Что показывает впч генотипирование пцр
Вирус папилломы человека присутствует у многих людей. Чтобы обнаружить его, необходимо сдать ПЦР на ВПЧ. С помощью этого исследования возможно выявить наличие вируса, количество и генотип. Этот метод считается точным и надежным, так как исследование с помощью полимеразной цепной реакции дает достоверный результат. Вирус папилломы иногда находится в неактивном состоянии, поэтому при наличии хоть одного симптома такого заболевания для подтверждения диагноза проводят исследование методом ПЦР.
ПЦР-тест позволяет узнать наличие вируса папилломы, а так же его тип и степень угрозы здоровью.
Общие сведения
ПЦР метод предполагает выделение в ДНК пациента чужеродной ДНК. Дело в том, что эти клетки состоят из объединенных четырех нуклеотидов. Согласно основному правилу генетики, они располагаются в определенном порядке. ДНК инородного микроорганизма нарушает этот порядок, что позволяет выявить его даже малейшую частицу. Анализ на ПЦР проводится с присоединением возбудителя ВПЧ к ДНК обследуемого, что, приводит к стремительному делению клеток. ПЦР является достаточно распространенным анализом. Этот метод очень точен и способен определить наличие ВПЧ даже в инкубационный период. При помощи ПЦР можно выяснить:
- есть ли у человека папилломавирус;
- какой штамм инфекции;
- какое количество ВПЧ в крови.
В норме считается, что небольшое количество вируса папилломы человека присутствует, поэтому его обнаружение не количественным способом не результативно. Диагностическое значение имеет определение количества ВПЧ, а также его подтипа, который бывает как безопасным для здоровья, так и онкогенным. Чтобы обезопасить себя от возможных негативных последствий, важно вовремя сделать исследование ПЦР на вирус папилломы человека, проконсультироваться с врачом и начать необходимое лечение.
Вернуться к оглавлению
Показания
Наличие бородавок – повод пройти тест ПЦР.
Заразиться ВПЧ возможно только от другого человека. Патогенный микроорганизм, попадая в кровь, размножается в верхних слоях кожных покровов, что приводит к характерным проявлениям — образованию папиллом или кондилом. Так как заболевание очень распространено и наблюдается практически у 80% населения, вероятность заразиться им высока. Папилломавирус передается при помощи таких путей:
- незащищенный половой акт;
- во время поцелуя;
- ребенку от мамы при родах;
- бытовым путем;
- при тесных соприкосновениях кожи.
В основном показаниями для проведения ПЦР ВПЧ являются кожные признаки заболевания, которые выглядят как бородавки на тонкой нитеобразной ножке. Даже если характерных кондилом на коже не наблюдается, вирус все равно может присутствовать в крови, но протекать бессимптомно. Если обнаруживаются папилломавирусные инфекции 16-го и 18-го подтипов, необходимо регулярно посещать гинеколога или уролога, проходить диагностическое обследование и сдавать анализ на ВПЧ. Только благодаря своевременному обращению к врачу имеется возможность не дать развиться этой коварной болезни.
Вернуться к оглавлению
Как сдавать: подготовка к обследованию
Специальной схемы подготовки к ПЦР исследованию нет. Такая диагностика предполагает взятие соскоба из уретры у мужчин. Женщины с целью определения ВПЧ сдают мазки, которые в последующем отправляют на ПЦР исследование. В связи с этим, единственной подготовкой к обследованию с помощью ПЦР является то, что перед прохождением анализа следует постараться не мочиться в течение двух часов. К особенностям такой диагностики относят то, что в течение трех дней перед ее прохождением важно воздержаться от половых контактов и принятий алкогольных напитков. Кроме основных пунктов подготовки, делая скрининг на ВПЧ, не следует забывать об интимной гигиене, впрочем, как при подготовке к любым гинекологическим манипуляциям.
Вернуться к оглавлению
Взятие биоматериала
От того, насколько качественно взят биоматериал, зависят результаты обследования ПЦР. Ведь если нарушится стерильность, в материал попадут инородные вещества или при заборе будет взято недостаточное количество анализируемых клеток, исследование будет проведено с нарушениями. Поэтому чистота, внимательность и качественное проведение анализа — это залог достоверности показателей.
Вернуться к оглавлению
Процедура у женщин
Перед тем как сделать соскоб, женщине с помощью стерильного раствора обрабатывают шейку метки. После этого, специальной щеточкой берут мазок из внутреннего канала. Делают это с помощью специального зонда или щеточки. У женщин это приспособление вводится на глубину 1-го сантиметра, после чего в течение 3-х секунд врач вращает его, совершая соскоб со стенок шейки матки. Потом аккуратно, не задевая стенок влагалища, доктор достает щеточку и помещает в заранее подготовленную пробирку. В течение 15-ти секунд она находится там, потом осторожно обтирается об стенки пробирки и извлекается. Пробирка закрывается и направляется на последующее проведение исследования.
