иммуноферментный анализ позволяет обнаружить антитела к вирусу папилломы человека. Для исследования нужно сдать кровь из вены. К недостаткам метода относится невозможность количественного определения вируса.
- С помощью ПЦР-диагностики обнаруживается ДНК ВПЧ. После типирования вируса пациент узнает о наличии/отсутствии микроорганизма.
- Digene-тест — современный метод диагностики папилломавирусной инфекции. Показывает наличие онкогенных штаммов вируса. Даджейн тест позволяет на ранних стадиях узнать о заражении и не допустить развитие онкопатологии. При положительном ответе, пациенту нужно вести здоровый образ жизни, избегать провоцирующих факторов папилломатоза. Инфицированным людям следует ежегодно проходить обследование, чтобы вовремя дифференцировать рак.
Что означают результаты анализов на папилломавирус
Дифференцированное определение ДНК ВПЧ позволяет выявить типы вируса высокого и низкого онкогенного риска. Врач-гинеколог или врач-уролог сможет правильно трактовать результаты полученных анализов.
В бланке с ПЦР-исследованием могут указываться следующие данные:
- ДНК вируса папилломы человека не обнаружена – пациент не инфицирован.
- Значение Lg<3 обозначает наличие папилломавируса внутри организма. Его концентрация незначительна.
- Результат Lg 3–5 свидетельствует о значительном количестве ВПЧ внутри организма.
- Значение Lg > 5 указывает на высокую вирусную нагрузку.
Отрицательный результат показывает отсутствие инфекции.
По результатам digene test можно судить о риске развития онкопатологии. У женщин берется соскоб из влагалища, у мужчин — соскоб с уретры. Полученный материал исследуют под микроскопом. Результат теста значится в единицах. Значение показывает пропорциональное соотношение количества копий вируса к определенному пороговому уровню, который равняется 100000 копий ВПЧ на 1 мл материала.
При отсутствии ДНК ВПЧ высокого онкогенного риска лаборатория уведомит пациента, что ДНК не обнаружено, а положительный результат будет, когда количество копий вируса выше порогового значения.
Возможные осложнения и прогноз жизни
Папилломатозная инфекция не проявляется никакими симптомами. Основным и единственным признаком может быть появление папилломы. Элементы лечатся прижигающими препаратами, народными средствами и аппаратными методами. Прогноз заболевания благоприятный. Правильный настрой и ежедневное соблюдение простых правил помогут предотвратить рецидивы заболевания:
- Откажитесь от вредных привычек. Курение, алкоголь негативно влияют на функционирование внутренних органов. Сильный иммунитет не даст патологии проявить себя.
- Правильное питание способствует укреплению защитных сил организма.
- Не запускайте острые и хронические заболевания. Периодическое посещение доктора, соблюдение врачебных рекомендаций помогут выстоять против папилломатоза.
- При появлении папиллом сначала проконсультируйтесь со специалистом. Доктор назначит комплексное лечение, которое подействует на микроорганизм изнутри и снаружи.
- Избегайте стрессовых ситуаций.
Соблюдение несложных правил предотвращает неприятные симптомы инфекции. Запущенные случаи патологии представляют опасность в виде следующих осложнений:
- Дисплазия шейки матки у женщин заканчивается развитием злокачественной опухоли. Папилломы урогенитального тракта у мужчин приводит к перекрыванию просвета мочевыводящего канала. Нарушается мочеиспускание, появляются болезненные ощущения во время половых актов.
- Бородавки могут травмироваться. Возникает кровотечение, которое долго останавливается.
- Дефектные наросты инфицируются бактериальными агентами. Развиваются инфекции с образованием гнойной полости.
Ранняя диагностика, способствующая нахождению ДНК ВПЧ, правильно назначенное лечение предупреждают развитие нежелательных последствий.
Статья прошла проверку редакцией сайта
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток урогенитальный
Определение ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) 16, 18 типа (HPV 16, 18) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Вирус папилломы человека (ВПЧ) может быть причиной возникновения рака гениталий у женщин и плоскоклеточного рака у мужчин и женщин. Доказано, что этот вирус является причиной возникновения остроконечных кондилом, кондилом и новообразований шейки матки. Различные виды ВПЧ являются причиной различных поражений. Некоторые из них являются факторами высокого онкогенного риска. Более 90% всех цервикальных карцином позитивны к присутствию ВПЧ. Наиболее часто в материале из опухолей шейки матки обнаруживаются 16 и 18 типы ВПЧ. Обнаружение в исследуемом материале ВПЧ не говорит о наличии злокачественного процесса, но требует дополнительного гистологического исследования и динамического наблюдения.
Необходимым условием получения достоверного результата исследования является соблюдение техники взятия соскоба эпителиальных клеток. В состав тестов по диагностике и мониторингу ВПЧ введен специальный параметр – контроль взятия материала (КВМ). КВМ представляет собой тест по определению количества геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент – специфичные участки ДНК ВПЧ 16, 18 типа;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность определения 100 копий ДНК ВПЧ 16, 18 типа в образце.
Литература
- Профилактика рака шейки матки: Руководство для врачей. – М.: МЕДпресс-информ, 2008.
- Полонская Н.Ю., Юрасова И.В., Сокольская Т.Ю. Преимущества и эффективность стандвртизации цитологических исследований в гинекологии // Клиническая лабораторная диагностика. – 2004. №11 с.47-50.
- Bekkers R., Meijer C., et al. Effects of HPV detection in population-based screening programmers for cervical cancer: a Dutch moment // Gynecol. Oncol. 2006; Mar: 100(3):451-4.
- Khan M., et al. The elevated 10-year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus (HPV) type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinical practice // J. nat. cancer inst. 2005; 97:1072-9.
- Snijders J., Meijer C. The value of viral load in HPV detection in screening // HPV today 2006; 8:8-9.
Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5 –ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. При наличии патологических изменений, взятие материала проводится в день обращения. Накануне и в день обследования пациентке не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии ( общей / местной) и во время menses, ранее 24- 48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. Рекомендуется брать материал не ранее, чем через 14 дней после применения антибактериальных препаратов и местных антисептиков, и не ранее, чем через 1 месяц после применения антибиотиков перорально. Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2 – 3 часов после мочеиспускания.
Для мужчин: За 1–2 суток до взятия мазка (соскоба) необходимо исключить половые контакты. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии ( общей / местной). Нельзя мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры.
С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться
здесь >>
Проявления трансформирующей дисплазии в различной степени.
Ослабление иммунитета.
Профилактические скрининговые исследования.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено» для каждого типа ВПЧ (16, 18).
- «обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты ДНК, специфичные для ВПЧ 16, 18 типа; инфицирование ВПЧ указанного типа.
- «не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для ВПЧ 16, 18 типа или концентрация возбудителей в образце ниже границы чувствительности теста.
Контроль взятия материала:
Тест КВМ выполняется до проведения тестов по выявлению ДНК ВПЧ. В случае, если в пробе значение КВМ неудовлетворительное, т.е. менее 4 lg (10000) копий ДНК человека в пробе, исследование ДНК ВПЧ не проводится и рекомендуется повторное взятие биологического материала.
Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.
Источник