Вернуться к оглавлению
Процедура у мужчин
Процедура у мужчин схожа. Прежде всего врач обрабатывает при помощи физиологического раствора головку полового члена вместе с отверстием мочеиспускательного канала. Щеточка вставляется на большую глубину, около 4-х сантиметров. Потом проводящий анализ вращает зонд, собирая биоматериал со стенок уретры. После неприятной процедуры щеточка помещается в пробирку и передается далее на лабораторное исследование. Готовый биоматериал имеет срок годности хранения при комнатной температуре, который составляет двое суток. Существует показатель контроля взятия материала, который обязательно указывается в бланке и подразумевает правильность и качественность проведения урогенитального соскоба.
Показатель контроля взятия биоматериала должен быть не менее 4-х единиц, если же он ниже — анализ нельзя считать достоверным и его нужно сдать еще раз.
Разработаны четыре методики проведения ПЦР тестирования на ВПЧ.
Вернуться к оглавлению
Виды методик
Анализ ПЦР проводится с помощью разных способов определения ВПЧ. Каждый из них характеризуется своими особенностями и отличается точностью проводимого исследования. Среди таких выделяют 4 метода:
- качественный метод;
- генотипирование;
- комбинированный способ;
- количественный.
Вернуться к оглавлению
Качественный способ
Такой метод ПЦР характеризуется выявлением высокого канцерогенного риска ВПЧ. Практикуется использование его вместе с другими способами определения вируса. Главным недостатком качественного метода определения ВПЧ является то, что с его помощью нельзя установить тип возбудителя, а возможно лишь подтвердить факт заражения. Качественный метод способен показать наличие вируса от 14-го до 21-го генотипа. В бланке указывается две оценки: «обнаружено» и «не обнаружено». В первом варианте подразумевается, что в анализируемом биоматериале было найдено ДНК ВПЧ, во втором — эти же клетки отсутствуют.
Вернуться к оглавлению
Методика с генотипированием
Методика ПЦР с генотипированием позволяет выявить опасный тип ВПЧ и возможный рецидив.
Следующий способ ПЦР, метод с генотипированием, способен определить тип вируса. Это важно для прогнозирования и последующего лечения, так как 16 и 18 тип папилломавируса может стать причиной развития онкологических заболеваний. Если обнаруживаются такие типы, в обязательном порядке проводят кольпоскопию и цитологию урогенитальных клеток.
Генотипирование проводят тогда, когда важно отличить, произошло повторное заражение вирусом или он остался. Считают, что ВПЧ выжил после проведенного лечения, если в анализе ПЦР повторно определяется тот же генотип. Но если в исследовании обнаруживается другой тип вируса, то это говорит о повторном инфицировании ВПЧ. У семейной пары иногда определяют разные типы ВПЧ, что возможно в том случае, когда два организма по-разному освобождаются от вируса. В готовом бланке по каждому генотипу ВПЧ указывается ответ: «обнаружено» или «не обнаружено».
Вернуться к оглавлению
Комбинированный метод
Комбинированный способ состоит из качественного определения 16-го типа папилломавируса вместе с генотипированием. Ответ возможен в таких 3-х вариантах:
- не обнаружено;
- обнаружено, в том числе вирус папилломы человека 16-го типа;
- обнаружено 16 тип папилломавируса.
В первом варианте — ДНК ВПЧ указанного типа не было найдено в биоматериале. Второй вариант означает, что кроме 16-го типа присутствуют еще другие генотипы ВПЧ. И последний вариант указывает на присутствие только 16-го типа ВПЧ. Комбинированный способ ПЦР очень важен в диагностике, так как определяет наличие одного из самых опасных подтипов папилломавируса, который приводит к развитию раковых опухолей.
Вернуться к оглавлению
Количественное определение без генотипирования
Методика ПЦР без генотипирования даёт возможность увидеть развитие раковых новообразований.
С помощью такого метода определяют количество ВПЧ в анализируемом биоматериале. Полученная информация свидетельствует о тяжести инфицирования, помогает сделать прогноз и подобрать схему лечения. Определить количество возможно 16-го и 18-го генотипа ВПЧ, что немаловажно в медицинской диагностике. Такой вид ПЦР указывает на количество клеток вируса среди взятых 100 тысяч. Если в бланке пишется, что найдено более 5-ти клеток в поле зрения, то это говорит о повышенной концентрации ВПЧ и риске развития злокачественных образований. При малозначимом количестве ВПЧ указывается значение менее 3-х.
Вернуться к оглавлению
Расшифровка ПЦР
Расшифровывать результаты анализов должен врач. Но пациенту тоже важно знать о структуре бланка результатов и как правильно интерпретировать показатели. Однако помните, что найденная информация в интернете — ознакомительная. Ставить самостоятельно диагноз с его помощью не нужно. Если в анализе указано «ДНК не обнаружено», значит папилломавирус в крови отсутствует. Если показатель Lg 5 и больше, это свидетельствует о его высокой концентрации в крови, Lg 3−5 — о значимом количестве, менее 3-х — о незначительном. Подробную информацию о типе ВПЧ и схему лечения дает лечащий доктор.
ВПЧ способен вызвать рак шейки матки у женщины и другие злокачественные образования. Для мужчин этот микроорганизм тоже опасен, вплоть до развития онкологии. Папилломы, которые вырастают в мочеиспускательном канале способны привести к перекрытию просвета и вызвать импотенцию и бесплодие. Врачи заметили, что до 30-ти лет заболевания, которые вызваны ВПЧ, спонтанно регрессируют. Однако в пожилом возрасте обратное развитие происходит редко. Поэтому важно вовремя сдать анализы, правильно их расшифровать и начать лечение.
Вернуться к оглавлению
Преимущества и недостатки
ПЦР диагностика ВПЧ является одним из самых востребованных в медицине способом обнаружения папилломавируса в крови у человека. Полимеразная цепная реакция используется не только для обнаружения ВПЧ и определения его генотипа, но и при диагностике других заболеваний. Этот метод обладает множеством преимуществ перед другими при наличии всего нескольких недостатков.
| Преимущества и недостатки ПЦР | |
| Преимущества | Недостатки |
|
|
ПЦР показывает наличие ВПЧ и его тип, но оно может дать ложный результат при проведении процедуры у человека, уже болевшего данным заболеванием.
ПЦР чувствителен к живым и мертвым бактериям. Это означает, что у человека, который раннее болел ВПЧ и излечился, все равно присутствует ДНК погибших микроорганизмов. Из-за такой повышенной чувствительности возможен ложный положительный результат. Чтобы анализы были качественными и достоверными, лаборатория нуждается в квалифицированном персонале и обязательной сертификации.
Источник
При инфицировании папилломавирусом врач предложит пациенту пройти комплексное обследование. В обязательную программу входит тест на генотипирование ВПЧ. Исследование позволяет выявить вид вируса, его онкогенность. Это дает возможность выработать правильную стратегию лечения.
Что такое и особенности генотипирования ВПЧ
Генотипирование в классическом понимании – исследование, позволяющее сопоставлять и сравнивать наборы генов различных индивидуумов. Если речь идет о вирусах, этот анализ позволяет выявить штаммы возбудителя.
Папилломавирус является распространенным заболеванием. Основной путь передачи – контактный, при половом сношении, бытовой. Выявлено более 170 разновидностей вируса, 40 из которых поражают человека. Классификация ВПЧ основана на принципе онкогенности. Выделяют штаммы низкого, среднего и высокого риска.
Нуждаетесь в совете опытного врача?
Получите консультацию врача в онлайн-режиме. Задайте свой вопрос прямо сейчас.
Задать бесплатный вопрос
Генотипирование папилломавирусов используют для определения вида вируса. Это позволяет оценить тяжесть заболевания, подобрать тактику лечения пациента, составить прогноз и дать рекомендации по предотвращению рецидива заболевания.
Кроме того, определение штамма ВПЧ при генотипировании поможет врачу дифференцировать заболевание – острый процесс или рецидив – при повторном обращении пациента. Это позволяет корректировать курс лечения.
Заражение новым штаммом, недавнее инфицирование имеет благоприятный прогноз, в течение года велика вероятность спонтанного выздоровления и адекватного отклика на лечение. При хроническом течении заболевания самостоятельное подавление вируса маловероятно и прогноз не оптимистичный. Это показание для дополнительного обследования пациента, выявления факторов, способствующих повторному заражению или активации папилломавируса.
Какие методы диагностики могут определить генотип ВПЧ
Для диагностики папилломатоза показано комплексное обследование пациента. Желательно совместное с партнером. Генотипирование — важный шаг в исследовании.
Методы диагностики в зависимости от половой принадлежности:
- осмотр у гинеколога или дерматолога для женщин, уролога – для мужчин;
- забор отделяемого шейки матки — уретры у мужчин — для исключения ЗППП, воспалительных процессов в репродуктивных органах;
- кольпоскопия – осмотр шейки матки при помощи микроскопа, соскоб ткани слизистой оболочки для цитологического исследования и генотипирования;
- гемотест на антитела к ВПЧ – используется редко, только подтверждает только факт инфицирования. Материалом для исследования является венозная кровь. Не определяется вирусная нагрузка, тип возбудителя, потому что в кровь ВПЧ не попадает ни при каких условиях;
- ПЦР-диагностика – берется материал уретры и шейки матки. Позволяет выявить факт инфицирования, устраняет вопрос ВПЧ типирования, вирусную нагрузку на организм;
- Дайджен-тест – проводится аналогично ПЦР-анализу, определяет 8 онкогенных штаммов ВПЧ. Подтверждается факт заражения с расшифровкой по генотипам, определяется вирусная нагрузка.
Результаты анализа генотипирования — не доказательство супружеской измены, у партнеров реакция иммунитета на инфекцию и скорость самоизлечения различна.
Наличие ВПЧ высокоонкогенного типа не тождественно диагнозу «рак». Это фактор, способствующий развитию участков дисплазии, эрозии шейки матки и их перерождению в злокачественную опухоль.
Таблица онкогенности штаммов папилломавируса
По степени способности индуцировать развитие злокачественного процесса штаммы ВПЧ делят на 3 группы. Их можно определить по генотипированию.
Таблица. Классификация видов папилломавируса по признаку онкогенности.
| Группа штаммов | Номер типа HPV |
| Низкий риск | 3, 6, 11, 13, 32, 34, 40, 41, 42, 43, 44, 51, 61, 72, 73. |
| Средняя степень онкогенности | 30, 35, 45, 52, 53, 56, 58. |
| Высокий канцерогенный риск | 16, 18, 31, 33, 39, 50, 59, 64, 68, 70. |
ПЦР-метод при генотипировании ВПЧ отличается высокой диагностической чувствительностью. Точность теста – до 99%, цитологического исследования – всего 60%.
В 50% случаев рака шейки матки определяется штамм №16, в 10% – 18 подвид.
Инфицирование прочими высокоонкогенными типами папилломавируса диагностируют крайне редко.
Расшифровка расширенного теста с определением количества и типа вируса
Интерпретация результатов анализа — прерогатива врача. Реферетные (колебания в пределах нормы) значения показателей следует уточнять в лаборатории, методики обработки биологического материала могут отличаться в зависимости от оснащенности медицинского центра.
Результаты расширенного теста генотипирования с определением количества и типа вируса включают:
- Если не выявлен, на бланке будет указано – «не обнаружен».
- При положительном результате будут указаны штаммы ВПЧ с расчетом вирусной нагрузки. Единицы измерения – количество фрагментов ДНК на 100 тыс. клеток.
Возможные результаты:
- Lg<3 – присутствует в организме, не является клинически значимым. При отсутствии папиллом лечение не требуется. Медикаментозная терапия не показана. Пациент должен находиться под динамическим наблюдением.
- Lg от 3 до 5 – вирус выявлен, его количество значимо. При наличии кондилом, дисплазии или эрозии шейки матки вероятность перерождения ткани в злокачественную опухоль достаточно высока. Требуется медикаментозное лечение для подавления папилломавируса и деструкция наростов.
- Lg>5 – критически высокий уровень ВКР штамма. Показано комплексное обследование, медикаментозная терапия, деструкция кондилом. После – длительное динамическое наблюдение с контрольными пробами на папилломавирус.
В бланке результата генотипирования указывают специальную единицу – КВМ – это объем биологического материала, взятого для исследования. Для ВПЧ количество клеток эпителия для анализа должно быть более 104 копий на 1 образец. При меньшем значении КВМ количественный тест является недостоверным и требуется повторный забор образцов.
Если же на теле, половых органах присутствуют образования, а результаты анализа отрицательны, то это свидетельствует о следующем:
- Пациент нарушил правила подготовки к исследованию.
- Лаборант не соблюдал методику забора тканей для исследования.
- Произошло самостоятельное исцеление. Образования удаляют любым удобным способом.
В этих случаях рекомендуется провести контрольное взятие проб на генотипирование.
Расшифровка результатов анализа – прерогатива врача. Доктор учитывает анамнез пациента, его статус, наличие хронических заболеваний, форму патологии – острая или рецидивирующая – состояние эпителия шейки матки у женщин.
По совокупности данных исследования генотипирования, симптоматики и цитологического анализа вырабатывают тактику лечения. При высококанцерогенных штаммах медикаментозная терапия проводится у обоих партнеров. Затем показано длительное динамическое наблюдение и периодический мониторинг вирусной активности ВПЧ.
Наличие возбудителя, высокая вирусная нагрузка — не приговор. Требуется качественное лечение. Игнорирование рекомендаций врача будет иметь печальные последствия.
Статья прошла проверку редакцией сайта
Источник
